旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆与原核表达

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子(Tsserpin)基因序列设计1对引物,从旋毛虫肌幼虫提取总RNA,应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,进行限制性酶切后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-Tsserpin,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经PCR、限制性酶切分析及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物,表达产物纯化后用Western-blotting鉴定Tsserpin重组蛋白的抗原性。PCR与酶切鉴定结果显示,构建的重组表达质粒pET30a-Tsserpin与预期结果一致。测序结果表明,插入片段为1122bp,编码373个氨基酸,与GenBank中旋毛虫Tsserpin基因的相似性为99%。含有pET30a-Tsserpin重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为48.5ku,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析结果表明Tsserpin重组蛋白可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,提示其具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。     

强化网络道德教育需处理好三个关系

以社会主义核心价值体系引领大学生网络道德的教育是社会发展的必然要求,也是坚持社会主义核心价值体系中的一个重大的新课题,必须处理好理论与实践的辩证关系,处理好科技与人的辩证关系,处理好网络礼仪与核心价值观的辩证关系,进而为中国特色社会主义事业发展奠定坚实的基础。     

反向遗传技术及其在猪传染性胃肠炎病毒研究中的应用

对反向遗传学技术及其在RNA病毒研究中的应用进行了综述。论述了猪传染性胃肠炎病毒反向遗传技术的发展现状,并对该技术在猪传染性胃肠炎病毒的基因功能、致病机理、基因工程疫苗研究中的应用及前景等方面进行了探讨。     

在创新中落实在落实中创新——市总党组副书记、副主席王北平针对“1+9”文件出台的相关内容接受本刊记者采访

日前,在北京市总工会召开的十二届九次委员(扩大)会上,市总下发了"三级服务体系运行机制"、 "工会服务站规范化建设"、 "职工之家建设"、 "社区联合工会建设"、"加强产业工会建设"、 "专职工会社会工作者队伍建设"、"引导社会组织服务职工群众"、 "加强工会服务职工设施建设"、 "推进职工互助保障工作"等9个落实《关于深化工会三级服务体系建设参与加强和创新社会管理的意见》的文件,合称"1+9"文件.     

罗彩霞事件:告诉了我们什么

2009年3月,天津师范大学学生罗彩霞在办理网上银行业务、教师资格证时被拒绝.经查询,罗彩霞发现自己的身份被高中同学王佳俊盗用,随即报案.     

健全检察官职业保障制度的途径

检察官职业保障制度是司法制度的重要组成部分,也是当前检察官制度研究的一个重要课题。检察官作为法律监督者和正义的捍卫者,其自身权益必须首先得到保障。检察官职业保障制度的完善,不仅可以维护检察官群体的合法利益,而且可以促进整个社会的司法公正。文章从检察官职业保障制度的概念和内涵出发,系统分析当前我国在检察官职业保障方面存在的问题,以及健全检察官职业保障制度的必要性,并对如何完善检察官职业保障制度作出积极探索。     

毛泽东对中国社会主义工业化道路的探索及其现实意义

半个世纪前,毛泽东结合我国社会主义建设的实践,对中国社会主义工业化道路进行了艰辛而又曲折的探索。毛泽东从发展生产力的角度提出发展我国的现代工业,阐明了工业化的重要意义,论证了我国实现工业化的必要条件,提出了我国实现工业化的标准。毛泽东工业化道路思想经历了四个发展阶段。毛泽东的工业化道路思想对我国今后走新型工业化道路仍有指导意义和启示作用。     

北京圖書市場的開放和問題

單一的圖書發行渠道已被衝破,個體書攤緩解了“買書難”,但又帶起一股“黃色暗流”。如何才好呢?     

图书的生产

我们公司是全国知名公司,名字我就不说了.我怕说出来会吓倒许多人.我提示性地说一下,凡是在我们这个时代读过书的人都受到过我们公司的影响,换句话说,我们出过的畅销书风靡过大江南北、长城内外,每一次,那景象,真就像北国风光,万里雪飘.     

“寡妇村”易名記

福建省東山島東北隅有個村子,原名叫銅砵村。一九五〇年初,國民黨軍隊一夜之間就在這裹强行擄走一百四十七名壯丁,致使這裹的二百多戶人家中,有上百個青春婦女同丈夫分離。從此,銅砵村被人稱爲“寡婦村”,久而久之,“銅砵”之名,反倒無人知曉了。值得慶幸的是,近幾年來,先後已有八十多位當年的“壯丁”從台灣回來,與妻子兒女團聚。五年前回鄉定居的台胞黃文克,今年雖已八十有一,但精神矍鑠,看起來比他實際年齡小得多。