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以重组质粒pET-fliC和pUC57-M2e2为模板,通过重叠PCR将M2e2基因插入fliC的高变区域,构建嵌合鞭毛基因片段fliC/M2e2。将fliC/M2e2片段插入原核表达载体pET30a+,获得重组质粒pET-fliC/M2e2,将其转化鼠伤寒沙门氏菌LB5000,获得重组菌LB5000(fliC/M2e2)。应用P22噬菌体转导技术,将fliC/M2e2基因导入都柏林沙门氏菌SL5928的基因组中,经生化血清学鉴定、动力学测定、透射电镜观察、Western-blot分析,将阳性转导菌命名为SL5928(fliC/M2e2)。提取重组菌鞭毛蛋白fliC/M2e2作用HEK293-mTLR5细胞,能刺激细胞分泌IL-8。将fliC/M2e2通过皮下注射途径免疫C3H/HeJ小鼠,50μg/只。结果显示,二免后第14天,fliC/M2e2鞭毛蛋白免疫组的血清抗体效价与对照组之间呈现显著性差异(P<0.05)。ELISPOT结果表明,在脾细胞中,fliC/M2e2鞭毛蛋白免疫组检测到较高水平的IFN-γ和IL-4分泌细胞,且免疫应答以Th1型为主。结果表明,构建的fliC/M2e2嵌合基因能够在沙门氏菌中表达,重组嵌合鞭毛蛋白fliC/M2e2能激发机体针对M2e表位的体液免疫应答和Th1型细胞免疫应答。 相似文献
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弱势群体问题是近年来政府和社会所密切关注的问题之一,对弱势群体内涵外延的科学界定是展开对弱势群体问题研究和社会工作的基础。目前对弱势群体概念的界定标准有失偏颇,不能涵盖所有的弱势群体。文章认为对当代弱势群体的界定应从政治、经济、文化、社会和自身健康五个静态方面入手,同时结合其动态的发展底蕴和发展可能性子以把握。 相似文献
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《合同法》第121条中“第三人”的理解与适用 总被引:1,自引:0,他引:1
耿卓 《贵州警官职业学院学报》2009,21(3):64-67
为科学界定债务人违约的不同情形,《合同法》第121条对此作了专门规定。但其内涵有待进一步明确。对“第三人”的界定涉及到合同的相对性原理,并在实践上影响合同双方当事人的利益平衡。第三人的范围应采取较为严格的标准,这有经济、公平等方面的考虑。 相似文献
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耿相魁 《天水行政学院学报》2009,(1):3-7
本文从社会主义核心价值体系在各种价值观选择中的适用定位、在各种价值理念中的层次定位、在上层建筑(意识形态)中的作用定位、在构建社会主义和谐社会中的文化定位等方面,对社会主义核心价值体系进行了科学定位。 相似文献
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在我国刑法中 ,对司法职务犯罪人的公职没有在刑法上予以否定 ,导致我国有些犯罪人在主刑执行完毕后 ,依然可以重新走上公职的岗位。这不仅不利于我们国家的法制建设 ,也在一定程度上促进了司法的腐败。笔者建议 ,在司法职务犯罪中运用公职否定原则 ,以完善我国的刑法 ,更好地实现我国刑罚的目的。 相似文献
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鼠伤寒沙门氏菌Χ4550 FlhD基因缺失株的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
为构建鼠伤寒沙门氏菌Χ4550FlhD基因缺失所致的鞭毛缺失株,采用PCR技术从减毒鼠伤寒沙门氏菌Χ4550基因组DNA中扩增出了鞭毛控制操纵子基因(FlhD)两侧翼基因片段,作为FlhD基因敲除所需的上臂和下臂的同源序列;以pKD4质粒为模板,扩增了卡那霉素(Km)抗性基因,并分别克隆入pMD18-T载体中,获得了重组质粒pMD-FlhD-U、pMD-FlhD-D和pMD-Km。将获得的上臂和下臂基因以及卡那霉素抗性基因通过拼接,构建重组质粒pMD-ΔFlhD/Km。将重组片段ΔFlhD/Km亚克隆入pG-MB151自杀质粒,并转化大肠杆菌χ7213,获得重组菌χ7213(pGMB151-ΔFlhD/Km)。将此细菌作为供体菌,与受体菌鼠伤寒沙门氏菌Χ4550进行固相杂交,经同源重组和抗生素筛选,获得鼠伤寒沙门氏菌Χ4550(ΔFlhD/Km)鞭毛缺失株。通过PCR扩增、动力学鉴定及电镜观察,显示鼠伤寒沙门氏菌Χ4550的FlhD基因已被成功敲除。证实,运用同源重组的方法可成功地敲除鼠伤寒沙门氏菌Χ4550的FlhD基因,并导致其鞭毛缺失,为鼠伤寒沙门氏菌鞭毛的功能研究奠定基础。 相似文献
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对通过临床特征与PCR确诊为断奶仔猪多系统衰竭综合征的8例自然病例进行剖检取材,常规石蜡切片与超薄切片,HE染色及醋酸铀一柠檬酸铅染色,观察了淋巴结与脾的病理学变化.肉眼观察可见淋巴结肿大,特别是腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结与肺门淋巴结明显肿大;脾萎缩或中度肿大.组织学观察显示,淋巴结与脾淋巴细胞坏死,数量明显减少,网状内皮细胞增生与巨噬细胞浸润,在一些网状内皮细胞与巨噬细胞的胞浆内见嗜碱性包涵体.超微结构观察显示,淋巴结与脾淋巴细胞线粒体肿胀,内质网扩张,核浓缩,边集,甚至形成凋亡小体;在巨噬细胞与网状内皮细胞核和胞浆内均可见包涵体,包涵体为大小不等,圆形、椭圆形或不规则形的均质或颗粒状2种类型,胞浆包涵体常见于肿胀的线粒体与扩张的内质网附近.表明断奶仔猪患多系统衰竭综合征可致淋巴结与脾淋巴细胞坏死、凋亡,淋巴细胞数量减少. 相似文献
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对“中文期刊网”上1994~2005年间发表的关于“社会性别”研究的346篇文献的量化分析表明;研究文献的数量从高速增长到平稳发展,研究日趋理性;研究的诉求从理论引介到本土化和主流化;研究涉及多学科和领域,反映了社会性别的“概念工具”价值,其中教育和社会领域的研究较多等。社会性别研究中还存在不能真正采用跨学科研究、我国关于性别和教育的研究理论和实践成果都很有限等问题。 相似文献
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分析了传统文化、社会意识、监管体系中存在的食品安全相关问题,提出了相应的解决办法。丰富传统文化内涵有利于食品安全;通过"金字塔"式的食品监测与管理网络,运用行政、非行政手段,发挥宏观监管功能,加大软件和硬件投入,有助于提供食品安全环境。 相似文献
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苏州于2004年推出"一中心多站"社区养老服务体系至今,为应对老龄化的挑战作出很大的贡献.当前,"一中心多站"社区养老服务体系运行状况到底如何?存在哪些问题?如何解决?我们在实地调研的基础上,对有关问题加以分析. 相似文献