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以“百度文库事件”为代表的一系列与“避风港”规则有关的案件充分表明,“避风港”规则在我国已经转化为“风暴眼”。立法缺陷是“避风港”规则转化为“风暴眼”直接原因,法院判决的混乱加速了由“避风港”到“风暴眼”转化的过程,“避风港”原则的反功能是“避风港”转化为“风暴眼”的导火索。 相似文献
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为筛选刚地弓形虫的毒力相关基因,以弓形虫为研究对象,构建了弓形虫强弱毒株抑制消减Cdna文库.分别收集弓形虫Ⅰ型RH株和Ⅱ型QHO株速殖子,提取总RNA,纯化后获得mRNA,并反转录为cDNA,用抑制消减杂交技术(SSH)构建弓形虫强弱毒株正向消减(弱毒株消减强毒株)及反向消减(强毒株消减弱毒株)cDNA文库.从两文库中各筛选10个阳性克隆测序及进行在线BIAST分析.结果显示,构建的弓形虫强弱毒株的消减cDNA文库具有较强的特异性;在获得的18个有效表达序列标签中,有12个与已报道的基因有较高相似性,另外6个可能代表新基因.表明,弓形虫强弱毒株差异表达消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究弓形虫毒力相关基因的功能奠定了基础. 相似文献
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鸭肠炎病毒感染鸭肝酵母双杂交cDNA文库的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
为构建应用于酵母双杂交系统的鸭肠炎病毒(DEV)感染鸭肝cDNA文库,利用Trizol法提取接种DEV GZ株病毒液5 d的鸭肝总RNA,利用cDNA合成试剂盒反转录合成双链cDNA,与pGADT7酵母表达载体连接,转化酵母受体菌Y187,以未经稀释、1∶10和1∶100比例稀释的菌液无菌接种于SD/-Leu缺陷型固体培养基,置于30℃培养3 d,随机挑取生长良好的酵母菌落进行菌落PCR,检测插入片段的大小。结果显示,获得的原始文库克隆总数为1.0×106CFU,随机选取23个克隆进行PCR检测,插入片段长度集中在0.5~1 kb之间。结果表明,构建的cDNA文库有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。 相似文献
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中国特色社会主义是实现中华民族伟大复兴的必由之路。党中央批准实施的重大文化工程《复兴文库》,精选1840年鸦片战争以来同中华民族伟大复兴相关的重要文献,集中展现了以中国共产党人为代表的中华优秀儿女探索民族复兴道路的历史足迹。从《复兴文库》回顾中国特色社会主义道路开创、坚持、发展的历程,可以得出一些重要历史启示:中国特色社会主义道路来之不易,必须倍加珍惜、始终坚持;中国特色社会主义道路是人民的选择,必须坚持以人民为中心,充分发挥亿万人民的创造伟力;中国特色社会主义道路是在马克思主义科学真理指引下走出来的,必须始终坚持以马克思主义为指导,不断推进马克思主义中国化时代化;中国特色社会主义道路是伟大实践的成果,必须坚持实践第一的观点,在实践中不断发现、创造、前进;中国特色社会主义道路是推进中国式现代化的时代选择,必须坚持道不变、志不改,让科学社会主义焕发出新的蓬勃生机。新征程上,我们要以史为鉴、察往知来,沿着中国特色社会主义道路坚定前行。 相似文献
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毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库,用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA,采用SMART技术,在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA,经LD-PCR扩增合成双链cDNA(ds cDNA).经蛋白酶K消化、Sfi I酶切,过CHROMA SPIN-400TM柱去除小于400 bp的片段,与?TriplEx2TM噬菌体载体连接,用Gigapack ⅢGoldTM载体蛋白包装,构建了cDNA噬菌体表达文库.经测定,原始文库容量为4.72×106pfu/mL,扩增后的文库容量为2.62×1010pfu/mL,重组率为97.5%,插入片段为500~1100 bp.证实,该文库质量良好,为毒害艾美球虫新基因的筛选、克隆及功能研究奠定了基础. 相似文献