9个犬STR基因座在犬类鉴定中的应用

目的建立犬的复合扩增体系对犬进行个体识别和亲权鉴定。方法用建立的犬复合扩增体系进行PCR反应,用ABI310型遗传分析仪对扩增产物进行检测。结果鉴定结果表明,9个犬STR基因座复合扩增体系,各个基因座扩增平衡,结果稳定。结论9个犬STR基因座复合扩增体系可以进行犬的个体识别和亲权鉴定。     

鼠伤寒沙门氏菌Χ4550 FlhD基因缺失株的构建

为构建鼠伤寒沙门氏菌Χ4550FlhD基因缺失所致的鞭毛缺失株,采用PCR技术从减毒鼠伤寒沙门氏菌Χ4550基因组DNA中扩增出了鞭毛控制操纵子基因(FlhD)两侧翼基因片段,作为FlhD基因敲除所需的上臂和下臂的同源序列;以pKD4质粒为模板,扩增了卡那霉素(Km)抗性基因,并分别克隆入pMD18-T载体中,获得了重组质粒pMD-FlhD-U、pMD-FlhD-D和pMD-Km。将获得的上臂和下臂基因以及卡那霉素抗性基因通过拼接,构建重组质粒pMD-ΔFlhD/Km。将重组片段ΔFlhD/Km亚克隆入pG-MB151自杀质粒,并转化大肠杆菌χ7213,获得重组菌χ7213(pGMB151-ΔFlhD/Km)。将此细菌作为供体菌,与受体菌鼠伤寒沙门氏菌Χ4550进行固相杂交,经同源重组和抗生素筛选,获得鼠伤寒沙门氏菌Χ4550(ΔFlhD/Km)鞭毛缺失株。通过PCR扩增、动力学鉴定及电镜观察,显示鼠伤寒沙门氏菌Χ4550的FlhD基因已被成功敲除。证实,运用同源重组的方法可成功地敲除鼠伤寒沙门氏菌Χ4550的FlhD基因,并导致其鞭毛缺失,为鼠伤寒沙门氏菌鞭毛的功能研究奠定基础。     

猕猴肠侵袭型大肠杆菌的分离鉴定及其毒力因子基因的检测

2010年5月从四川省某猕猴养殖场急性腹泻猕猴肠道内分离出4株致病性大肠杆菌,并对其进行了16SrDNA扩增、生化反应、血清型鉴定、药敏试验以及毒力因子基因的分子生物学检测。结果显示,该菌株血清型为O28;药敏试验证实该菌对多种抗生素具有抗性,并且呈现多重耐药性;攻毒试验证实该菌能够导致小白鼠大量死亡;多重PCR成功检测出侵袭性大肠杆菌的Einv毒力基因。确定该病原菌为肠侵袭型大肠杆菌,而且毒力很强。     

牛型布鲁氏菌铁离子转运蛋白基因的克隆及其表达蛋白的生物学特性

将通过PCR技术扩增的牛型布鲁氏菌铁离子转运蛋白(Brucellaferric uptake,BfuA)基因克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-BfuA,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下表达出大小约为100ku的融合蛋白His-BfuA。Western-blot分析表明,His-BfuA能与布鲁氏菌阳性牛血清发生特异性反应,表明BfuA具有免疫原性。用His-BfuA作为包被抗原,对35份布鲁氏菌阳性牛血清进行ELISA检测,结果所有被检血清均为阳性反应,表明BfuA为潜在的可用于牛型布鲁氏菌诊断的靶蛋白。此外,对BfuA的亚定位结果表明,BfuA为膜蛋白;对His-BfuA的纤连蛋白结合活性及纤连蛋白溶酶原结合活性的试验结果表明,His-BfuA不具有上述2种活性。上述结果为牛型布鲁氏菌病诊断方法的建立及亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

猪瘟病毒感染的小型猪体内病毒的复制情况及淋巴细胞变化

用106 TCID50CSFV石门株感染巴马小型猪,通过监测被感染猪的临床体温、观察其病理变化、检测猪瘟病毒在体内的复制情况、检查猪瘟病毒感染后对外周血淋巴细胞增殖的影响,并分析外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的动态变化,以确定巴马小型猪对CSFV的敏感性。结果,攻毒后第3天被感染的巴马小型猪出现病毒血症,并在第7天就已达到1×106 copies/μL以上;腹股沟淋巴结中病毒含量最高,颌下淋巴结次之。淋巴细胞增殖试验表明,用固定剂量的刀豆素刺激,被感染的巴马小型猪外周血淋巴细胞增殖出现不同程度降低;其外周血中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的比例降低。结果表明,巴马小型猪可以作为CSFV的感染模型。     

关于弘扬海洋文明 打造现代海洋文化名城的思考——琅琊台历史文化空间发掘与琅琊文化大遗址公园建设

随着山东半岛蓝色经济发展规划的实施,青岛市现代文化的建设已是势在必行,而打造琅琊文化是青岛海洋文化建设的重要组成部分。该文以琅琊文化为背景,阐述了琅琊台及周边区域的开发现状,分析了当前琅琊台地区文化开发存在的问题,并提出了相应的解决对策。     

法学研究方法论与刑事诉讼的现代化——以法律经济学研究方法论为例的检视

刑事诉讼的现代化必须立基于刑事诉讼法学研究的科学化,而刑事诉讼研究者确立科学的法学研究方法论则是后者的基石。法学研究方法论是关于法学研究方法和思路的总体性抽象说明,它的重点在于解释说明研究过程中研究者的哲学观念和基础认知,更多的反映了研究者预设的主观价值判断和基本的学术立场。需要在区分法学研究方法论与法学研究方法、法律(学)方法论三个概念的基础上,认知法学研究方法论的特殊价值。刑事诉讼法学的研究应以法律经济学研究方法论为借鉴,从研究的逻辑起点、研究的认识论基础和研究的学术认知立场三个层面入手,培塑本学科的法学研究方法论。     

成趟足迹提取方法导致误差的探讨

目的研究提取成趟足迹的低误差方法。方法比较相同条件下一次性拍照、分段连续拍照和扫描仪提取所产生的误差的大小。结果扫描仪提取法的误差最小。结论扫描仪提取足迹的方法易于掌握,适合基层技术员推广使用。     

贪污案件中会计造假的原因、表现形式及对策

在司法会计检验鉴定中,我们发现一些犯罪嫌疑人为了谋取私利,采用各种欺诈手段,用尽各种伎俩,在会计帐务中采取弄虚作假、伪造、变造会计事项等形式,以达到侵吞目的。为此笔者从办理的贪污案件中涉及财务会计造假所产生的原因、表现形式等方面谈了一些看法,并提出具体对策以杜绝财务会计造假的发生。     

探析利用文件犯罪的特点表现形式及对策

随着科学技术的发展,犯罪嫌疑人利用文件犯罪作案手段越来越高明,呈现科学化、智能化趋势,为办理此类案件带来一定困难,为此笔者根据该类犯罪的特点、表现形式提出健全单位内控制度,加强货币资金的管理;加强会计职业道德教育,提高鉴别能力;加强规范印章篆刻、使用、管理措施;参与办案,增强侦查意识和加强调研,探索新方法等措施加以预防,减少利用文件犯罪案件的发生。