猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建

采用PCR方法克隆了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,将构建的重组质粒pMD-ORF2作为PCV2实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标准阳性模板,并对该模板进行了酶切及测序鉴定。结果显示,此模板特异性强,稳定性好,-20℃保存20 d无显著变化;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的pMD-ORF2标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104,其变异系数分别为2.527%、2.067%和2.092%。表明,以此模板进行FQ-PCR具有良好的准确性和重现性。该模板的检测线性范围宽,当稀释度为1.0×109~1.0×105拷贝/μL时,相关系数r=-0.989。     

略论从整体上推进党的执政能力建设

党的整体、各级党组织、党的领导干部、党员队伍是党的执政能力建设四个不同层次的主体。党的整体的执政能力是党的执政能力建设的根本;党的各级组织是党的执政能力建设的重点环节;提高干部队伍素质是加强党的执政能力建设的关键;加强党员队伍建设是提高党的执政能力的基础。     

构建服务型政府：内涵及动力阻力分析

服务型政府的内涵即民主政府、有限政府、法治政府、责任政府、绩效政府和透明政府。构建服务型政府的外在推动力是全球重塑政府的浪潮;内在源动力是中国社会主义市场经济体制的建立和完善;直接推动力是改革与服务型政府相悖的现状。其阻力在于:理论上的分歧构成理论指导的阻力;社会宣传不够,群众基础不厚,容易形成群体性的阻力;传统观念和体制形成的政府效能低下是体制上的阻力;政府存在的信用危机和部分工作人员的抵触情绪形成的内在阻力。     

浅谈模拟审讯

模拟审讯的准备工作应从以下两个方面着手实施。人力方面 ,应该从犯罪嫌疑人、审讯员、记录员、指导员这四个方面进行准备 ;物力方面 ,应从场所、械具、设备三个方面着手进行。     

情感、情商与创造实践

从情感与创造实践的关系来看,情感上的满足是人们创造实践的最终目的之一,保证情感在创造实践中的积极作用至关重要,情感障碍和创造实践相伴相生。当然,不能否认,消极情感对创造性实践活动的破坏作用。从情商在创造性实践中的作用看,情商是人们创造性实践的基本要素,情商可以最大限度地激发人的进取精神;除此之外,较低的情商对人们的创造实践具有不可避免的消极作用。     

论网络空间的刑事案件管辖权

网络的发展给现代社会带来极大的便利,也带来了前所未有的冲击。网络空间造就了网络犯罪不同于传统犯罪的特点,以致于面对网络犯罪,传统的管辖原则显得束手无策。为解决这一难题,各国立法和司法界提出了相关的对策和方案,但由于都存在着不同程度的缺陷,皆未能解决其中的实质性问题。因此,有必要讨论在传统管辖理论的基础上,结合各国的先进经验,制定一部有关网络犯罪案件管辖的国际公约的可能性。     

对现行公安体制的几点思考

近年来,公安体制在改革中呈现出明显的变化,但由于人和物的种种条件限制,公安体制还存在许多不合理的现象。从基层的角度对现行公安体制提出质疑,有助于公安体制的进一步深化改革。     

抢抓机遇，挺进俄罗斯建筑市场

随着俄经济出现恢复性增长,建筑业也得到了较快发展。目前,俄建筑市场属于成长初期的市场,发展的空间大,机遇多。俄联邦对住房建设较为重视,建筑材料进口需求格外旺盛,建筑领域积极引进外资,建筑承包工程市场实行对外开放政策。我国建筑企业进军俄罗斯建筑市场,机遇和挑战并存,我们一定要进一步解放思想,采取正确对策,善于抓住机遇,勇于应对挑战,才能在中俄建筑业的合作中争取一个双赢的结果。     

江泽民关于人的全面发展思想的重大意义

在新的历史时期 ,江泽民同志创造性地阐述了马克思主义关于人的全面发展的理论 ,提出了“每个人自由而全面发展”的学说。这就进一步明确了社会主义建设的价值目标 ,有利于实现社会发展与人的发展的和谐有机统一 ,有利于总结国际共产主义运动的经验教训 ,有利于实践“三个代表”重要思想。     

两株不同来源的猪圆环病毒1型ORF2基因的克隆与序列分析

根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计了1对引物,应用PCR方法从PK-15细胞和疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的仔猪组织病料中分别扩增出了PCV1 ORF2全基因(702bp)。将此基因片段克隆入pMD 18-T载体,筛选获得了重组质粒pMD-PCV1-ORF2,并对其进行了测序与分析。结果表明:所克隆的PK-15来源和组织病料来源的ORF2基因的同源性为99.4%,二者与GenBank中登录的PCV1 ORF2基因的同源性为97.3%~99.9%,与PCV2 ORF2基因的同源性为67.9%~68.4%,二者编码的蛋白在几个功能区比较保守。抗原表位预测表明,PCV1 ORF2编码的蛋白具有良好的免疫原性。