猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因的保守序列,设计合成了1对特异引物和1条探针,以PCV2全基因阳性质粒作为标准品,经反应条件优化,建立了一种检测PCV2的荧光定量PCR方法。对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果显示,该方法可特异地检测PCV2,而与PCV1等猪病病毒不发生交叉反应;该方法的灵敏度可达1×102copies/μL,比常规PCR高100倍;3次重复检测的变异系数均小于5%。用建立的荧光定量PCR和常规PCR分别对94份临床样品进行检测,荧光定量PCR的阳性检出率为51.06%,而常规PCR的阳性检出率仅为38.30%。证实,建立的方法具有快速、特异、灵敏、重复性好、定量、安全等优点,可用于PCV2的临床检测。     

猪链球菌2型MRP-FBP串联表达蛋白对小鼠的免疫保护力

针对猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBP)抗原性较强的基因片段,分别设计了1对引物,用PCR扩增出了mrp基因和fbp基因的片段.利用这些片段分别构建了原核表达载体pET32a-mrp、pET32a-fbp和pET32a-mrp-fbp.将这些表达载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行了表达.SDS-PAGE分析表明,表达的MRP、FBP、MRP-FBP的分子质量分别为47、52、80 ku.Western-blot分析表明,重组蛋白MRP-FBP可被SS2阳性血清所识别.免疫保护试验表明,串联表达的融合蛋白MRP-FBP对BALB/c小鼠的保护率达80%,是目前筛选到的制备SS2亚单位疫苗保护力最高的短片段串联免疫原.     

检察机关民事起诉权的批评与展开——以公益诉讼为视角

无论是理论界还是实务部门,有关公益诉讼的探讨都方兴未艾,检察机关相较于其他国家机关代表国家维护公共利益提起民事诉讼无疑是一种最佳选择。但检察机关的民事起诉权应是其诉权的反映,而非渊源于检察机关的民事法律监督权,二者是有明显区别的。在当下一个权利多元的社会中,检察机关代表国家提起民事诉讼仅是维护公共利益的方式之一,因而如何准确的表述公共利益和确定检察机关的民事起诉范围便成为考量检察机关民事起诉权边界的重要参数。     

论受贿罪中"为他人谋取利益"要件之取消

当前刑法中“为他人谋取利益”作为受贿罪构成要件的规定,不仅难以适应新形式下出现的各种新情况,反而极大地削弱了对贿赂犯罪的打击力度。本文从司法实践的角度出发,结合刑法理论,运用实证分析的方法,全面分析论证应从现行刑法第385条的规定中取消“为他人谋取利益”这一要件。     

己烯雌酚单克隆抗体细胞株的筛选及间接ELISA法的建立

以自行合成的己烯雌酚 (DES)免疫原免疫BALB/c小鼠 ,采用细胞融合、显微克隆等单克隆抗体技术 ,制备了 5株抗DES单克隆抗体分泌杂交瘤细胞株 (7B6、4B10、1G10、4E4、2C7) ;选择其中的 7B6株抗体 ,建立了间接竞争ELISA法 (indirectcompetitiveinhibitionELISA) ,通过初步优化 ,其检测限为 10 pg/孔 ,与同类二苯乙烯类雌激素的交叉反应高 ,而与天然雌激素雌二醇几乎无交叉反应性。这项研究为DES残留检测试剂盒的开发打下了基础。     

猪附红细胞体实时荧光定量PCR检测方法的建立

参照猪附红细胞体16 S rRNA基因序列设计了1对引物,分别以标准株和分离株的基因组DNA为模板,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测猪附红细胞体,确定特异性产物的Tm值,同时做普通PCR。试验结果表明,特异性产物的Tm值为88.5℃,最低能检测到含0.036 fg/μL阳性质粒的标准品。以阳性质粒标准品10倍倍比稀释的模板进行实时荧光定量PCR,通过对反应体系和反应条件进行筛选和优化,建立了检测猪附红细胞体的标准曲线。建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法显示了较好的特异性、敏感性和广谱性,为猪附红细胞体病的临床检测和流行情况调查提供了新的技术手段。     

中国经济转轨渐进式制度改革成功的策略

转型经济研究已经成为当前经济学理论发展最重要的前沿领域之一。对于经济体制转型的两种不同方式,特别是中国的改革做出理论上严谨规范的科学解释,无疑是经济学理论中最具突破性的研究课题之一。中国经济转轨道路可以概括为政治稳定条件下的渐进式改革,推动其成功的策略包括改革方式的合法性、改革安排的时序性、改革权限的主导性、改革利益的调控性四个方面。中国在前三个方面都采取了正确的策略并且已经取得成功,但是第四个方面的风险正在积聚和加大。     

公安边防机关利用情报预防和处置群体性事件的策略

由于群体性事件的突发性和难以预知性,情报工作越来越凸显其重要性。只有健全和完善情报收集制度、情报分析和研判制度、情报报送制度、情报评估和奖励制度,才能及时了解边防辖区群体性事件的动态,做好预防和处置工作。     

基层公安机关"人本管理"情况的调查与心133考

基层公安机关实践科学发展观,创造性地开展了公安队伍"人本管理"工作,在取得一定成效的同时,也存在诸多问题.针对该问题,各级公安机关应提升"人本管理"理念,从健全公安民警政治和经济待遇保障机制、建立基层民警执法权益保障机制、建立健全基层公安机关内部"人本管理"的长效机制入手.     

破除金融危机下大学生就业困境的对策探究

当前国际金融危机蔓延,使我国的就业形势更为严峻。在新的形势下,要破解高校大学生就业难的问题,高校必须以科学发展观为指导,强化高校培养人才的相关职能,积极引导学生,拓宽就业渠道,提高学生的就业能力。毕业生本人也应该积极面对就业形势,增强自信心,职业生涯规划,充分利用国家和高校的信息资源和政策,为成功就业打好坚实基础。