禽脑脊髓炎病毒琼扩抗原的制备及其在评价鸡群抗体水平中的应用

以标准的禽脑脊髓炎（ＡＥ）病毒ＶＲ毒株和分离的野毒株分别感染ＳＰＦ鸡胚，取其病料组织制成琼脂扩散抗原。在含２０％ＮａＣｌ和０．５％苯酚的０．８％琼脂凝胶中，用这种抗原以琼脂扩散试验检测ＡＥ抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。     

两次瘟疫两个天地

光阴似箭,日月如梭,不觉间已跨人“古稀”之列。回忆我的人生旅程,先后经历了两次较大的瘟疫。两次的大瘟疫,恰好相隔60年。一次是民国32年(1943年)粤东潮汕地区的霍乱,一次是今年,先是广     

奇观：金口大峡谷

金口大峡谷西起乌斯河,东至金口河,长26km,峡谷出口处河谷最低海拔约600m,峡谷北岸大瓦山海拔3222m,最大谷深达2600m,极其雄伟壮观；与长江三峡比较,大渡河金口大峡谷的深度要大将近一倍,而且连续完整的峡谷长度和险峻壮丽程度均超过三峡。两岸奇峰突起,绝壁千仞,形如飞禽走兽,千姿百态,栩栩如生,山间分布着不同层次的植物、森林,林中奔跑着各类野生动物,构成一幅山环水绕、山水同天的迷人景象。除大渡河主峡谷外,大渡河两侧还有丁木沟、白熊沟、老昌沟、深溪沟等一系列支沟峡谷,呈现深不见底、窄如刀缝、绝壁深涧一线天的奇景,这些支沟内已发现多处产优质观赏水晶的水晶洞,是寻奇探幽的胜地。在海拔3222米的大瓦山,四周被绝壁围绕,形成山顶平坦四周凌空的平顶高山。远远望去大瓦山更象一座空中楼阁或者是航行于茫茫林海的巨轮。它四周绝壁高差达到1200米,山顶平台面积达到1．6平方公里,源于山顶的两条小河从东南面的悬崖上飞泻而下,形成落差达1000米瀑布。大瓦山由二叠纪火山喷发的玄武岩构成,地质结构与蛾眉山、瓦屋山相同,因而被称为“蜀中三绝”。但大瓦山与峨眉山、瓦屋山相比在地貌景观上更为奇特。在大瓦山顶,南可俯瞰气象万千、雄险如削的金口大峡谷；北可遥望蛾眉山金顶,聆听那悠远的钟声；西可极目蜀山之王贡嘎山如玉的雪峰。朝晖落霞,云海雾涛,极尽天地自然之大观。五彩天池碧波轻舟如诗如画。     

H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达及其产物的免疫原性

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)株的NA基因及LacZ报告基因克隆到禽痘病毒载体pSY681中,构建重组转移载体pSY(NA+LacZ),将其转染鸡胚成纤维细胞,经蓝白斑筛选,纯化表达NA基因的重组禽痘病毒rFPV-NA,用其免疫SPF鸡,检测该重组禽痘病毒的免疫原性。结果显示,该重组禽痘病毒能够在体外培养细胞内表达具有生物学活性的NA蛋白,表达产物的分子质量约为55 ku;用该重组禽痘病毒免疫SPF鸡后,能够使免疫鸡获得对H5N1和H7N1两种亚型HPAIV攻击的部分保护。表明,重组禽痘病毒rFPV-NA具有良好的免疫原性。     

湖北省蛋鸡J亚群禽白血病的血清学调查

为了解湖北省蛋鸡J亚群白血病的感染情况,采用禽白血病病毒J亚群抗体检测试剂盒对10个疑似感染的商品代蛋鸡场和10个临床健康父母代种鸡场共721份样本进行了血清学调查。结果显示,J亚群禽白血病病毒血清抗体平均阳性率为5.8%,其中商品代蛋鸡为22.1%,父母代种鸡为1.9%,鸡场阳性率均达50.0%。4个品种蛋鸡的检测结果表明,海兰褐蛋鸡感染情况较为严重,其J亚群禽白血病病毒血清抗体的平均阳性率达9.0%,其次为罗曼褐蛋鸡,为1.0%;尼克粉蛋鸡为0.5%;而江汉本地土鸡阳性率均为0。调查结果表明,湖北省的蛋鸡群中存在J亚群禽白血病病毒感染,不同品种蛋鸡的感染程度存在明显差异。     

J亚群禽白血病病毒SCAU-0901株的分离鉴定

在组织病理学观察的基础上,经接种DF-1细胞系、ELISA抗原检测、聚合酶链式反应(PCR)以及亚群特异性免疫荧光试验(IFA),从送检的疑似禽白血病感染的麻黄肉种鸡中分离并鉴定出1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为SCAU-0901.利用特异性引物分别扩增出长度为545 bp和2.2×103bp的目的片段,并对目的片段进行了克隆测序.序列分析发现,SCAU-0901株的gp85基因与国内外各ALV-J毒株相应核苷酸序列的相似性为86.1%～95.1%,其中与BJ0303株的相似性最高(95.1%),与ADOL-7501株的相似性最低(86.1%).系统遗传进化分析表明,SCAU-0901株的gp85基因片段与BJ0303株的亲缘关系最近.     

抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

利用提纯的禽脑脊髓炎病毒(AEV)VR株CEF适应毒制备抗原,免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术以间接ELISA筛选获得1株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞.对制备的细胞上清及腹水进行单克隆抗体特性鉴定,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳定性试验、SDS-PAGE电泳,表明该杂交瘤细胞染色体数目介于90-110条,该单克隆抗体亚类为IgG2a,分子质量为142 ku,ELISA测定细胞上清效价为11×104,腹水效价为11×106,与其它病原无交叉反应,抗体分泌稳定.     

禽副粘病毒2型标准株和国内分离株的透射电镜及免疫电镜观察

将禽副粘病毒2型的标准毒株Yucaipa病毒和国内分离株F4、F6和F8株分别接种SPF鸡胚,收获鸡胚尿囊液;经差速离心和蔗糖密度梯度离心后,分别制备电镜样品和免疫电镜样品;经10 g/L醋酸双氧铀负染后电镜观察病毒粒子形态.电镜下病毒粒子大小差别较大,形态呈圆形或椭圆型,直径150-300 nm,有结构致密的基质蛋白膜,有的囊膜外可见纤突.免疫电镜样品中病毒明显集中,便于观察.     

“678”反偷猎行动

上海地区是东亚至澳大利亚涉禽迁徙路线上最重要的驿站之一,每年的春季,上百万只鸻鹬类鸟从澳大利亚飞往西伯利亚繁殖,途经上海沿海地区,主要集中在南汇东部滩涂和崇明东滩。据鸟类专家回收的鸻鹬类鸟的环志分析,不少鸻鹬类鸟是一口气飞往上海的沿海滩涂,飞行时间在一周左右,体能消耗约三分之二。     

分泌抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定

采用腹腔接种和１次脾内注射禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）蛋白免疫小鼠，经３次融合后，共筛选出８株分泌抗禽呼肠孤病毒（单克隆抗体杂交瘤细胞株。这８株ＭｃＡｂ均可与ＡＲＶＳ１１３３株、ＦＤＯ株发生反应，而与ＩＢＤＶ，ＭＤＶ，ＥＤＳ－７６病毒不发生反应。经亚类鉴定，ＡＥ７，ＡＦ８，ＢＤ１，ＤＨ１０，ＥＥ５为ＩｇＧ１；ＡＤ６，ＣＧ４为ＩｇＧ２ａ；ＡＧ７为ＩｇＧ２ｂ。腹水效价在１０￣３～１０￣５之间。