Ⅰ型鸭肝炎病毒逆转录套式PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)A66株的RNA聚合酶基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合DHV-Ⅰ快速检测的逆转录套式PCR方法(RT-nested-PCR),采用该方法对DHV-ⅠA66弱毒株和R85952强毒株进行了检测.结果显示,均能扩增到304 bp的条带,而正常鸭胚、健康鸭肝组织、鸭瘟病毒、鹅细小病毒、禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性腔上囊病病毒、减蛋综合征病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里氏杆菌和鸭源多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性.该方法第1次扩增的敏感性是100 Pg,第2次扩增的敏感性是1 fg,第2次比第1次扩增的敏感性高106倍.表明,所建立的逆转录套式PCR方法可用于鸭病毒性肝炎(DVH)的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查等.     

油水·石水·乳水

反思我们工作中一些不尽如人意的问题,恰恰是在深入群众、联系群众、依靠群众的关系上发生了偏差不断听到一些领导干部说,我们经常深入基层,到群众中调研,有时还与群众同吃同住同劳动,但群众总与我们不近乎,也不大愿意说实话,有情况也不报告,     

发展生态林业 弘扬生态文化

广西国有雅长林场林区内动、植物资源非常丰富。分布的野生植物共214科2000余种。其中国家一级保护植物近2种，二级保护植物18余种。松科新种拉雅松为雅长林区所独有；草本以野生兰科植物最出名，目前已发现130种。主要的野生动物有28目61科267种。其中属国家一级保护的有5种，二级保护40种，列入广西重点保护的20种。林场现划定为国家重点公益林面积69．62万亩，为大型公益型林场。     

专业课课程思政的思考及实践——以土木工程专业为例

基于三全育人和协同育人的理念,以植物生长为视角丰富课程思政理念内涵,建立起"土、根、茎、蒂、果"与专业课课程思政各关键要素间的内在联系,同时借鉴植物生长过程中保障与促进养料和水分传递的做法,研究探索出一套具有推广性和指导意义,适合土木类专业课课程思政的建设策略——"沃土、强根、护茎、固蒂",并在该理念和策略的指引下,从...     

内蒙古自治区人民政府办公厅关于进一步加强林业植物检疫工作的通知

各盟行政公署、市人民政府,自治区各有关委、办、厅、局,各有关企业、事业单位：近年来,我区在堵截重大检疫性有害生物传人、控制林业有害生物发生方面取得了较大进展。但随着我区与周边省份物资贸易越来越频繁,林业植物、林产品及繁殖材料的调运量日益增加,     

“农业知识产权论坛”在昆明召开

2007年11月17-19日,由农业部植物新品种保护办公室主办,云南省农业厅、农业部科技发展中心、中国农业科学院农业知识产权研究中心举办的首届“农业知识产权论坛”在美丽的春城昆明召开。参加此次会议有来自农业知识产权领域的有关专家、农业部政策与法规司、种植业管理司、各省、自治区、直辖市农业厅科教处知识产权工作的负责人、国家知识产权战略制定工作领导小组办公室、最高人民法院、国家林业局植物新品种保护办公室的有关领导以及有关新闻媒体的代表100余人。农业部科教司副司长石燕泉到会并致辞,他分析了知识产权与我国农业发展的关…     

植物SSR标记的研究现状及其在法庭科学中的应用

随着SSR分子标记技术的深入研究,其在植物遗传多样性分析、种属鉴定、个体识别中得到越来越广泛的应用。本文就植物SSR分子标记技术的特性、发展、研究现状进行综述,并探讨其在法庭科学中的应用前景,旨在为法庭科学和相关学科中的应用和相关领域中的研究提供参考。     

猪胸膜肺炎放线杆菌半套式PCR检测方法的建立及应用

根据1型胸膜肺炎放线杆菌apx Ⅳ A基因3'端序列设计3条引物,建立了检测猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的半套式PCR方法.筛选了该方法的最佳反应条件,并采用该方法进行临诊检测,比较了不同处理临床样品的检测结果.结果表明,该方法能检测出所有供试血清型APP,不能从猪上呼吸道常见细菌基因组DNA中扩增出条带,特异性好;最低DNA检出量为16.5 fg,其灵敏性是常规PCR方法的1 000倍;重复性试验结果表明,该方法稳定可靠.应用半套式PCR方法检测临床样品,检出率显著高于细菌分离鉴定;样品保存方法和核酸抽提方法能影响阳性样品的检出率.     

鸭疫里氏杆菌鸭源致病性大肠埃希氏菌和鸭沙门菌的RAPD研究

以 4株不同血清型的鸭疫里氏杆菌、5株不同血清型的鸭源致病性大肠埃希氏菌和 5株同一血清型的鸭沙门菌为研究对象 ,分别提取基因组DNA ,利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对其基因组DNA进行了分析。结果 ,从 2 0条随机引物中筛选出了 38条能在这 3种菌中有较好多态性的随机引物 ,8个有效引物共扩增出了 10 2个DNA片段 ,其中 14个菌株共有的谱带仅有 1条 ,显示多态性的片段有 10 1个 ,占 99.0 % ;对RA的 4个菌株扩增出的谱带数为 5 1条 ,共同片段有 12条 ,多态性片段 39条 ,占 76 .5 % ;对沙门菌的 5个菌株扩增出的条带数为 4 6条 ,共同片段为13条 ,多态性片段 33条 ,占 71.7% ;对大肠埃希氏菌的 5个菌株扩增出的条带数为 4 8条 ,共同片段 4条 ,多态性片段 4 4条 ,占 91.7%。在 8条引物中进一步筛选出 1条引物G12 ,其图谱中 5 35bp的条带为鸭疫里氏杆菌所特有 ,330bp的条带为沙门菌所特有 ,12 2 7bp的条带为大肠埃希氏菌所特有 ,表明G12可作为分子标记用来鉴别这 3种细菌。     

四种血清型胸膜肺炎放线杆菌多重PCR检测方法的建立

根据胸膜肺炎放线杆菌(APP)外膜蛋白OmlA序列设计种特异性引物,根据血清型1、2、6、7荚膜多糖(CPS)序列分别设计型特异性引物,通过优化PCR扩增条件,分别扩增出OmlA(952 bp)、CPS1(630bp)、CPS2(504 bp)、CPS6(720 bp)、CPS7(389 bp)特异性片段,建立了既可对APP进行定性检测又可对APP 1、2、6、7进行定型检测的多重PCR.特异性试验表明,此多重PCR能从APP 1～4、6～10标准株中扩增出与引物相应的特异性片段;对猪副嗜血杆菌、猪肺炎霉形体、多杀性巴氏杆菌、肠炎沙门菌、猪链球菌、大肠杆菌和猪丹毒杆菌进行扩增,均未扩增出片段.敏感性试验表明,此多重PCR能够检测到DNA的量为10 pg.45头疑似病猪病料的细菌分离鉴定结果与此多重PCR的鉴定结果一致.上述结果表明,建立的多重PCR适合于APP 1、2、6、7的鉴别诊断及流行病学调查.