牛病毒性腹泻病毒Erns基因的真核表达及抗原性检测

为研究牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Erns基因的生物学功能,将含有牛病毒性腹泻病毒 Erns基因的质粒pMD18-T-Erns经BamH I／HindⅢ双酶切,获得了Erns片段,再与杆状病毒转移载体pBlueBacHis2A连接,构建成重组质粒。将重组质粒pBlueBacHis2A-Erns与Bac-N-BlueTM DNA 共转染至sf9昆虫细胞中,获得了重组病毒,经噬斑筛选纯化,感染sf9昆虫细胞进行表达。SDS- PAGE分析结果表明,表达的目的蛋白大小约30 ku;Western-blotting检测表明,该蛋白具有良好的抗原性。     

鸭肠炎病毒ul47基因的原核表达及其抗血清中和活性的鉴定

提取鸭肠炎病毒(DEV)基因组DNA,采用PCR方法扩增获得了DEVul47基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组质粒pET-30a-ul47,并转化受体菌Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE分析。结果显示,ul47基因在大肠杆菌Rosetta中获得与预期大小相符的表达蛋白。利用Ni-NTA纯化表达蛋白,制备了兔抗DEV UL47蛋白的多克隆抗体,经琼脂双扩散测定,该抗血清效价为1∶16。间接免疫荧光试验和蚀斑减数中和试验结果显示,DEV UL47蛋白主要定位于感染细胞的细胞质和细胞膜,制备的兔抗DEV UL47多克隆抗体对DEV有中和活性。     

鹅细小病毒VP3基因疫苗与弱毒疫苗诱导小鼠免疫应答的比较

为阐明小鹅瘟基因疫苗与弱毒疫苗诱导细胞免疫和体液免疫的不同机理,将小鹅瘟VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按6μg/只基因枪轰击和100 μg/只肌肉注射,小鹅瘟弱毒疫苗按100 μL/只肌肉注射免疫BALB/c小鼠,同时以pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照.于免疫后第3、7、14、21、28、35、49、63、77、105 d采集抗凝血,用淋巴细胞转化试验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞的转化效果和CD4+、CD8+T淋巴细胞的动态变化,另外,在以上10个时间段以及免疫后第133、161、189、217 d分别采集凝血,用间接ELISA检测小鼠特异性IgG抗体水平.结果显示,pcDNA-GPv-VP3免疫小鼠的外周血T淋巴细胞对ConA刺激的反应,诱导的CD4+、CD8+T淋巴细胞免疫功能和血清IgG抗体水平在不同时间段都显著或极显著高于弱毒疫苗免疫组.3个免疫组小鼠都能诱导产生细胞免疫和体液免疫应答,并且基因疫苗诱导小鼠产生的细胞免疫和体液免疫应答比弱毒疫苗免疫组强.     

生产、销售不符合安全标准食品罪若干问题辨析

一、基本案情犯罪嫌疑人张某在未取得营业执照和食品流通许可证的情况下,长期经营托管“小饭桌”。后,张某经过培训取得食品安全管理员证书,继续提供托管学生的中午就餐服务。2019年某日,张某未严格按照《餐饮服务食品安全操作规范》进行操作,致使就餐的20余人感染肠炎沙门氏菌,出现呕吐、腹泻、发烧等症状,后经过治疗都已痊愈。     

鸭病毒性肠炎病毒荧光实时定量PCR检测方法的建立和应用

根据已发表的鸭病毒性肠炎病毒(DEV)基因保守序列设计TaqMan探针,建立了检测 DEV的荧光实时定量PCR方法,用该法对DEV在鸭胚成纤维细胞(DEF)中的增殖进行了检测。结果显示,DEV接种DEF 22 h后开始释放,第50 h病毒在细胞和上清中的含量增幅均为1×103 左右,病毒主要存在于细胞中,其含量是上清的1×102-1×103倍。     

斑节对虾感染肝胰腺细小病毒的调查

深圳市某虾场养殖的斑节对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｍｏｎｏｄｏｎ）出现异常死亡，经组织病理学剖检和电镜观察，证实了引起对虾死亡的原因为肝胰腺细小病毒（ＨｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｔｉｃＰａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）感染     

马病毒性动脉炎血清微量中和试验的研究及应用

参照美国的马病毒性动脉炎（ＥＶＡ）诊断技术和马动脉炎病毒（ＥＡＶ）标准种毒和阳性、阴性血清，确立了ＥＡＶ在ＲＫ－１３细胞上生长的最适条件，制备了标准ＥＡＶ高免血清建立了ＥＡＶ微量中和试验。通过对进出口的５５０头份马血清抗体检测，有１９头血清抗体滴度达１４～１１２８。用标准马传贫阳性血清进行交叉中和试验未发现交叉反应；用自制的琼扩抗原进行比较试验，有８头份为阳性，证实微量血清中和试验与琼扩试验的符合率为４２．１％。     

浅谈犬细小病毒

犬细小病毒是细小病毒科细小病毒属中的一个新成员，是美国Eugstre于1977年从患出血性肠炎的犬粪便中发现的。该病毒具有细小病毒属病毒的全部生物物理和生物化学特征，是目前已知动物病毒中属于最简单的一类单链线状DNA病毒。     

几种动物病毒的基因芯片检测技术

分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒 ,在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸 ,经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交 ,对杂交结果扫描检测 ,可同时对上述 7种动物传染病进行快速、准确的诊断 ,此方法敏感性高 ,特异性强 ,适合于大批动物高通量检疫。     

病毒性心肌炎累及传导系统致死1例报告

在临床上因心脏疾病致死者死因明确,死者家属一般不要求进行尸体解剖检验,但病毒性心肌炎(viralmyocarditis)累及传导系统(cardicconductionsystem,CCS)致死时,一般需借助病理学检验才能明确诊断。本文现介绍一例临床拟诊为病毒性心肌炎,在持续心电监护下死亡的案例。案例某女,23岁。因“胸闷、腹胀2天”于某年11月10日中午入院,诉2天前出现发热、头昏、呕吐,无腹泻。入院查体:T36.5℃,P120次/分,R22次/分,BP120/64mmHg,双肺叩诊清音,未闻及干、湿性罗音及胸膜摩擦音,心尖区无隆起,心界叩诊不大,心率120次/分,律齐,各瓣膜区未闻及病理性…