GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建及原核表达

为构建具有示踪特性的新城疫病毒(NDV)HN基因乳酸菌穿梭表达载体,采用PCR方法扩增NDV HN基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因,将两基因克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,转化入表达宿主菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导表达。用荧光显微镜检查重组菌的绿色荧光效应,采用SDS-PAGE和Western-blotting检测其在大肠杆菌中的表达情况。结果显示,NDV HN和GFP基因与表达载体pW425et正确重组。荧光显微镜下可见阳性重组菌落的绿色荧光,且该重组菌传代30代次以上,荧光效应依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63ku的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western-blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性血清所识别,具有反应原性。构建了GFP标记的重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体且能在大肠杆菌中表达。     

论我国食品安全风险交流制度的立法完善

新修订的《中华人民共和国食品安全法》删除了《修订草案》中食品安全风险交流的内容,这对我国食品安全风险防控体系的构建和完善非常不利.食品安全风险时刻存在,食品安全风险交流制度的依法独立构建势在必行.食品企业对内与员工做好相关风险交流工作,依法生产经营,避免被举报的风险;对外与以消费者为代表的社会公众、政府主管部门以及新闻媒体等做好相应的风险交流工作,保证企业良性运转.这都是食品安全风险交流制度构建的重点内容,在一定程度上也是对食品安全风险监测与评估制度的法治效用的体现,应作为后续完善食品安全立法的重要参考.     

高职民事诉讼法课程教学改革与研究

通过对我院民事诉讼法教学现状与存在问题的调研,揭示并分析教学实践中存在的教学方法陈旧、教学效果不理想等问题的原因.以高职教育的教学理念为指导,提出对该学科教学进行改革的思路,探索课堂教学目标与方法,就实践教学模式的建立和完善提出建议,以实现教学内容、方法、手段的规范化.     

“双百”方针形成的政策学解析及启示

从政策学视角看,"双百"方针是党和国家在文化领域长期坚持的一项总政策。它的形成经历了政策问题建构、政策规划和政策合法化三个过程。尽管在执行它的过程中出现过曲折,但它仍是我们党从具体国情出发,灵活运用马克思主义文化理论并以党的政策为载体成功解决了建国初期遇到的社会问题的光辉典范。从政策学视角对它进行读解,可以得到以下启示:在制定政策时,务必做到坚持马克思主义,发展马克思主义;立足中国国情,一切从实际出发;高度重视政策制定的科学性。     

行业协会限制竞争行为的反垄断法规制

行业协会是被我国<反垄断法>规制的主体之一,由于其自身性质和特点,在实践中既可以雏护和规范竞争秩序,也可能成为限制竞争的工具.行业协会的限制竞争行为与一般的经营者相比,还存在隐蔽性强、持续时间长、危害范围广等特点,各国对行业协会的限制竞争行为一般采用了较为严格的规制措施.相比美国、德国、日本等国的反垄断立法,我国<反垄断法>在对行业协会限制竞争行为的规制上存在诸多不足,主要表现为认定标准不明确,行业协会的范围不明晰,豁免制度不完善和法律责任体系不健全等,有必要通过立法对行业协会进行明确界定,并针对存在的问题进行立法完善.     

“以人为本”语境下的“表达权”

表达权与以人为本之间的关系非常密切,以人为本的理念是表达权的基础,决定着表达权的发展,成为讨论表达权问题的语境。表达权在本质上是公民以语言或行为的方式相互沟通、交流思想的权利,其实现迫切需要法律化。表达权法律化面临着一系列的问题需要探讨,这些问题的解决成为表达权法律化的先决条件。     

略论高职院校秘书专业建设的几个常规问题

高职院校秘书专业建设主要包括专业名称、职业背景、培养目标、课程体系、培养模式和建设规划等一些常规问题。应该从＂正名＂的意义上进行专业命名,从社会期待和业务工作需求的角度确定能力培养的范畴,其培养目标应该以就业为导向并且有不同层面,其课程体系应该与职业能力和职业资格相对应,用独特的课程模式和实训模式来体现培养模式,并重视师资培育和硬件设施的配置。     

关于商法通则中商行为建构的思考

商行为是商法理论的核心问题之一,它是与民事法律行为相联系又相区别的概念。商行为所体现的营利性特征是其独立性的根源,也是商法独立于民法成为民法的特别法的基础。本文从商行为的内涵切入,分析商行为的营利性本质,体现其独立性,并阐述商行为对我国商法理论体系构建之价值和意义。     

浅谈变形及残损弹头上痕迹的分析和利用

进膛痕迹、线膛痕迹、坡膛痕迹、拔弹痕迹是弹头经枪械运动循环后,在弹头上形成的四种主要的弹头痕迹。此四种痕迹,可客观地反映出枪械内部主要元件的主要特征及其上的凸凹抗丘的细节特征。此四种痕迹成为弹痕检验中区分发射枪种、认定发射枪支的客观依据和事实基础。但是由于实际发射情况的千变万化,弹着客体材质的千差万别,在实际工作中从现场提取的弹头往往是变形的,甚至是残损的。因此,射击弹头的损伤变形程度受弹头本身结构材料、客体性质、不同的贯穿方式等诸多因素的影响。