生物素标记大肠杆菌热敏感和热稳定毒素基因探针对猪鸡分离株的检测

用特异的大肠杆菌热敏感毒素（ＬＴ）和热稳定毒素（ＳＴ）标记的基因探针，以硝酸纤维素薄膜为载体，对从猪、鸡分离的大肠杆菌进行杂交。结果表明，在从猪分离的４８株大肠杆菌中，分离自黄痢的３５株、分离自白痢的２株，分离自ＳＰＦ堵粪便的６株均产ＬＴ和５Ｔ；分离自长期拉稀的育成小僵猪粪便的５株中，只有４株产ＬＴ和ＳＴ，１株既不产ＬＴ也不产ＳＴ。从鸡分离的２８株大肠杆菌中，分离自雏鸡的１４株ＬＴ阳性率为８６％，ＳＴ阳性率为９３％；分离自中鸡的９株ＬＴ和ＳＴ阳ａ性率均为１００％；分离自蛋鸡的５株ＬＴ阳性率为４０％，ＳＴ阳性率为６０％。     

肝破裂十天后继发弥散性血管内凝血死亡1例

肝破裂十天后继发弥散性血管内凝血死亡１例姜显仁（山东省龙口市公安局；龙口２６５７０１）肝损伤非常危险，多数是受伤后短时间即死亡，也有伤后经过一段时间死亡的。有人认为受伤后在７２／Ｊ’时内死亡的原因是出血性休克，是直接死因。４天后死亡的原因．为胆汁性或...     

静脉注射毒品致三尖瓣巨大细菌性赘生物死亡1例

1案例资料某女,25岁,2000年4月20日早上被人发现死于广州市某公园湖边。尸体检验低温保存2 d后解剖,尸长161cm,发育正常,营养差,体表无损伤。双眼睑结膜与皮肤粘膜无黄染,睑结膜与皮肤粘膜有散在针点状出血点。上肢的左右肘部有少量陈旧性注射针痕。双肺重1200g,气管与支气管腔     

河南省鸡埃希氏大肠杆菌血清分型的研究

本文对199O年3月至1992年5月从河南主要养鸡的郑州、焦作、漯河、新乡、洛阳、濮阳、安阳等8地市22个鸡场93个鸡大肠杆菌病发病鸡群分离,经细菌分离培养,生化试验证实为致病性埃希氏大肠杆菌的59株细菌进行了血清分型。结果以血清型O_2为主、有32株,占待检菌数的54.23％,次之为O_1型,有13株,占22.03％,O_(78)型仅6株,占10.16％,O_(74)型3株,占5.08％,未定型5株,占8.47％。按地市分,分离菌数较多的郑州、焦作、漯河、新乡4地市,与所检细菌分型基本一致,郑州市共分离20株,O_1、O_2、O_(78)三型分别为4株、11株、4株,各占20％,55％和20％;焦作市共分离19株,O_1、O_2和O_(74)型分别为4株、10株和3株,各占21.05％,52.63％和15.78％漯河分离8株,O_1、O_2两型分别为2株、6株,各占25％和75％; 新乡市4株,O_1、O_2和O_(78)三型分别为1株、2株和1株,各占25％、50％和25％。但濮阳、洛阳、安阳、周口4地市分离菌数较少,血清型分布差异较大。近几年,针对不同鸡群,以血清型为依据,有针对性制备的单价及多价大肠杆菌灭活苗在发病鸡场应用后,明显的降低了鸡大肠杆菌病发病率,减轻了发病程度,收到了较好的预防效果。     

牛源大肠杆菌毒力基因的检测及其对小鼠致病性的研究

为了解肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7黑龙江分离株的毒力及其接种小鼠后所引起的病理组织学变化,对该菌株进行了7种毒力基因的检测和毒力试验;在5周龄昆明小鼠饮水中加入萘啶酮酸预处理,腹腔注射大肠杆菌O157∶H7 1.0×1010 CFU,进行临床观察与病理组织学检查。结果显示,该菌株携带stx1、eaeA及hly基因,未检测出stx2、F4、k99、F17基因;小鼠接种该菌株后24h内全部死亡,半数致死量为7.9×107 CFU,最小致死量为5.0×106CFU。该分离株引起肺出血、肾水肿、肠壁变薄等病理变化。研究结果表明,EHEC O157∶H7黑龙江分离株毒力较强,可引发小鼠器官与肠道出现不同程度的病理变化;这一结果有助于了解大肠杆菌O157∶H7的致病机理和临床诊断。     

禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09裂解酶的表达及其活性分析

为研究禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09编码的裂解酶对宿主大肠杆菌的裂解作用,克隆表达了禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09的裂解酶,并检测了裂解酶的菌体内外裂解活性。利用PCR扩增了禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09裂解酶基因(Lysin基因),构建了重组表达质粒pET-32a(+)-LysJS09,测序验证后转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。在37℃IPTG浓度为1.0mmol/L诱导4h表达效果最好。重组融合蛋白LysJS09在BL21(DE3)中获得了高表达,在N端具有His标签,其分子质量约为38.9ku。重组融合蛋白以分泌型方式表达,经His-trap HP(GE)亲和层析柱纯化后获得的重组蛋白LysJS09的纯度为97%。裂解活性试验表明,该裂解酶单独使用和加入EDTA(0.1mol/L)均无体外酶活性;但菌体内裂解试验表明,表达的裂解酶对宿主菌具有一定的裂解作用。     

密码子优化前后AvBD2成熟肽基因的表达水平及其抑菌活性的比较

根据大肠杆菌的密码子偏好性,将编码AvBD2成熟肽的基因原片段Na-AvBD2优化为片段Op-AvBD2,将2条片段分别转化至大肠杆菌中重组表达,表达产物经GST树脂纯化后,对二者的表达水平和抗菌活性进行了比较。结果,融合蛋白rOp-AvBD2的表达量比rNa-AvBD2高2倍。而两者对大肠杆菌(CM-CC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、鸡白痢沙门氏菌(CVCC533)和粪肠球菌(ATCC29212)的抑菌活性及对鸡白痢沙门氏菌(CVCC533)和粪肠球菌(ATCC29212)菌体超微结构的破坏程度无显著差异。结果提示AvBD2在预防和治疗细菌感染中具有替代抗生素的潜在应用价值,而密码子优化将成为通过基因工程生产AvBDs的可行途径。