肝豆汤调控NLRP3炎症小体抑制Wilson病模型神经炎症的机制研究

目的 通过观察肝豆汤对Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(Nod-like receptor family, pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体的调控作用,探究其抑制Wilson病(Wilson’s disease, WD)模型神经细胞炎症损伤的机制。方法 体外实验中,采用CuCl₂诱导小胶质细胞(BV-2细胞)复制WD神经细胞损伤模型,并将BV-2细胞与海马细胞(HT-22细胞)条件培养,给予不同浓度肝豆汤含药血清。CCK-8法检测BV-2细胞及HT-22细胞活力,酶联免疫吸附法测定炎症因子水平,细胞化学法检测HT-22细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)漏出水平及氧化应激水平,Western blot法检测NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平。体内实验中,以TX小鼠为模型组,并以DL小鼠为正常组,肝豆汤组给予TX小鼠肝豆汤灌胃4周。采用Barnes迷宫、旷场实验、高架十字实验观察小鼠行为,苏木精—伊红染色法观察小鼠海马组织的损伤程度,Western blot法检测NLR...     

科技评价体系要破除SCI迷思

近一个月来,在全民战疫的关键时期,科技部接连下发通知,要求各有关科研单位和科研人员要勇挑重担,全力投入科技攻关任务,把论文写在抗击疫情的第一线;要求改进科技评价体系,破除评价体系中过度看重论文数量、影响因子,而忽视标志性成果质量、贡献、影响等“唯论文”的不良导向;指出当前科技评价中存在SCI论文相关指标过度扭曲使用等现象,要求净化学术风气,优化学术生态。     

乡镇基层公务员工作满意度研究——以贵港市覃塘区为例

长期以来,对政府公务员工作满意度的研究,学者们孜孜不倦,而乡镇基层公务员的工作满意度却长期被忽略。那乡镇基层公务员的满意度究竟如何?以贵港市覃塘区各乡镇公务员为研究对象,通过问卷调查和统计分析等方法了解该地区公务员工作满意度现状,并采用探索性因子分析得到该地公务员工作满意度因子模型,并进一步探讨了其在性别、婚姻、学历等不同人口统计变量上的差异和主要影响因素。结果表明:公务员工作满意度主要由管理沟通、工作条件、学习发展、工作本身、工作回报五个特征维度构成。对此,可以通过加大财政倾斜力度、建立新型薪酬制度等相应措施加以改进。     

法医微生物学在应对生物犯罪中的研究及应用进展

早在2001年,美国炭疽信件恐怖袭击就证实了微生物可以被用作犯罪行为的武器。虽然与其他犯罪类型相比,目前"生物犯罪"的案件量很少,但这些犯罪行为却引发了为刑事诉讼活动提供法庭科学证据的问题,即如何确定生物恐怖因子的来源以及如何确定犯罪行为人。本文对法医微生物学在应对生物犯罪中的研究与应用进行综述。     

胶体金免疫层析一步法快速检测G1m(3)因子

建立一种简便快速的胶体金免疫层析一步法 ,用于检测 G1m(3)因子。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗人 G1m(3)单克隆抗体 ,研制出抗人 G1m(3)因子免疫层析检测试剂盒。样品的 G1m(3)因子 ,与测试条上的金标记抗体结合后沿着反应膜移动 ,再与膜上固相抗体结合形成肉眼可见的红色反应带。使用该方法可检出 10万倍稀释的血清样品 ,整个试验只需 5 min完成。对常见的 2 3种动物血 (痕 )检验 ,未出现交叉反应。在 10 0例样品的检测中 ,本方法的检测结果 ,与 Dot- EL ISA的检测结果的符合率为 10 0 %。该方法适用于法医物证快速检验。     

IL-1β诱导体外培养大鼠脑微血管内皮细胞的损伤

目的 探讨IL-1β对大鼠脑微血管内皮细胞的结构和功能的损伤作用。方法 体外培养大鼠来源的脑微血管内皮细胞,将实验分为4组：Control组、IL-1β组、IL-1β+IL-1RA组、IL-1RA组。用TEER和FITC-Dextran检测各组细胞的渗透性,免疫荧光法和Western blot方法检测Claudin-5、Occludin、ZO-1的表达变化,用鬼笔环肽（TRITC Phalloidin）检测内皮细胞F-actin的改变。结果 （1）IL-1β组的TEER显著低于Control组,而与IL-1β组相比,IL-1β+IL-1RA组TEER值又显著升高;（2）IL-1β组FITC-Dextran的渗漏含量显著高于Control组,而与IL-1β组相比,IL-1β+IL-1RA组的FITC-Dextran渗漏含量显著降低;（3）与Control组相比,IL-1β组内Claudin-5、Occludin、ZO-1的表达水平均显著降低,而与IL-1β组相比,IL-1β+IL-1RA组Claudin-5、Occludin、ZO-1的表达均明显升高;（4）与Control组相比,IL-...     

脂多糖诱导奶牛子宫内膜上皮细胞核因子κB的表达

通过研究脂多糖(LPS)诱导奶牛子宫内膜上皮细胞核因子κB亚单位P65蛋白mRNA的表达变化,从细胞水平深入探讨子宫内膜炎的发病机理。将奶牛子宫内膜上皮细胞传代培养,采用1、10、50、100、1000μg/mL五个浓度梯度的LPS刺激子宫内膜上皮细胞,MTT法筛选最佳刺激浓度;以上述最佳刺激浓度刺激细胞,于0、0.5、1、2、4h后收集细胞,荧光定量RT-PCR检测p65 mRNA的表达差异性。结果显示,100μg/mLLPS为最佳刺激浓度;LPS刺激1h组p65 mRNA的表达极显著(P0.01)高于其他时间组;2h组显著(P0.05)高于0、0.5和4h组;0.5和4h组显著(P0.05)高于0h组。结果表明,LPS可诱导奶牛子宫内膜上皮细胞NF-κB的激活,LPS介导的NF-κB信号通路存在于奶牛子宫内膜上皮细胞中,并参与子宫内膜炎发病机理的调控。     

猪链球菌2型胞外因子短片段的原核表达及其免疫保护力

以江苏分离株HA9801基因组DNA为模板,扩增猪链球菌2型(SS2)胞外因子ef基因的1423～2203 bp片段,并将其亚克隆至表达栽体pGEX-4T-1上,构建了重组质粒pGEX-4T-1-ef.将鉴定阳性的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5 mmol/L IPTG诱导8 h,表达的融合蛋白rGST-sEF大小为56 ku,以包涵体形式存在.Western-blotting显示,rGST-sEF能与全菌兔抗血清发生特异性反应.用自制rGST-sEF亚单位疫苗免疫新西兰兔.以最小致死量HA9801攻击,保护率为60%.结果表明,表达的融合蛋白rGST-sEF具有良好的免疫原性和免疫反应性.     

金黄色葡萄球菌凝聚因子A区基因的克隆表达及表达产物的免疫学特性

采用PCR技术对引起乳牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌凝聚因子(ClfA)A区基因进行了扩增和克隆测序,并对测序结果用DNAStar软件进行了抗原表位分析,成功构建了原核表达质粒pET-32a-ClfA A.将其转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,证实目的蛋白以可溶形式存在.用His·Bind柱对其纯化后获得了纯度较高的蛋白.纯化后的蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫家兔得到了较高效价的抗血清,通过ELISA、试管凝集试验、吞噬调理试验、抗体抗金黄色葡萄球菌黏附能力检测等对表达产物及制备的超免疫血清进行了检测.试验证明目的蛋白具有黏附活性,自制的超免疫血清具有抗金黄色葡萄球菌黏附至牛纤维蛋白原的作用以及吞噬调理作用,所表达的蛋白为ClfA A蛋白.