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为了获得流感病毒M2e多拷贝重组蛋白并分析其免疫原性,通过比对GenBank中H5和H9亚型流感病毒的M2基因,选择其N端由23个氨基酸组成的胞外域(M2e)序列进行合成,并将4个M2e序列与3个位于HA246~260T/B细胞表位交叉串联,在其末端添加酵母转录因子,然后克隆到pGEX-6P-1载体中,表达重组蛋白。SDS-PAGE和蛋白免疫印迹试验分析表明,重组蛋白成功表达,而后纯化获得高纯度产物。经纯化的重组蛋白与弗氏佐剂混合后肌肉注射BALB/c小鼠,二免2周后采集小鼠血清并用ELISA检测M2e抗体水平;同时分离脾细胞并用ELISPOT检测特异性T细胞的数量。ELISA结果表明重组蛋白能诱导免疫组小鼠产生高水平的M2e特异性抗体;ELISPOT分析显示,在M2e肽段的刺激下,免疫组小鼠每1×106个脾淋巴细胞中的斑点形成数达150个。结果表明,成功表达的重组蛋白具有良好免疫原性,为广谱型流感病毒亚单位疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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采用PCR技术从重组质粒pMel-NP扩增得到了禽流感病毒(AIV)A/Goose/Guang-dong/1/96(H5N1)株的核蛋白(NP)基因,将其亚克隆至真核表达载体pVAX1上。将提取的pVAX-NP阳性克隆转染Hela细胞,48 h后经间接免疫荧光试验和Western-blotting检测,NP基因在Hela细胞中已成功瞬时表达。表达产物的分子质量约为57 ku,它与H5N1亚型AIV多克隆抗血清有较好的免疫反应。 相似文献
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鉴于禽流感向欧洲蔓延,科学家们要求更好地对公民进行宣传教育,同时警告不要制造恐慌。在德国汉诺威召开的专业会议上,约有150名专家济济一堂,共商防御禽流感的措施。下萨克森州卫生局局长温多夫教授表示,虽然这种病毒对经济的影响大,但这是一种动物瘟疫,只在极少数情况下会传染给人类。下萨克森州消费者保护与食品安全局局长豪恩霍斯特也表示,德国已经作了充分的准备,以迅速应对禽流感的爆发。 相似文献
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在遭遇“非典”之后,随之而来的“禽流感”和“口蹄疲”再次触动了人们早已紧绷的神经,一时间可谓“谈肉色变”。由此造成的经济损失是巨大的。西方经济学者甚至还将“口蹄疲”称之为“全球性政治经济病”。正是在这样的一种国际国内环境之下,笔者接受了动物检疲员潘某的委托,作为其玩忽职守案的一审辩护人。 相似文献