卡介菌多糖核酸对泌乳奶牛外周血PMN吞噬功能及活性氧释放的影响

为探讨卡介菌多糖核酸(polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin,BCG-PSN)对泌乳奶牛外周血嗜中性粒细胞(neutrophil,PMN)吞噬功能及活性氧(reactive oxygen species,ROS)释放的影响,选取处于泌乳初期的健康奶牛,无菌采集颈静脉血,肝素抗凝。不同浓度的BCG-PSN(终浓度分别为0、2、5、10、40、80μg/mL)与全血共孵育2h,加入FITC标记的大肠杆菌悬液10μL,37℃20min后,放入冰水中终止吞噬反应;溶血素裂解红细胞,0.01mol/L、pH 7.2PBS洗涤2次,重悬后FL1通道检测PMN对大肠杆菌的吞噬率。不同浓度的BCG-PSN(终浓度分别为0、2、5、10、40、80μg/mL)与全血共孵育2h后,加入乙酸肉豆蔻佛波酯(phorbol myrisate acetate,PMA)刺激PMN,其中PMA刺激的终浓度为100ng/mL,同时每个浓度梯度设无PMA(等量PBS代替PMA)刺激对照;37℃作用15min后加入双氢罗丹明123(dihydrorhodam...     

论我国渤海地区的环境状况及其环境立法的设想与完善

近10年来,我国渤海地区的环境污染问题正不断引起各方面的高度重视,海区及其周边区域的生态环境正面临着越来越大的压力。其形成原因是多方面的。环境问题增大了环渤海地区经济发展的成本,不利于本地区经济的可持续发展,对本地区吸引投资不利。但其环境立法具有社会经济、政策、法制等诸多可行和有利因素。目前可以提倡制定一部单独的《环渤海区域环境保护特别法》,对渤海海域的环境污染和生态破坏作出综合治理的规定。     

柔嫩艾美耳球虫DF-1细胞培养体系的建立及应用

为了建立柔嫩艾美耳球虫的鸡胚成纤维传代细胞(DF-1)培养体系,并应用于柔嫩艾美耳球虫子孢子的细胞入侵活力检测,将CFDA-SE标记的子孢子接入DF-1细胞,利用流式细胞仪测定子孢子的细胞入侵活力。比较了37℃和41℃培养温度下,子孢子对DF-1、MDBK、Vero、BHK、MDCK五种细胞的入侵活力。优化了在子孢子入侵活力检测时,DF-1细胞最佳培养条件。结果表明,柔嫩艾美耳球虫子孢子在DF-1细胞中可发育为第一代裂殖子。在不同培养温度下,子孢子对DF-1细胞的入侵活力均高于其他细胞。优化后的DF-1细胞培养体系的培养程序为:用含100mL/L胎牛血清的DMEM稀释DF-1细胞,以每孔1×105个细胞铺被24孔板,37℃、50mL/L CO2培养24h后,用含50mL/L胎牛血清的DMEM换液后,每孔接入3×105个子孢子,41℃、50mL/L CO2培养8～12h,收集细胞进行检测。     

益气养阴方抗血管生成作用及对肿瘤细胞VEGF及MMP2表达的影响

目的观察益气养阴方抗血管生成作用及对肿瘤细胞血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2表达的效应。方法制备接种肿瘤细胞的绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)模型,采用血清药理学方法制备益气养阴方含药血清。观察含药血清对肿瘤细胞诱导CAM血管生成的影响,并与9.0 g/L氯化钠注射液(normal saline,NS)血清组对照。另外,用U14子宫颈癌细胞悬液经肌肉接种小鼠,观察小鼠实体瘤质量、抑瘤率、肺部转移率、肺部转移瘤生长情况。应用免疫组织化学及其组织形态学定量分析方法对VEGF和MMP2在肿瘤细胞中的表达进行研究。结果益气养阴方含药血清可抑制肿瘤细胞诱导CAM血管生成,与NS组比较差异具有显著性。益气养阴方组肺部转移结节较模型组明显减少,VEGF和MMP2的表达均明显低于对照组,差异有显著性。结论益气养阴方对肿瘤血管形成有明显抑制作用,降低VEGF和MMP2的表达可能是其抑制肿瘤血管形成的主要机制之一。