甲醛固定石蜡包埋组织DNA提取方法比较

目的比较甲醛固定石蜡包埋尸检组织中三种提取DNA的方法对DNA质量的影响,寻找一种操作简便、污染较少、经济实用的石蜡包埋组织中提取DNA的方法。方法选取经甲醛固定石蜡包埋的心肌组织20例,分别以二甲苯脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、试剂盒法提取DNA,进行电泳分析、紫外分光光度计测定A260/A280值及PCR扩增。结果改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法抽提DNA法、二甲苯脱蜡-酚氯仿法分别与试剂盒法所提取DNA的A260/A280值相比较,均有显著性意义（P〈0.01）。二甲苯脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法所提取DNA的A260/A280值相比较,无显著性意义（P〉0.05）。以改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法所得DNA为模板,扩增的目的条带亮度与阳性对照相当。结论结果证实改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法简便有效,所用试剂价格低廉,是一种经济实用的石蜡包埋组织DNA提取方法。     

埃博拉病毒苏丹型核蛋白的原核表达及纯化

将目的基因NP亚克隆入原核表达质粒pET-28(a)中,构建了重组表达载体pET-28(a)-S-NP,然后用重组质粒转化BL21(DE3)感受态细菌,并利用IPTG诱导蛋白表达。将表达的蛋白利用His-Band Ni+柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果显示,重组质粒经双酶切后可得到与目的片段长度相同的特异性条带;测序结果显示此特异性条带与参考序列完全匹配,没有突变。纯化后的蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,表达正确。结果表明,成功构建了重组表达质粒,且表达产物正确。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR变异株第125代的毒力试验

从临床病例中分离到1株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株HBR,经细胞传代和蚀斑克隆获得了1株增殖性能稳定的传代毒株。为了检测该毒株在Marc-145细胞传代过程中毒力的变化,用PRRSV-HBR株第125代培养物(毒价为107.5 TCID50/mL)经肌肉注射和滴鼻途径接种18头35日龄PRRSV抗体阴性猪,同时设未接种对照组。结果试验猪未出现明显的临床症状。用RT-PCR法检测试验猪血清,从第3天开始出现阳性,第7～14天达到高峰,第28天后转为阴性。对同一时间迫杀的试验猪检测各脏器组织中的病毒抗原分布情况,结果表明,感染后第7～14天试验猪多数脏器呈阳性反应,第21～42天病毒集中在脾、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结等组织。病理学观察发现,第7～14天试验猪淋巴结及肺出现轻度病变。动物感染试验表明,尽管试验猪未显示明显的临床症状,但从病毒血症、病毒体内分布、病理变化等方面看,该毒株仍然具有一定的毒力,用于弱毒疫苗的研制还有待进一步驯化致弱。     

油樟叶挥发油对三种真菌的抗菌效果

为探讨油樟叶挥发油对须毛癣菌、犬小孢子菌和石膏小孢子菌的抑制活性及其作用机理,采用RPMI 1640液体培养基倍比稀释和沙氏琼脂平板稀释培养计数法分别检测油樟叶挥发油对这3种真菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC);并绘制体外杀菌曲线,观察MIC浓度下油樟叶挥发油对3种真菌的动态杀菌过程;透射电镜下观察油樟叶挥发油在MIC浓度下对3种真菌超微结构的影响。结果显示,油樟叶挥发油对3种真菌的MIC和MFC值均为3.125μL/mL;杀菌曲线表明,作用的前12h内油樟叶挥发油对3种真菌的杀菌作用最强,随后杀菌作用降低;电镜下对照组的3种真菌形态正常,在MIC浓度下,3种真菌原有的细胞器模糊不清、溶解或消失。试验证实,油樟叶挥发油对3种真菌具有较强的杀菌作用,其杀菌机理为破坏真菌的细胞器。     

论马克思历史唯物主义的“解放”主题

马克思的学说是关于人的解放和人的全面发展的学说,这个学说既表达了人的解放旨趣,即对人的全面发展的价值理想的承诺,又表达了人的解放的历程,即对人的全面发展实现过程的探索。人的解放的价值理想是贯穿马克思全部思想的一条红线。     

尿液中铊的微波消解ICP／AES标准加入测定法

目的建立尿液的微波消解和金属毒物铊的ICP／AES标准加入分析方法。方法取1．0mL尿样于聚四氟乙烯消解管中,加入3mL浓硝酸和0．5mL双氧水,进行微波消解。冷却后,用2％的硝酸定容至10．0mL。根据标准加入法进行ICP／AES定量分析。结果回收率为101．5％,检出限为2．6ng／mL,线性范围为0．05ug／mL～2．0ug／mL。结论该方法操作简便,回收率高,检出限低,可多元素同时测定,结果可靠。     

大学生德育边际效应递减之困求解

边际效应递减是大学生德育过程中存在的一种现象。初始阶段对教育对象起作用的德育形式与内容,随着时间的推移,作用将逐渐弱化,甚至会使教育对象产生抵触心态。因此,有必要对大学生德育过程边际效应递减的成因及解决对策进行尝试分析。     

高校廉政文化建设的现状、不足及对策

加强高校廉政文化建设是高校党风廉政建设和反腐败斗争的必然要求,是建设社会主义大学的客观需要。高校需要通过健全廉政文化建设的领导体制和工作机制,制定合理而有效的规章制度,创新形式和内容,因人分岗施教,推进廉洁文化进校园,努力营造干部廉洁从政、教师廉洁从教、职工廉洁从业、学生廉洁修身的良好校园氛围,为高校的反腐倡廉建设提供文化支撑。     

革命老区农村基层民主政治建设的实践探索——遵义市农村基层民主政治建设的调查与思考

基层民主政治建设是我国政治文明建设的重要组成部分。遵义市在创建服务型党组织中,紧紧围绕基层民主政治建设的目标,将创新社会管理与基层民主政治建设有机统一起来,不断创新基层农村民主政治建设的实现形式,推动社会主义基层民主政治建设不断取得新进展。     

两岸专利侵权制度及其法律适用比较分析(之二)——以我国大陆地区为视角

随着中国以及国际形势的发展,我国大陆地区进一步完善了相关专利立法。为完成"提高自主创新能力、建设创新型国家"的目标,国务院制定了《国家知识产权战略纲要》,进一步加强对专利权的保护,激励自主创新,促进专利技术的实施与创新能力,推动专利技术向现实生产力转化,缩短转化周期。