禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立

用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2 mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。     

抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨

抗P30胶体金免疫试纸条(又称精斑试纸条)是利用免疫学方法和色谱层析技术对前列腺特异性抗原(PSA,又称P30)进行特异性检测的一种简便方法[1]。由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验。但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈现阳性结果,却检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况,为验证及比较灵敏度及特异性,本文进行了一些探讨,现报道如下。1材料和方法1.1材料精斑试纸条:购自美国E-boat Dallas公司。样品:10支阴道棉签拭子取自一周内无性生活的女性志愿者,阴道分泌液斑…     

杭州地区猪Ⅱ型圆环病毒抗体的血清学调查

从浙江省杭州地区 2 8个猪场采集猪血清 1 6 77份 ,用间接荧光免疫试验进行了猪Ⅱ型圆环病毒 (PCV 2 )抗体检测。共检出抗体阳性血清 96 0份 ,总阳性率为 5 7.2 5 % ,其中经产母猪的阳性率为 6 2 .32 % ,后备母猪的阳性率为 5 5 .5 5 % ,断奶后仔猪的阳性率为 5 5 .4 8% ,断奶前仔猪的阳性率为 5 2 .98%。血清学调查结果显示 ,PCV 2在杭州地区猪场的感染较普遍     

指纹ABO血型的检验

指纹可以通过它的形态和特征进行人类的个体识别,但对模糊、残缺、重叠、变形的指纹要给予同一认定是相当困难的,笔者应用红细胞粘连试验对指纹的ABO血型进行检验,收到了较好的效果,现报告如下,供同行参考。     

禽Ⅰ型副黏病毒各种禽源分离株对4种禽类的致病性

选取从临床感染禽Ⅰ型副黏病毒(APMV-1)的鸡、鹅、鸽、鹌鹑、珍珠鸡、孔雀、画眉鸟等7种禽类病例分离到的9个代表性毒株,分别对鸡、鹌鹑、鹅和鸽进行了人工感染试验。结果,除鸽源毒株gxp22对鸡和鹅无致病力外,其他8个分离毒株对鸡、鹌鹑和鹅都有较强的致病力,死亡率为60%~100%,试验鸡表现的症状和病理变化特征最明显,鹅的比较明显,鹌鹑的则最不明显;3个鸽源分离株对鸽的致病力都很强,死亡率均为100%。所有毒株对4种禽类的致病性与其临床特征相符。研究结果表明,试验所用的9个分离株除鸽源分离株gxp22外,均为泛嗜性的新城疫强毒株。     

H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒(AIV)A/Goose/HLJ/p46/2003(H5N1)的NS1基因,将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上,转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析,表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示,重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后,经0.3mmol/L的IPTG诱导,融合蛋白MBP-NS1得到大量表达,融合蛋白以可溶形式存在,分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明,融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应,而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法,为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。     

粉煤灰铺筑道路基层的研究

通过对粉煤灰的性质及大量的研究试验的分析,以粉煤灰在道路基层试验路段中的实际应用为依据,总结出粉煤灰作为路面基层材料与石灰等其他材料的合理配合比,该配合比在室内及施工现场均能达到规范所要求的强度及弯沉标准,这不仅可拓宽道路基层材料的应用范围,而又可节约能源,使粉煤灰变废为宝,其经济效益和社会效益非常显著。     

别让“千里马”变成“老病牛”

据报载，在“嫦娥一号”绕月探测工程中，中国航天科技集团公司卫星研制团队中40岁以下青年逾七成，平均年龄不足30岁；长征三号甲火箭发射试验队40岁以下者占60％以上。一支充满朝气、自主创新、顽强拼搏的研制队伍正在成为我国航天科研的生力军。     

上海自贸区建设与企业的发展机遇简

2013年9月29日，上海自由贸易试验区正式挂牌，标志这片承载着推进改革和提高经济开放水平的“试验田”，正式开始耕耘、播种，中国进入新一轮经济开放的探索实践。上海自贸区不同于此前建立的保税区、保税物流区等特殊经济园区。而是以“一国之内”的自由贸易区形式出现，是大陆首个自由贸易区。总体目标是经过两三年的改革试验．力争建设成为具有国际水准的自由贸易试验区。     

列当的安全性评价试验

为进一步确定列当(Orobanche cumana)的实际效用以及是否可以在成为肉苁蓉的替代品方面有其相应的价值,对小鼠进行半数致死量测定和最大给药量测定的急性毒性试验、SD大鼠进行30 d灌胃的亚慢性毒性试验,观察列当水煎液的毒性作用。急性毒性试验结果表明,当列当水煎液的最大给药剂量为40 g/kg时,小鼠并无不适反应,体征一切正常,7 d内所有小鼠无死亡。亚慢性毒性试验期间,试验组大鼠的临床体征正常,血常规及血清生化指标均在正常范围内,剖检未见异常,在心、肝、肾组织学观察中均未见明显的病理变化。列当水煎液急性毒性试验及亚慢性毒性试验均说明列当水煎液实际无毒。