非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白的原核表达及其免疫特性研究

为了制备非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type lectin重组蛋白.用纯化蛋白免疫...     

高效液相色谱法测定奈韦拉平片有关物质及其含量

目的 采用高效液相色谱仪建立奈韦拉平片中有关物质及其含量的测定方法,为其质量控制提供参考。方法 采用ODS-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-0.025 mol/L磷酸二氢铵溶液（20∶80）;流速：1.0 ml/min;检测波长：220 nm。结果 线性范围为5～100 μg/ml（r=1.000 0）检测限为0.9 ng,样品在24 h内稳定性、精密度良好,RSD=0.2%,平均回收率为100.36%。结论 所建立的高效液相色谱法简便、快速、准确、专属性高,适用于奈韦拉平片中有关物质及其含量的测定。     

复方健胰胶囊对非酒精性脂肪肝病患者血清超敏C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-18的影响

目的 观察复方健胰胶囊对非酒精性脂肪肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）患者血清相关炎性因子的影响,探讨其作用机制。方法 将60例NAFLD患者分为对照组和治疗组各30例,对照组予常规治疗,治疗组在对照组基础上加用复方健胰胶囊,疗程1个月,观察两组中医证候疗效及两组治疗前后血清超敏C-反应蛋白（high sensitive C-reactive protein, hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-18（interleukin-18, IL-18）的变化。结果 治疗组中医证候疗效显著优于对照组（P<0.01）。治疗后对照组hs-CRP、IL-18均较治疗前显著降低（P<0.01）;治疗组治疗后hs-CRP、TNF-α和IL-18均显著降低（P<0.01）,且治疗组在降低hs-CRP、TNF-α和IL-18方面显著优于对照组（P<0.01）。结论 复方健胰胶囊治疗NAFLD的作用机制可能与抗炎、调节炎性因子表达有关。     

行气调神针刺疗法对缺血性卒中后抑郁大鼠左前皮质及海马CREB和PDE4 mRNA表达的影响

目的 观察cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)和磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)在缺血性卒中后抑郁(post stroke depression,PSD)发病中的作用及行气调神针刺疗法对其的影响。方法 将SD大鼠随机分为正常组、模型组、行气调神针刺组、西药组,每组各20只。采用大脑中动脉电凝结合应激和孤养的方法复制PSD模型。针刺组取“人中”、双侧“合谷”和双侧“太冲”,针刺治疗6周,西药组予以盐酸氟西汀灌胃治疗6周。采用RT-PCR检测左前皮质及海马CREB mRNA和PDE4 mRNA的表达水平。结果 最终各组样本量为11。与正常组比较,模型组大鼠左前皮质及海马CREB mRNA表达水平显著下调(P<0.01),PDE4 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,西药组及针刺组大鼠左前皮质及海马CREB mRNA表达水平显著上调(P<0.01),PDE4 mRNA表达水平显著下调(P<0.01)。结论 行气调神针刺疗法治疗PSD的机制与上调脑组织CREB mRNA的表达和下调PDE4 mRNA的表达有关。     

密蒙花中4种成分的含量测定及其主成分、偏最小二乘判别分析

目的 建立同时测定密蒙花药材中4种成分含量的方法,并进行主成分分析（principal component analysis,PCA）和偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis,PLS-DA）。方法 采用超高效液相色谱法,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18,流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液（梯度洗脱）,流速为0.15 mL/min,检测波长为330 nm,柱温为30 ℃,进样量为2 μL。采用SIMCA 14.1统计软件对含量测定结果进行PCA和PLS-DA研究。结果 4种指标性成分的线性、分离度、稳定性、重复性与精密度良好;24批药材样品有2个主成分,PLS-DA分析确定了2个分类标志物。结论 本研究建立的方法的精密度、稳定性、重复性均较好,可用于密蒙花药材中4种成分含量的同时测定;不同产地的密蒙花药材质量差异较大。     

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白与MDBK细胞互作蛋白的筛选

为了筛选与鉴定牛病毒性腹泻病毒(BVDV) E2蛋白与MDBK细胞的互作蛋白,以牛病毒性腹泻病毒BA株为模板,通过PCR扩增E2基因,构建重组质粒pFast-E2.将其转化至DH10Bac感受态细胞,再转染sf9昆虫细胞,获得P3代重组杆状病毒,在sf9细胞中表达E2蛋白,应用Western-blot进行鉴定,通过pu...     

猪流行性腹泻病毒M蛋白对Ⅰ型干扰素产生的影响

为探索猪流行性腹泻病毒(PEDV)结构蛋白M对Ⅰ型干扰素(IFN)产生及其信号通路的影响,将PEDVM蛋白表达质粒转染HeLa细胞后用poly(I∶C)刺激,应用双荧光素酶分析系统对IFN-β-Luc、IRF3-Luc表达水平进行检测,应用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)对IFN-β、IFN刺激基因15(ISG1...     

非洲猪瘟检测技术研究现状

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种高致死率的猪传染病,早期检测诊断是疫情防控的有效手段.本文对近年来国内外非洲猪瘟的常用检测技术进行了综述,包括病毒分离、基于核酸水平的方法(主要包括实时荧光PCR、多重PCR、恒温扩增检测技术和数字PCR等)和基于蛋白水平的方法(主要包括酶联免疫吸附试验和...     

盐酸美沙酮口服液的稳定性研究

目的 对盐酸美沙酮口服液进行稳定性研究.方法 采用紫外分光光度法测定其含量,采用薄膜过滤法对其进行微生物限度检查.结果 盐酸美沙酮口服液的性状、鉴别、pH值、微生物限度均未发生明显改变,含量呈下降趋势.结论 通过加速试验表明,盐酸美沙酮口服液的物理稳定性较好,含量受温度、湿度影响较大.     

发展迅猛的新广安川渝合作的桥头堡

广安市——中国社会主义改革开放和现代化建设总设计师邓小平同志的家乡,位于四川省东部、华蓥山脉中段,紧邻重庆市,1993年7月设立地区,1998年7月撤地设市,辖广安区、岳池县、武胜县、邻水县,代管华蓥市,幅员面积6344平方公里,总人口470万。历史悠久、文化灿烂、风光秀美、物产丰富、交通便捷、资源富集的广安与重庆一衣带