犬细小病毒兰州分离株VP2基因的克隆及进化树分析

本研究首次对地处西北地区的兰州的犬细小病毒分离株(命名为CPV/LZ-kbz11)进行了VP2基因克隆、测序,并与参考株、我国各地区流行株以及周边国家流行株进行了进化树分析和核苷酸同源性比较。结果显示,该毒株能在犬肾细胞系(MDCK)上成功生长,但不引起细胞病变。该分离株为CPV-2b亚型毒株,与M19296(CPV-2亚型参考毒株)、EU659118(CPV-2a亚型参考毒株)、EU145954(CPV-2b亚型参考毒株)、AB054224(CPV-2c亚型参考毒株)的核苷酸序列同源性分别为99.0%、99.3%、99.2%、99.2%;与我国及周边主要流行毒株EU213079(CPV-2a,浙江)、EF666059(CPV-2a,北京)、EF599096(CPV-2a,韩国)、EF592511(CPV-2a,台湾)、EU483512(CPV-2b,浙江)、FJ222821(CPV-2c,意大利)的核苷酸同源性分别为99.6%、99.5%、99.4%、99.4%、99.4%、99.4%。对VP2基因中非同义置换的氨基酸分析结果显示,兰州分离株与对比毒株的非同义突变位点共有4处,分别在第267位、324位、426位和440位的氨基酸处。     

口蹄疫病毒非结构蛋白对豚鼠CD8~+T细胞应答的免疫增强作用

为了整体评价口蹄疫病毒非结构蛋白和前导蛋白对免疫应答的影响,选用反向遗传操作技术构建的与野生型毒株(Mya98/BY/2010)P1基因相同而非结构蛋白和前导蛋白不同的重组病毒(分别被命名为Re-Mya98/BY/2010)和Mya98/BY/2010)作为抗原,经BEI灭活后与4种佐剂乳化,制备不同的疫苗作为免疫原。然后免疫豚鼠,利用流式细胞仪检测免疫豚鼠CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群的含量,ELISA方法检测免疫豚鼠血清中抗体应答。免疫后第28天进行攻毒试验。结果,抗原剂量相同的条件下,重组Re-Mya98/BY/2010疫苗比Mya98/BY/2010疫苗更能有效诱导CD8+亚群,每个时间点都含有较高的含量。ELISA结果显示,Mya98/BY/2010和Re-Mya98/BY/2010抗原都能诱导抗体应答,早期Re-Mya98/BY/2010诱导更高的抗体应答。豚鼠攻毒后,免疫Re-Mya98/BY/2010疫苗的保护率分别达到100%、83.33%、100%和50%,而免疫Mya98/BY/2010疫苗的保护率仅为20%、0、17%和25%,两者具有明显的统计学差异。结果表明,口蹄疫非结构蛋白在诱导免疫应答方面具有显著的诱导CD8+T淋巴细胞应答和提高免疫保护率的作用。     

吉林省物流业与制造业联动发展的潜力分析

现代物流业因其与大多数产业、部门具有很强的关联性,对相关产业的发展以及经济增长具有显著的带动效应;制造业则是国民经济的支柱,两者联动发展已成为促进区域经济增长、产业结构优化升级的重要举措之一。通过灰色关联度分析表明,吉林省制物流业与制造业的关联度不高,二业联动处于不甚协调状态。因此,需要通过健全规划、完善机制、搭建信息平台来大力推进制造业与物流业的联动发展。     

口蹄疫病毒Mya98谱系猪源及牛源2010年分离株的分子特征及蚀斑显型比较分析

为了明确口蹄疫病毒(FMDV)Mya98谱系猪源及牛源2010年分离株的分子特征及蚀斑显型差异,对采自不同宿主的4株FMDV进行了分子特征分析和蚀斑形态的比较。结果显示,来自不同宿主动物的分子特征差异主要表现为猪源毒株O/CHN/Mya98/2010S2与2个牛源毒株之间具有21个特异性的氨基酸置换位点,分散在ORF范围内。猪源毒株O/CHN/Mya98/2010S1具有与牛源毒株大量相似的氨基酸位点,并且与2株牛源毒株一样,都显示为小斑的蚀斑显型,而猪源毒株O/CHN/Mya98/2010S2在蚀斑试验中显示为大小斑混合存在。结果表明,猪源毒株O/CHN/Mya98/2010S2的变异位点对病毒蚀斑显型的改变具有重要意义。     

内含肽和麦芽糖结合蛋白介导具有抗病毒活性牛α干扰素的表达

为了在大肠杆菌表达系统中高效表达具有抗病毒活性的重组牛α干扰素(BoIFN-α)蛋白,在BoIFN-α基因的上游无缝连接内含肽Ssp DnaB intein(SDI)序列,然后克隆至pMAL-c2X载体中,构建含有内含肽和麦芽糖结合蛋白基因的表达载体pMAL-SDI-BoIFN-α,将重组载体转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达。结果表明,融合基因获得高效表达,且产物主要以可溶形式存在。经直链淀粉树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经MDBK-BVDV(牛病毒性腹泻病毒)干扰素活性系统检测,证实干扰素融合蛋白具有抗病毒活性。     

牛型布鲁氏菌铁离子转运蛋白基因的克隆及其表达蛋白的生物学特性

将通过PCR技术扩增的牛型布鲁氏菌铁离子转运蛋白(Brucellaferric uptake,BfuA)基因克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-BfuA,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下表达出大小约为100ku的融合蛋白His-BfuA。Western-blot分析表明,His-BfuA能与布鲁氏菌阳性牛血清发生特异性反应,表明BfuA具有免疫原性。用His-BfuA作为包被抗原,对35份布鲁氏菌阳性牛血清进行ELISA检测,结果所有被检血清均为阳性反应,表明BfuA为潜在的可用于牛型布鲁氏菌诊断的靶蛋白。此外,对BfuA的亚定位结果表明,BfuA为膜蛋白;对His-BfuA的纤连蛋白结合活性及纤连蛋白溶酶原结合活性的试验结果表明,His-BfuA不具有上述2种活性。上述结果为牛型布鲁氏菌病诊断方法的建立及亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

The Understanding and Interpretation of the ICCPR in the Context of China's Possible Ratification

Chna signed the International Covenant on Civil and PoliticalRights in 1998 and is preparing for its ratification. In consideringthe ratification, the knowledge of how to correctly interpretand understand the Covenant is crucial. In monitoring the implementationof the Covenant, the Human Rights Committee has used variousmechanisms and rules in interpreting the Covenant to meet thespecific object and purpose of the Covenant, and thus developeda rich jurisprudence with respect to the interpretations ofthe Covenant. However, the interpretations of the Covenant bythe Committee have not been adequately taken into account inthe research done by Chinese scholars on the Covenant. The researchon the interpretations therefore must be further strengthenedin order to more effectively facilitate the ratification processin China.     

三网融合对互联网信息监控的影响及应对研究

互联网信息监控是公安机关维持网上秩序的基础工作和公安情报信息的重要来源,而三网融合是信息业发展的必然趋势,是互联网的前进方向。为了积极应对三网融合对互联网信息监控工作带来的监控对象扩大、数量增多、难度提高等影响,网监部门可以从技术和管理两个层面做出应对,包括研发警用RSS软件、专门针对QQ群和社交网络的搜索系统、研究视频检索技术、多源信息整合技术及建立起自上而下的信息监控机制等方式,以达到网监工作与技术发展同步的要求。     

县委书记权力风险规避机制探析

县委书记在地方是一个位高权重岗位,但其权力风险也在不断加大,稍有不慎就会陷入腐败的泥沼。如何从根本上规避县委书记的权力风险？必须尽快建立和完善一整套权力风险规避机制,主要内容包括：合理分权,建立权力配置机制;增加＂成本＂,创新权力制约机制;发扬民主,完善干部选拔机制;有效制衡,健全权力监督机制;奖惩并用,构建激励保护机制。     

科学发展观与统一战线时代使命

进入改革开放历史新时期,统一战线工作肩负着一系列新的责任和时代使命。科学发展观为统一战线时代使命提供了新的实践导向。贯彻实践科学发展观,不辱统一战线肩负的时代使命,需要加强统一战线自身建设,更好地为建设社会主义和谐社会服务。