华蟾素注射液对胃癌细胞MGC-803增殖、迁移和侵袭能力及上皮-间质转化的影响

目的 探究华蟾素(cinobufagin, CBG)注射液对人胃癌细胞MGC803增殖、迁移和侵袭能力以及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 CCK-8检测CBG注射液对MGC-803存活率的影响;倒置显微镜下观察CBG注射液对MGC-803形态的影响;采用细胞划痕实验和Transwell小室检测CBG注射液对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测人胃癌细胞MGC-803中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Snail蛋白表达水平。结果 华蟾素注射液能显著抑制MGC-803细胞的增殖、迁移与侵袭(P<0.05),且呈剂量依赖性。Western blot检测结果显示,CBG注射液能显著上调E-cadherin蛋白表达水平(P<0.05),显著下调N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达水平(P<0.05)。结论 华蟾素注射液可以抑制胃癌细胞MGC-803的增殖、迁移侵袭及EMT。     

紫外分光光度法测定藤黄药材中总藤黄酸含量

目的 建立藤黄药材中总藤黄酸含量的测定方法。方法 采用紫外分光光度法，以新藤黄酸为对照品，在360 nm处对藤黄样品中的总藤黄酸进行含量测定。结果 〖JP2〗新藤黄酸浓度在5.304~26.520 mg/L范围内，与吸收度的线性关系良好（r=0.999 5），平均加样回收率为98.53%（RSD=0.21%，n=9）。〖JP〗结论 该方法简便、准确、重现性好，可用于藤黄药材的质量控制。     

新藤黄酸与细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响

［摘要］目的 研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）与细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase, ERK)特异性抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响。方法 新藤黄酸与ERK特异性抑制剂PD98059处理肺腺癌A549细胞，倒置显微镜观察细胞形态变化；甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium, MTT）法检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞内活性氧的变化；蛋白印迹法（Western blot）检测ERK、p ERK蛋白的表达。结果 MTT法结果表明GNA在2.5 μmol/L对肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用；与PD98059合用24 h，GNA的抑制作用更加明显。倒置显微镜观察显示GNA作用肺腺癌A549细胞24 h后，细胞固缩变圆，体积变小，部分细胞呈半贴壁状态；GNA和抑制剂PD98059合用后，多数细胞固缩变圆，脱落，并悬浮于培养液中；少数细胞体积增大、肿胀、破裂呈坏死状。流式细胞仪检测结果表明，20 μmol/L PD98059 + 2.5 μmol/L GNA共同作用于A549细胞24 h后，与GNA 2.5 μmol/L组比较细胞内活性氧生成增加。Western blot法检测表明，PD98059和GNA联合作用A549细胞24 h后，p-ERK 蛋白表达与GNA组比较显著降低。结论 GNA能诱导肺腺癌A549细胞凋亡，联合应用ERK抑制剂PD98059后可减少ERK蛋白的活化，增加肺腺癌A549细胞的凋亡；结果初步表明GNA诱导肺腺癌A549细胞的凋亡可能与调节ERK信号通路有关。