牦牛β-干扰素基因的克隆与表达

提取经植物血凝素(PHA)诱导培养的牦牛外周血淋巴细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增并克隆了牦牛IFN-β基因,经PCR和酶切鉴定及测序分析,再克隆到pGEX-4T-1质粒载体中,构建了原核表达重组载体,经IPTG诱导表达重组蛋白,可表达约41 ku的牦牛IFN-β融合蛋白,主要以包涵体形式存在。序列分析结果表明,牦牛IFN-β基因ORF为498 bp,与乳牛IFN-β参考序列的同源性高达98.6%,与猪、马、猫、人IFN-β基因的同源性分别为72.5%、68.9%、66.1%和63.5%,而与狗、鼠、鸡等动物的同源性均不超过25%;分子遗传进化树分析也表明,牦牛与乳牛IFN-β基因的亲缘关系最近,而与鼠、狗、鸡等的亲缘关系较远,说明IFN-β基因有种属差异性。     

传统元素在中华地区婚姻法律制度上的体现

法律具有民族特性,是民族的共同意识,通过发掘传统婚姻法元素在现代法律制度的体现,能有效地增进法律制度的优势互补,增强两岸四地对中华文明的认同感,形成具有特色的、完善的中华法系.     

欠发达地区农村文化建设的现状分析与对策思考——以陇南农村为例

在新农村建设中,尽管欠发达地区的农村文化建设取得了一定的成绩,但农村经济发展落后这一因素在很大程度上制约了他们的文化建设,使欠发达地区农村文化发展明显滞后。各级领导要树立正确的发展观,营造农村经济、政治、文化三个文明同步发展的良好氛围;在多元投入、解决新农村文化建设资金问题的基础上,教育、引导广大农民群众不应满足于做文化建设的受益者,更应成为文化建设积极主动的参与者。     

管理视角下的公安民警休息权保障对策研究

在当前社会形势下,公安工作日益趋于繁重,社会环境更加复杂,违法犯罪问题日益严重,这使公安工作面临着更大的挑战和压力。为了维护社会稳定,他们普遍长时间、高强度地工作,对身心健康造成了严重损害。本文在对警察休息权的现状、休息权的重要意义,民警休息权无法得到保障的原因等问题进行分析的基础上,用管理学的视角提出有效保障警察休息权的对策建议,希望有助于公安民警休息权的保障,也有利于提高公安工作效率。     

Dizi:Jovial Melodies Played on an Ancient Instrument

EMPEROR Xuanzong(685-762)of the Tang Dynasty(618-907)has been renowned for his versatility,particularly in music.There are many anecdotes about the talented emperor.Once,while sitting at court,Emperor Xuanzong kept moving his fingers up and down his stomach.After the court was dismissed,Gao Lishi,the royal stew-ard,came in and asked the emperor,"Your Majesty,I noticed you pressing your fingers up and down your abdomen.Are you feeling unwell?"Emperor Xuanzo-ng replied,"No,I am fine.Last night I dreamed I was visiting the Moon Palace,and the fairies played celes-tial music for me.The melody was so captivating that I was totally engrossed in it.Later,the fairies played music again to see me off.The heavenly tune was wistful,intoxicating,and moving.When I woke up,I felt the melody was still ringing in my ears,so I wrote it down right away.     

小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株F基因的克隆与原核表达

提取小反刍兽疫病毒(PPRV)疫苗株Nigeria 75/1的总RNA,用RT-PCR方法扩增F基因并克隆到pMD18-T载体中,以鉴定正确的质粒为模板克隆去掉N端信号肽和跨膜区的F基因(F-1)并亚克隆于原核表达载体pET-30a(+),得到重组质粒pET30-F-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析,同时将重组蛋白免疫SPF家兔制备抗体,进行间接免疫荧光检测并用ELISA测定抗体效价.结果显示,目的基因正确插入了表达载体,在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,用重组蛋白免疫3次后,兔血清抗体达到较高水平,Western-blot分析说明表达产物能够与兔血清抗体发生特异性反应,间接免疫荧光试验显示重组蛋白免疫兔阳性血清能够识别PPRV Nigeria 75/1株全病毒抗原.表明,重组蛋白在原核表达系统内得到了高水平的表达,并且具有较好的反应原性.     

行政裁量法律控制研究

对行政裁量法律控制机制进行研究,论证了权力机关对行政裁量的法律控制,在分析我国权力机关进行监督现状的基础上,提出应当借鉴一些国家实行的议会监察专员制度并结合我国国情加以改造使之符合我国的法治实践,对完善我国权力机关对行政裁量的监督提供了参考思路。在论证行政机关对行政裁量的法律控制时重点放在行政程序对行政裁量的法律控制上,对行政程序控制行政裁量的回避制度、听证制度、信息公开制度、参与制度、说明理由制度、职能分离制度进行了初步探讨。具体分析了司法机关对裁量的法律控制,提出了行政裁量权属于行政机关,司法机关不能审查,行政裁量属于行政权的运用活动、司法机关可以审查的观点,说明了审查的范围只限于行政裁量的合法性,在认定滥用职权的主观方面时主张采用“过错推定”的原则。结束语说明现代社会对行政机关提出的是积极进行行政裁量更好地为社会服务的要求,现代行政法上的行政裁量制度是以有效发挥行政裁量权的积极作用为目标。提出建立一支高素质的公务员队伍、提高公务员的依法行政意识和依法行政水平应当是解决行政裁量问题的最终途径,完善岗位责任制、发展责任控制模式是对行政裁量进行法律控制的最佳方案。     

符合社会主义市场经济要求的国有资产管理体制初探

社会主义市场经济下国有资产管理体制具有国有资产内涵扩大、管理方式市场化、管理主体专门化等特点。尽管新体制实现了两级架构和“三分离”,但仍存在若干局限性。为此,要加快股份制改革和经营者选拔任用体制改革,建构国有资产监管事权和财权机制,构筑科学的运营平台。     

口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达

为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与EGFP共表达质粒并在PK-15细胞中获得了表达。     

小反刍兽疫病毒H和F蛋白多抗原表位的表达及其反应原性

将通过计算机软件预测并通过间接ELISA检测确定的小反刍兽疫病毒(PPRV)H、F蛋白的10个B细胞抗原表位串联,再加上一个外源通用T细胞表位,表位之间用甘氨酸间隔,人工合成一条多抗原表位编码基因序列,将其插入原核表达载体pET30a(+),转化BL21(DE3)诱导表达。结果获得分子质量为19 ku的表达蛋白,该蛋白可与PPRV感染阳性血清发生特异性免疫反应。结果表明人工合成的PPRV多抗原表位编码基因可以在原核表达系统中表达,表达产物具有反应原性,这为研究PPRV抗原表位疫苗奠定了基础。