禽腺病毒4型环介导等温扩增检测方法的建立

为了建立禽腺病毒4型(FAdV-4)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究以FAdV-4 hexon基因高度保守的区域设计LAMP引物,并对反应体系和反应条件进行优化,同时评价该方法的特异性、灵敏度及对临床样品的适用性。结果显示,本研究建立的LAMP方法的最佳反应条件为63℃扩增65 min;反应体系中内外引物最佳比例为8∶1,MgSO₄和dNTP浓度分别为60 mmol/L和10 mmol/L;与FAdV-10、FAdV-8b、FAdV-11、NDV、IBDV、AIV-H9、IBV、ILTV、ORT、CIAV、ALV等均无交叉反应,具有良好的特异性;本方法可检测的DNA最低浓度为7.5×10^-8ng/μL,灵敏度是传统PCR法的100倍。用本研究建立的LAMP法和PCR法对80份临床样品进行检测,结果相符率为90.5%。上述结果表明,本研究建立的FAdV-4 LAMP检测方法具有准确性高、特异性强、灵敏度高和临床应用可行性强的优点,且结果易于判定,便于现场检测,为FAdV-4提供了一种新的现场诊断方法。     

血清4型禽腺病毒夹心ELISA检测方法的建立

为建立一种血清4型禽腺病毒（FAd V-4）夹心ELISA快速检测方法,本研究以FAdV-4多抗作为捕获抗体,FAdV-4 Penton蛋白单克隆抗体作为检测抗体,通过优化反应条件,建立了检测FAdV-4的夹心ELISA方法,对其进行特异性、敏感性、重复性检验和临床样品检测。方阵试验结果显示,FAdV-4多抗最佳稀释度为1∶2 000,单抗最佳稀释度为1∶32 000。该方法可特异性检测近年流行的高致病性FAdV-4毒株,而对之前的FAdV-4、其他血清型FAdV和常见禽病病原体不发生交叉反应。敏感性结果显示,该法对9.7×102TCID50/m L FAdV-4仍可检出。重复性结果显示,批内和批间试验的变异系数均小于5.0%。用建立的夹心ELISA方法与荧光PCR同时对100份肛口拭子样品进行检测,两者检测结果相符。上述结果表明,本研究建立的夹心ELISA检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可用于FAdV-4的大批量检测。     

禽霍乱改进型灭活苗的研制

用禽源多杀性巴氏杆菌Ｃ４８－１强毒株接种１日龄雏公鸡，制取肌肉脏器菌液，与Ｃ４８－１肉汤培养菌液按一定比例混合，制备成禽霍乱氢氧化铝胶灭活苗。攻毒试验表明，该苗对异型菌株Ｐ１０５９及从皖中西部地区分离的禽巴氏杆菌强毒株均有１００％保护力。     

全球伦理的儒学资源

全球伦理应被界定为在不同文化传统和生活方式之间存在的最低限度的、最基本的伦理道德共识和规范.在作为中国传统文化主流的儒家学说中,有三个基本的思想观念或道德命题--"己所不欲,勿施于人"、"人禽之辨"和"义利之辨"、"民胞物与",可以视为中国文化传统的基本的、能构成周延的道德界限,因而可称为"儒家道德底线三原则".此三项道德原则与西方文化、阿拉伯文化、印度文化等三个现存的最主要的不同文化传统中的基本道德观念具有相容性,这是儒学贡献给全球伦理的主要资源.     

禽脑脊髓炎病毒琼扩抗原的制备及其在评价鸡群抗体水平中的应用

以标准的禽脑脊髓炎（ＡＥ）病毒ＶＲ毒株和分离的野毒株分别感染ＳＰＦ鸡胚，取其病料组织制成琼脂扩散抗原。在含２０％ＮａＣｌ和０．５％苯酚的０．８％琼脂凝胶中，用这种抗原以琼脂扩散试验检测ＡＥ抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。     

奇观：金口大峡谷

金口大峡谷西起乌斯河,东至金口河,长26km,峡谷出口处河谷最低海拔约600m,峡谷北岸大瓦山海拔3222m,最大谷深达2600m,极其雄伟壮观；与长江三峡比较,大渡河金口大峡谷的深度要大将近一倍,而且连续完整的峡谷长度和险峻壮丽程度均超过三峡。两岸奇峰突起,绝壁千仞,形如飞禽走兽,千姿百态,栩栩如生,山间分布着不同层次的植物、森林,林中奔跑着各类野生动物,构成一幅山环水绕、山水同天的迷人景象。除大渡河主峡谷外,大渡河两侧还有丁木沟、白熊沟、老昌沟、深溪沟等一系列支沟峡谷,呈现深不见底、窄如刀缝、绝壁深涧一线天的奇景,这些支沟内已发现多处产优质观赏水晶的水晶洞,是寻奇探幽的胜地。在海拔3222米的大瓦山,四周被绝壁围绕,形成山顶平坦四周凌空的平顶高山。远远望去大瓦山更象一座空中楼阁或者是航行于茫茫林海的巨轮。它四周绝壁高差达到1200米,山顶平台面积达到1．6平方公里,源于山顶的两条小河从东南面的悬崖上飞泻而下,形成落差达1000米瀑布。大瓦山由二叠纪火山喷发的玄武岩构成,地质结构与蛾眉山、瓦屋山相同,因而被称为“蜀中三绝”。但大瓦山与峨眉山、瓦屋山相比在地貌景观上更为奇特。在大瓦山顶,南可俯瞰气象万千、雄险如削的金口大峡谷；北可遥望蛾眉山金顶,聆听那悠远的钟声；西可极目蜀山之王贡嘎山如玉的雪峰。朝晖落霞,云海雾涛,极尽天地自然之大观。五彩天池碧波轻舟如诗如画。     

H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达及其产物的免疫原性

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)株的NA基因及LacZ报告基因克隆到禽痘病毒载体pSY681中,构建重组转移载体pSY(NA+LacZ),将其转染鸡胚成纤维细胞,经蓝白斑筛选,纯化表达NA基因的重组禽痘病毒rFPV-NA,用其免疫SPF鸡,检测该重组禽痘病毒的免疫原性。结果显示,该重组禽痘病毒能够在体外培养细胞内表达具有生物学活性的NA蛋白,表达产物的分子质量约为55 ku;用该重组禽痘病毒免疫SPF鸡后,能够使免疫鸡获得对H5N1和H7N1两种亚型HPAIV攻击的部分保护。表明,重组禽痘病毒rFPV-NA具有良好的免疫原性。     

湖北省蛋鸡J亚群禽白血病的血清学调查

为了解湖北省蛋鸡J亚群白血病的感染情况,采用禽白血病病毒J亚群抗体检测试剂盒对10个疑似感染的商品代蛋鸡场和10个临床健康父母代种鸡场共721份样本进行了血清学调查。结果显示,J亚群禽白血病病毒血清抗体平均阳性率为5.8%,其中商品代蛋鸡为22.1%,父母代种鸡为1.9%,鸡场阳性率均达50.0%。4个品种蛋鸡的检测结果表明,海兰褐蛋鸡感染情况较为严重,其J亚群禽白血病病毒血清抗体的平均阳性率达9.0%,其次为罗曼褐蛋鸡,为1.0%;尼克粉蛋鸡为0.5%;而江汉本地土鸡阳性率均为0。调查结果表明,湖北省的蛋鸡群中存在J亚群禽白血病病毒感染,不同品种蛋鸡的感染程度存在明显差异。     

J亚群禽白血病病毒SCAU-0901株的分离鉴定

在组织病理学观察的基础上,经接种DF-1细胞系、ELISA抗原检测、聚合酶链式反应(PCR)以及亚群特异性免疫荧光试验(IFA),从送检的疑似禽白血病感染的麻黄肉种鸡中分离并鉴定出1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为SCAU-0901.利用特异性引物分别扩增出长度为545 bp和2.2×103bp的目的片段,并对目的片段进行了克隆测序.序列分析发现,SCAU-0901株的gp85基因与国内外各ALV-J毒株相应核苷酸序列的相似性为86.1%～95.1%,其中与BJ0303株的相似性最高(95.1%),与ADOL-7501株的相似性最低(86.1%).系统遗传进化分析表明,SCAU-0901株的gp85基因片段与BJ0303株的亲缘关系最近.