高致病性PRRSV的分离及其Nsp2和ORF5基因的序列分析

从广东省不同地区疑似高致病性猪生殖与呼吸综合征病料中分离出能引起Marc-145细胞病变的病毒,经RT-PCR检测,确定分离物中存在美洲型猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),将此细胞病毒液命名为GDB1,用其感染回归5头40日龄健康仔猪,采集发病及死亡猪组织,重新用Marc-145细胞进行病毒分离,将再次分离到的病毒命名为GDB1F.对GDB1、GDB1F的Nsp2、ORF5基因序列进行测定分析.结果表明,单独感染猪2/2发病死亡,同居感染的3头猪全部发病,2头死亡;感染后2～4 d所有感染猪均出现体温升高.死亡猪表现为严重的出血性、间质性肺炎,肢体远端皮表出血.序列分析结果表明,GDB1和GDB1F株的Nsp2基因与国内高致病性PRRSV分离株JXA1、HN2 Nsp2、HNXT1、HNyz、HUB2、HUN1的同源性很高,达98.4%～99.0%.GDB1和GDB1F株的ORF5基因存在部分突变,没有缺失,与国内高病性PRRSV分离株JXA1、HUB2、JX0612、GDZC1的同源性高达97.5%～99.8%.     

猪生殖与呼吸综合征病毒多基因重组真核表达质粒的构建及诱导的小鼠体液免疫

根据猪生殖与呼吸综合征病毒已知序列设计了3对引物,采用RT-PCR方法分别扩增ORF3、ORF5和ORF6基因,并将其依次与真核表达质粒pcDNA4.0定向连接,构建了重组质粒pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5,经提纯后,给试验组小鼠后肢胫前肌注射,每只100ìg,2周后再注射1次.首免后每隔7 d采血1次,用间接ELISA检测血清抗体水平并测定其中和抗体水平.结果显示,所构建的重组质粒能够诱导小鼠产生很高的ELlSA抗体和中和抗体水平.     

为人争得一口“气”——记北京大学人民医院呼吸科副主任、残疾人医学博士韩芳

残疾人自强自立,就要融入社会。除了自己的能力外,既有机遇的成分,也有大环境的改善,但最关键的是自己要争取,要有为残疾人争口气的信心。——主人公语     

与春天一起呼吸

高原的春天就要到了，不惊诧，也不慌张。虽然暮冬拉长了身影，用更肆虐的寒风驱赶着行人的脚步．用更黯淡的阳光拉长人们的距离。心里雪亮，那是黎明前因为惯性而挣扎的黑暗，万事万物都逃不开的自然。     

春游踏青的由来

从古到今，每年待到春暖花开的时候．人们都要邀上亲朋好友，出去在青草地上走走，呼吸呼吸新鲜空气。有些学校还专门组织学生出去踏青游春。那么，春游踏青的习俗是怎么来的呢？     

微科技

正可静脉注射的救命氧气波士顿儿童医院的研究小组最近研发出一种氧气微粒,可以直接注入到血液中,为人体快速补充氧气。即使呼吸暂停,注入的氧气颗粒也能让生命维持15至30分钟,避免患者缺氧,为抢救赢得时间。而另一方面,虽然这种氧气颗粒目前只能作为短期的氧替代品,过长时间的使用会使血液过载。但随着技术的进步和完善,也许有一天我们可以不必呼吸,也能在水中畅游了。     

支提山的绿色呼吸

人与自然之间,似有种与生俱来的默契。就像我,冥冥间注定与八方山水有个绿色之约。生长在沿海平原的我,一扑入宁德支提山国家森林公园,心就发紧发疼,被恋人般地紧吸过去。5月的春阳善解人意。当我登上支提山,盈满眼帘的是一汪原始的中亚热带绿——不是通常意义上的碧绿,而是酣绿、醉绿。     

睡眠呼吸暂停综合征2例报告

睡眠呼吸暂停综合征２例报告杨浩洁（安徽大学医院合肥２３００３９）关键词睡眠呼吸暂停综合征；病例报告睡眠呼吸障碍对血波动力学、心血管功能及生活质量均有根大影响，严重者可发生猝死。笔者报告睡眠呼吸暂停综合征（ＳＡＳ）２例，并结合有关文献分析讨论如下。１病...     

铜对肉鸡肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的影响

为进一步了解铜对生物体的生物学效应,选用硫酸铜作为铜源,向即时分离的肉鸡肝细胞线粒体培养液内加入终浓度分别为5、10、20μmol/L的铜(以铜计),孵育10 min后,观察肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的变化。结果显示,铜对线粒体膜通透性转换孔有较显著的影响,造成线粒体不同程度的肿胀,表现为线粒体悬液在540 nm处的吸光值下降,且铜浓度越高,吸光值下降越明显,在孵育6 min后3种浓度的吸光值下降百分比差异显著(P<0.05)。随着铜浓度的升高,线粒体呼吸逐渐减弱,RCR、P/O、OPR均显著降低(P<0.05),这些变化可能是微量元素铜对生物机体产生毒害作用的本质原因之一。     

斑点免疫金渗滤法检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究

应用提纯的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)建立了检测PRRS抗体水平的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法通过胶体金标记SPA直接显色,阳性者出现红色斑点,整个试验过程仅需5min即可判断结果;与猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病阳性血清不发生交叉反应;纯化PRRSV抗原的最低检测量为0.0553mg mL,即55.3ng 点。对200份猪血清用该法与ELISA同时进行PRRS抗体检测,两种方法的符合率达98%。