以免疫活性串联片段FB为抗原检测FMDV抗体的间接ELISA方法

将口蹄疫病毒免疫串联片段FB克隆至原核表达载体pBAD/TOPO中,得到重组质粒pBAD-FB,将此重组质粒转化到受体菌TOP10中,以不同浓度的阿拉伯醛糖进行诱导,并在不同诱导时间进行采样,经处理后做SDS-PAGE、Western-blotting分析。结果发现以终浓度为0.02g/L的阿拉伯醛糖进行诱导,4h后表达量可达高峰,其大小约为26ku,扫描结果显示,FB融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的28.9%,能与抗FMDV抗体发生特异性反应,融合蛋白以包涵体和可溶形式存在。将融合蛋白的可溶性组分用500g/LNi-NTA树脂过柱纯化后作为包被抗原,成功地建立了检测血清中FMD抗体的间接ELISA方法。融合蛋白的最佳包被浓度是40μg/mL;标准阳性血清的最适稀释倍数为1∶160;最佳封闭液为50g/L脱脂奶粉和PBS;最佳封闭时间为1h。用建立的ELISA方法对采集的118份样品进行检测,并与全病毒包被抗原ELISA、间接血凝诊断试剂盒和UBIVP1抗体检测ELISA试验盒的检测结果比较,证明所建立的方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性。     

茯苓多糖的分离纯化、组成及其抗氧化活性研究

目的 分离纯化得到带电性不同的茯苓多糖组分,分析其化学组成性质,比较多糖粗提物和其不同组分的抗氧化活性.方法 采用水提醇沉法提取茯苓多糖粗提物(Poria cocos Polysaccha-ride,PCP),利用二乙氨基乙基(diehlaminowthy,DEAE)-纤维素阴离子交换色谱柱法对多糖粗提物进行分离纯化,...     

GC/MS法同时测定6种新精神活性物质

采用气相色谱-质谱联用法对3种卡西酮类物质4-MEC、Methylone、MDPV和3种合成大麻素JWH-018、JWH-250、AM-2201进行检测,通过改变柱温和升温速率等对色谱条件进行优化,结果表明柱温初温100℃保持1min,以每分钟30℃的速率升至280℃,保持1min,再以每分钟20℃的速率升至300℃,保持36min的条件下,6种新精神活性物质达到完全分离,结合保留时间和质谱图可准确定性,卡西酮类物质和合成大麻素的方法检测限分别为10μg/mL、20μg/mL。本方法灵敏、快捷、易于操作,适合对未知样品进行筛查选用。     

原则的坚定性和手段的灵活性——一种理解中国特色社会主义的新视角

胡锦涛同志在十七大报告中指出：“中国特色社会主义道路之所以完全正确、之所以能够引领中国发展进步，关键在于我们既坚持了科学社会主义的基本原则，又根据我国实际和时代特征赋予其鲜明的中国特色。”这段重要论述，为我们深入理解中国特色社会主义提供了一个不同以往的新的理论视角．即基本原则的坚定性和建设手段的灵活性的统一。     

对当前我省打击涉众型经济犯罪工作情况的调查与心思考

当前我省涉众型经济犯罪主要表现形式有:合同诈骗涉及面广、金额巨大,集资诈骗犯罪和非法吸收公众存款案件突出,传销犯罪屡打不绝,非法经营证券、期货犯罪涉案金额大.打击防范涉众型经济犯罪必须紧紧依靠党委、政府,建立重点企业联系制度;践行情报信息主导经侦工作观念.基本对策:一要增强经侦工作的责任感和使命感;二要构建维护经济安全的工作体系;三要夯实经侦工作基础;四要坚持政策性与灵活性相结合的原则;五要加强对金融机构的监管力度.     

减蛋综合征病毒五邻体基因的原核表达及其表达蛋白的部分活性分析

通过PCR方法扩增得到减蛋综合征病毒(EDSV)结构蛋白五邻体(Penton)基因,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)的多克隆位点,构建了原核表达载体pET-30a-Penton,将其转化到感受态细胞Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了54.0ku的融合蛋白。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备抗血清,通过血凝试验、Western-blot、血凝抑制试验、细胞中和试验进行分析,表明该融合蛋白不能引起鸡红细胞凝集,无血凝活性;可与EDSV阳性血清发生特异性反应,能够诱导机体产生中和抗体,具有良好的抗原性。     

小反刍兽疫病毒F基因真核载体的构建与表达

根据GenBank中小反刍兽疫病毒(Nigeria 75/I株)F基因序列设计了引物,应用RT-PCR方法获得了目的基因,纯化回收后将其连接到克隆载体pMD18-T上.将鉴定与序列测定后的目的基因再克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经过鉴定,成功构建了含有小反刍兽疫病毒F基因的真核细胞表达栽体pEGFP-N1-F.利用脂质体介导阳性pEGFP-N1-F质粒转染了BHK-21细胞.Western-blotting证实,表达的pEGFP-N1-F融合蛋白(90 ku)具有免疫活性.     

电子烟油、毛发和尿液中新精神活性物质依托咪酯的检测

<正>依托咪酯俗称“烟粉”,贩卖人员通常将“烟粉”非法添加入普通电子烟油里贩卖给涉毒人员。本文利用GC-MS/MS和LC-MS/MS在广州市公安局某派出所缴获的电子烟油中检测出一种新精神活性物质依托咪酯,送检的电子烟油超过80%检测出依托咪酯。对吸食依托咪酯人员的毛发和尿液进行检测,     

我国“笑气”滥用的法律规制困境及其破解

“笑气”（一氧化二氮）是一种无色有甜味的气体,广泛用于食品加工、医疗、航空航天等领域。人吸食笑气后会产生欣快愉悦感甚至幻觉。近年来,笑气出现在一些酒吧、KTV等娱乐场所,被一些吸毒人员当作毒品替代品,这给社会治理带来新的挑战。目前,我国笑气滥用的法律规制存在困境,亟待破解。为此,应适当借鉴国外相关经验,从明确笑气的法律地位、适时出台笑气列管规定、修订笑气非法流通行为的法律规定等方面着手,完善我国笑气治理法律体系。     

二十世纪美国LSD的滥用经验教训对我国新精神活性物质(NPS)管控的启示

当前,新精神活性物质(New Psychoactive Substance,NPS)异军突起。新精神活性物质虽然出现时间不长,但是,由于种类多、发展快,滥用问题在我国开始呈现出发展的态势。在2018年6月26日发布的《2017年中国毒品形势报告》①中指出,新精神活性物质问题快速发展。与此同时,美国在新精神活性物质的滥用较为严重,且有着更久远的历史。美国20世纪的LSD(D-麦角酸二乙基酰胺的缩写,以下简称LSD)滥用同我国当前新精神活性物质的滥用在很多方面都有着相似之处。本文通过文献分析法收集美国20世纪LSD滥用的资料,进行整理分析;同时,将其与我国当前的新精神活性物质的现状进行比较,试图从中获得启示。