应用HID Ion S5~(TM) XL System排除可疑母女关系1例

<正>1案例资料1.1简要案情本案为本实验室受理的一起为收养儿童上报户口的案例,当事人称与养女无亲缘关系,需进行亲子鉴定。经Global Filer试剂盒(Thermofisher公司)检验,养女与养父存在D8S1179等11个基因座不符合遗传规律,可排除亲权关系;而养女和养母之间仅在D8S1179和D10S1248基因座不符合遗传规律,分别相差1个和2个重复单位,参照上述基因座在浙     

洛阳地区5种嗜尸性麻蝇分子鉴定研究

目的应用经典DNA条形码和28S r RNA基因鉴定洛阳地区5种常见嗜尸性麻蝇种属,评价其在常见嗜尸性麻蝇种属鉴定中应用的可行性。方法收集洛阳地区常见嗜尸性麻蝇类标本18只,经形态学分类鉴定后,Chelex-100法提取足部DNA,扩增并测序线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(COI)和28S核糖体核糖核酸(28S r RNA)基因片段,BLAST比对后,与来自DNA条形码数据库(Barcode of Life Data,BOLD)的中国和韩国地区20条相应蝇种序列进行比对,用MEGA 7.0软件整理分析所得序列,计算碱基组成、种内及种间进化分歧率,并构建系统发育树。结果形态学鉴定18只嗜尸性麻蝇归于3属5种。每个样本获得COI和28S r RNA的扩增长度分别为646bp和721bp。在线BLAST比对结果显示样本COI序列相似度99%以上,邻近法构建发育树Bootstrap值为1 000,5种麻蝇可以较好聚类,与形态学鉴定结果一致。38个样本COI种内范围为0~0.022,棕尾别麻蝇、酱亚麻蝇和急钩(亚)麻蝇种间范围在0.057~0.090;赤尾麻蝇和红尾粪麻蝇种间范围在0~0.086。5种麻蝇的28S r RNA序列发育树显示,棕尾别麻蝇和急钩(亚)麻蝇明显各自聚类,其余3种成一类。结论对于本研究中的5种嗜尸性麻蝇,基于COI基因的DNA条形码可以有效区分棕尾别麻蝇、酱亚麻蝇和急钩(亚)麻蝇,28S r RNA基因只可以区分棕尾别麻蝇,二者可作为形态学鉴定之外的重要方法补充。     

"神化原型"品牌理论:对常规理论的颠覆?——以英国音乐品牌4AD为案例

“神话原型”品牌理论是将复杂的产品整合为统一的品牌意义,用此激发原型及其背后的神化故事,培养消费者对品牌的认同和忠诚。本文以英国独立音乐品牌4AD为例,探讨了它对常规品牌理论的颠覆,并以“神化原型”理论中的探险家原型作为该品牌的定位,从品牌个性塑造、品牌管理、品牌打造中遇到的问题等方面分别阐述了“神话原型”理论的应用和效果。     

重组蛋白P60与LLO对单核细胞增多性李斯特菌灭活疫苗的免疫增强效果

为增强单核细胞增多性李斯特菌(简称单增李斯特菌)灭活疫苗的免疫效果,对单增李斯特菌入侵相关蛋白(P60)基因进行了克隆、表达及纯化,分别与低剂量李斯特菌溶血素O(LLO)、单增李斯特菌灭活菌混合,以MontanideISA206为佐剂制成疫苗,皮下接种家兔,并设灭活疫苗免疫组和PBS对照组,定期检测3组家兔的血清抗体、IL-4和IFN-γ水平的变化;二免后第21d每只家兔腹腔注射2×108CFU单增李斯特活菌攻毒,观察各组家兔的发病情况,每隔24h检测一次细菌在各组家兔体内的繁殖率。结果表明,添加P60和低剂量LLO重组蛋白的单增李斯特菌灭活疫苗免疫组家兔二免后抗体水平明显高于其他各组,且能诱导Th细胞向Th1型分化,抑制Th2型细胞的分化,调节抗原特异性免疫应答,能有效抵抗单增李斯特菌的感染,使细菌在家兔体内(外周血、脾)的几何增长率从64.69%降到24.06%,免疫效果明显优于灭活疫苗单独免疫组。证明P60和低剂量LLO能增强灭活疫苗的免疫保护效果。     

刚地弓形虫代谢分泌抗原对山羊IFN-γ、TNF-α、IL-2和IL-4表达水平的影响

为了探索刚地弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)对山羊的免疫保护机制,将山羊随机分为6组,即E/SA组、E/SA+CpG组(未乳化)、E/SA+CpG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊血清,用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的表达水平.结果显示,各免疫组免疫后IFN-γ、TNF-α、IL一2、IL-4的含量分别为175.40～215.60、89.95～253.80、230.40～301.50、39.20～54.20 pg/mL,而免疫前分男q为14.00～18.75、30.91～42.20、10.75～18.30、20.40～24.60 pg/mL,对照组分别为16.50～36.56、37.75～58.20、11.50～21.75、21.6l～27.60 pg/mL,免疫组在免疫后体内IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量明显升高,均显著高于对照组(P＜0.05).表明,E/SA可引起IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4水平的升高,说明E/SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答.     

大青叶中4(3H)喹唑酮提取工艺的研究

将4(3H)喹唑酮含量作为大青叶的质控指标,采用正交试验方法考察了药材粒度、提取溶荆、提取时间、溶剂倍量等因素对提取的影响.分别进行热回流提取、超声波提取和微波提取工艺研究,优选4(3H)喹唑酮的最佳提取工艺条件.结果表明,在提取因素方面,药材粒度是热回流提取的主要影响因素,溶剂倍量是微波提取的主要影响因素,乙醇浓度是超声波提取的主要影响因素.当以提取速率(提取率与提取时间的比值)为分析指标时,微波提取工艺要明显高于其他提取工艺,超声波提取工艺次之.三种提取方法中,热回流提取工艺的提取率最高,其最佳工艺条件为A2B3C1D1,即药材粒度0.30 mm、700 mL/L乙醇、热回流时间1 h、8倍量溶剂.     

牛源支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定

从2008年黑龙江省某奶牛场犊牛中暴发的一种以呼吸道病变为主疾病的患病牛中分离出3株细菌,根据其形态特征、培养特性、生化特性等将分离菌鉴定为支气管败血波氏杆菌.对分离菌进行药敏试验、皮肤坏死试验及16 S rRNA基因的克隆和序列分析.结果显示,该菌对氟哌酸、丁胺卡那霉素、庆大霉素、氯霉素敏感,可导致豚鼠皮肤坏死;其16 S rRNA基因序列与GenBank中收录的标准菌株Bb RB50株(BX640449)同源性为100%.证实,引起该病的病原是支气管败血波氏杆菌.     

城市社区网格员的职业困境及破解——基于改进版VRIO模型的分析

当前优化城市社区治理的形势要求加强城市社区网格员人力资源的管理与开发。现阶段城市社区网格员面临工资待遇较低、晋升渠道较窄、地位低权力小等职业困境。通过将VRIO模型和战略性人力资源管理中的4P模型相结合,形成改进版的VRIO模型,以此分析城市社区网格员的职业生涯,发现低价值性、非稀缺性以及易模仿性是造成城市社区网格员职业困境的主要原因。因此,需通过加强素质管理、岗位管理、绩效管理以及薪酬管理促进城市社区网格员人力资源优质化发展。     

应用16S rRNA基因序列鉴定15只鸟类残体

目的 应用鸟类线粒体16S rRNA基因PCR测序方法进行涉案鸟类残体的物种鉴定。方法 以15只未知鸟类残体冷冻肌肉组织为研究材料,采用PCR扩增DNA条形码片段16S rRNA。结果 通过序列在线比对和系统发育分析,判定15份检材涉及珠颈斑鸠（Spilopelia chinensis）、斑鸫（Turdus eunomus）、麻雀（Passer montanus）、金翅雀（Chloris sinica）、燕雀（Fringilla montifringilla）和北红尾鸲（Phoenicurus auroreus）,共计6种鸟类物种,隶属2目6科6属,均为“三有名录”保护动物。结论 16s rRNA基因片段可以作为一个可靠手段对鸟类残体进行准确的物种鉴定,为司法案件的定性与量刑提供可靠的证据。     

指纹荧光显现剂DAFO的合成及应用

为了能使多波段光源技术得到广泛应用,笔者使用1,10-菲啰啉为原料,改用碱性条件下,以1,4-二氧六环和水为混合溶剂,高锰酸钾(KMnO4)为氧化剂,合成了对汗液指纹能产生良好荧光的4,5-二氮杂芴-9-酮,合成产率达到51%;优于文献报道的收率仅有10~15%。其荧光效果优于1,8-二氮杂芴酮(DFO),在汗液指纹荧光显现中可推广应用。