猪热休克蛋白70基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

根据GenBank中收录的猪HSP70基因序列,设计了1对特异性引物.运用RT-PCR技术从经热应激诱导的大约克猪组织总RNA中扩增得到了HSP70基因.并将其克隆至pMD18-T Simple载体上,进行序列测定.将编码猪HSP70的基因亚克隆至pET-32a(+)上,并将重组质粒pET-32-pHSP70在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中经IPTG诱导表达.核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长2 200 bp,含1 932bp的开放阅读框,编码643个氨基酸,与已知猪HSP70核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达99.5%.SDS-PAGE电泳及Western-blot分析表明,猪HSP70在BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达.     

旋毛虫p46000抗原基因的转录及表达特性鉴定

根据旋毛虫p46000抗原基因和葡萄糖3一磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列设计特异引物,以不同发育时期旋毛虫总RNA为模板进行SYBR Green染料法实时定量RT-PCR检测p46000基因转录情况.制作不同发育时期旋毛虫虫体及感染组织石蜡切片,采用免疫荧光染色技术检测p46000抗原的表达及定位情况.结果显示,p46000抗原基因在旋毛虫不同发育时期均有转录,但转录水平有明显差异,转录高峰集中于成虫和肌幼虫期,新生幼虫期明显低于其他时期.天然p46000抗原蛋白定位于杆状体和虫体表面,表达高峰集中于成虫、肠道期及成囊期肌幼虫.表明,p46000抗原基因的转录与表达具有一定的时空特异性.该基因在旋毛虫的寄生过程中尤其在早期感染中具有重要作用且可能与旋毛虫的免疫逃避有关.     

A型禽流感病毒NS1蛋白的表达及其诱导细胞凋亡功能的研究

利用瞬时表达方法表达禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,并初步研究了体外表达的NS1蛋白对宿主细胞凋亡的影响.应用脂质体介导法,将含有不同亚型AIV NS1基因的阳性质粒pcDNA3.1(+)-qNS1(H5N1)、pcDNA3.1(+)-rNS1(H9N2)转染Vero细胞系及MDCK细胞系.经SDS-PAGE及Western-blotting检测,qNS1和rNS1基因在Vero细胞及MDCK细胞中均获得了表达.应用AO/EB荧光染色法、Annexin V-PI法分别对转染后的Vero细胞及MDCK细胞进行细胞凋亡检测,结果显示,转染阳性质粒的MDCK细胞凋亡率增高,而转染空载体pcDNA3.1(+)的MDCK细胞及转染的Vero细胞均无明显变化.表明,qNS1、rNS1蛋白在体外培养的MDCK细胞中表达并能够诱导其发生凋亡,而在Vero细胞中却不能发挥此功能.     

豆状囊尾蚴人工感染家兔抗体水平的消长

取人工感染豆状带绦虫犬自然排出的孕卵节片,虫卵计数后以不同数量感染家兔,定期采血,待囊尾蚴成熟后扑杀,计数.同时,用豆状囊尾蚴粗制抗原所建立的ELISA诊断方法,检测家兔的抗体变化情况.结果显示,家兔在感染后第3周血清抗体呈阳性,且抗体水平逐步上升,第8周达到最高水平,直至第10周扑杀时仍呈较高的阳性水平.抗体水平随感染数量的增加而升高,虫体负荷随感染强度的增加而逐步升高,感染虫体数量的多少对抗体出现的时间影响不大.研究结果为该病的流行病学调查及免疫预防奠定了基础.     

重组鸡痘病毒rFPV-VP3-F的遗传稳定性及在鸡体内的表达

为了评价重组禽痘病毒rFPV-VP3-F的遗传稳定性,将rFPV-VP3-F在鸡胚成纤维细胞(CEF)连续培养20代.对第5、10、15和20代病毒的F基因进行扩增及序列分析,未发现F基因发生氨基酸改变;通过间接免疫荧光方法检测各个代次rFPV-VP3-F中F基因特异表达的情况;将rFPV-VP3-F和禽痘病毒FPV017分别接种于35日龄商品鸡,在免疫后第7、14、21、28、35 d采集各组血清,检测中和抗体效价.结果显示,F基因在重组禽痘病毒中可以稳定遗传,可在CEF中表达相应蛋白,可刺激鸡产生相应的抗体.     

香港渔农业发展史论略

香港渔农业至少有五六千年的历史,从新石器时代晚期开始形成原始渔农业;在传统社会至英管制前期,香港渔农业都有较稳定的发展。日占时期,香港百业萧条,渔农业经济遭受重挫,陷入发展低谷。20世纪50年代之后,香港政府大力推广渔船自动化,渔业获得飞速发展并完成由传统模式向现代模式的转变;同时,农业的传统种植格局也被工业化、城市化、商业化等因素打破,逐渐从种植低值农作物向种植高值经济作物转变。至20世纪80年代,香港渔农业正式进入现代发展阶段。     

浅谈高校辅导员工作的创新

新形势下,单纯以政治思想辅导和常规管理为主的辅导员工作,已不能适应时代的要求,更不能满足学生全面发展的需要。拟从目前高校思想教育工作面临的挑战、全面做好辅导员基础性建设的意义和辅导员工作创新的路径等方面,浅谈高校辅导员工作的创新。转变高校辅导员的教育理念,改革辅导员工作方法,探索新的工作机制,推进辅导员工作的全面创新已刻不容缓。     

论后现代主义思潮对社会工作模式的双重影响

本文首先分析现代主义的社会工作从处遇原则到处遇过程所面临的困境,继而阐述了后现代主义影响下的社会工作模式的有益的发展趋势,以期促使社会工作理论与实务的发展,提升社会工作的专业地位,为社会工作的进一步发展开拓空间,同时指出这种全新的模式本身所固有的缺陷,旨在促进社会工作健康、持续、稳定的发展.     

论行政改革动力机制的创新

讨论深化行政管理体制改革所需要的动力机制创新,对于正确把握改革方向并保证其可持续性,具有重要的理论和实践意义.全文分为三个部分:第一部分对变革动力的相关理论研究成果进行简要综述和评价;第二部分立足实践,通过对发达国家当代行政改革动力的考察,佐证理论研究的主要发现;第三部分描述总结我国30年来行政改革的动力机制及其特征;最后在分析深化改革面临的动力困境的基础上,提出动力机制创新的思路.     

The Beidou Satellite Navigation System

ON April 14 when a 7.1-magnitude earthquake rocked Yushu County, Qinghai Province, telecommunication signals were completely cut off in the stricken region. Then more than 100 user terminals of the Beidou Satellite Navigation System were rushed to the site and handed to the relief workers and rescue personnel. The machine was unveiled in 2008 after an 8.0-magnitude earthquake struck Sichuan Province. At that time, the China National Satellite Navigation and Positioning Application Administration Center equipped the relief forces with over 1,000 terminals of the Beidou system,