14株基因C型鸭甲肝病毒分离株的VP1基因变异及其编码蛋白的抗原表位分析

对14株分离自四川不同地区的基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1基因进行了PCR扩增、测序、序列比对分析以及抗原表位分析。结果显示,14株DHAV-C VP1基因核苷酸序列的同源性为92.2%～100%,推导氨基酸序列的同源性为85.8%～100%,与GenBank中的24株DHAV-C VP1基因的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为87.9%～99.3%和80.8%～100%。聚类分析显示,四川华阳地区分离的6株DHAV-C的VP1基因与黑龙江分离株Du/CH/LJS/090905同属一支,3株四川邛崃地区分离株与北京分离株C-GY及福建分离株FJ01同属一支,4株四川郫县分离株与1株四川邛崃分离株处于独立的小分支,它们与其他毒株之间存在一定的遗传距离。DHAV-C VP1蛋白由240个氨基酸组成,是由α螺旋、β折叠和无规则卷曲共同组成的混合型蛋白,VP1蛋白氨基酸序列的亲水性、抗原指数和表面可及性均较高,其中212～222位氨基酸区域的亲水性、抗原指数和表面可及性最高,可能是DHAV-C VP1蛋白上的B细胞表位优势区域,为DHAV-C表位疫苗的研究提供了理论依据。结果表明,四川分离株可能由于引种等原因从全国不同地区进入四川境内。     

抗人SMCY抗原胶体金试纸条的研制

目的建立一种快速检测SMCY抗原的方法。方法采用胶体金免疫层析技术双抗体夹心检测法,在金标垫上包被胶体金标记的SMCY兔多抗,制成胶体金试纸条,用于检测12份猪、牛、狗、鸡和小鼠等动物血清以及50份人血清。结果制作的胶体金试纸条检测人和常见动物血清具有明显的种属特异性,能够区分男女血清。结论该方法可尝试用于鉴别男女血清,并具有一定种属特异性,其为法医学快速鉴别人类样本性别提供了研究方向。     

认知脑电位检测在目击证人心理面孔重建中的应用

检验目击证人对犯罪嫌疑人面孔记忆的正确性是一项困难的工作。在证人面孔记忆的语义提取过程中,严格遵守完形原则,尽量减少影响证人记忆和再认的因素,把握细节,可以提高目击证人心理面孔重建的质量。认知脑电位检测法可以通过对记忆反应的脑电图成分、潜伏期、波幅等指标的测量,有效判断证人对列队辨认中的面孔是否存有记忆。本文对脑电位检测在目击证人心理面孔重建中的研究和应用进行综述,希望能为相关研究和实践提供参考。     

犯罪心理测试反测试及其对策

犯罪心理测试技术是在甄别嫌疑人过程中使用的测谎方法.但由于测试中的原理机制等问题,反测试手段可以以多种方式对测过程和测试结果进行干扰.加强犯罪心理测试中的监控并提高反测试识别技术,可以较好地应对测试中出现的反测试.反测试的出现本身就是逃避测试的表现,一旦发现被测人存在反测试行为或心理,则应重点对其进行调查.随着新技术的发展,脑电测试结合测谎范式进行检测有了一定的研究基础,为今后的测谎方式提供了更多的选择.     

猪巨细胞病毒gB基因优势抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立

扩增了猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因的优势抗原表位区,将构建成功的gB基因优势抗原表位区原核表达重组质粒(pET32a-gB)转化入表达菌Rosetta(DE3)中进行表达,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了一种检测PCMV抗体的间接ELISA方法,并对该间接ELISA检测方法进行了优化。结果显示,最佳抗原包被浓度为1.9μg/mL,最佳血清稀释度为1∶160,二抗最佳稀释度为1∶10 000;当样品D450nm≥0.26时判为阳性,当样品D450nm<0.215时判为阴性,介于两者之间时判为可疑。用该间接ELISA方法对138份PCMV阴性血清与240份PCMV阳性血清进行检测的结果显示,它的特异性为97.83%,敏感性为97.9%,变异系数均小于10%。用该ELISA方法和Western-blot对184份临床样品进行检测,结果二者的符合率为92.4%。结果表明,该间接ELISA方法简便快捷,具有良好的特异性、敏感性及重复性,适用于对PCMV抗体的大规模检测。     

靶向enJSRV env基因shRNA真核表达质粒的构建及其干扰效率的测定

为探讨绵羊内源性反转录病毒(enJSRV)在绵羊胚胎发育过程中的作用,利用脂质体将pEGFP-C1空载体转入绵羊绒毛膜滋养层细胞中,测定其转染效率。同时构建抑制enJSRV env基因的RNA干扰质粒,并将其转染到能稳定表达enJSRV env基因的绵羊绒毛膜滋养层细胞中,通过荧光定量PCR检测其干扰效率。结果显示,重组干扰质粒enJRSV-env-shRNA-1、enJRSV-env-shRNA-2、enJRSV-env-shRNA-3、enJRSV-env-shRNA-4、Negative-shRNA构建成功。Lipofectamine LTX脂质体体积为6.0μL,转染混合物体积为100μL,转染48h组的转染效率最高,为42.37%。与正常对照组细胞的enJSRV-env mRNA表达量相比,转染靶基因干扰质粒的各组绵羊绒毛膜滋养层细胞中enJSRV-env mRNA表达量分别下调了73.56%、66.82%、33.66%和18.16%。筛选出了一个干扰效率最高的RNA干扰质粒enJRSV-env-shR-NA-1,为以后包装慢病毒及进行动物试验来揭示enJSRV的生殖生物学作用奠定了坚实的基础。     

绵羊PRNP密码子136和154及171等位基因型的ARMS-PCR鉴定方法的建立

根据已获得的绵羊PRNP密码子136、154和171等位基因型的序列,设计并合成了针对各等位基因型的特异性引物,摸索3′末端引入的错配碱基种类及位置,优化扩增条件,以建立绵羊PRNP密码子136、154和171等位基因型的ARMS-PCR鉴定方法。应用ARMS-PCR分析已知PRNP等位基因型的绵羊血样,验证ARMS-PCR与PCR-SSCP鉴定PRNP等位基因型的符合率。经ARMS-PCR验证,已知的15种绵羊PRNP等位基因型的94份血样,两者的基因分型符合率达100%。研究结果显示,该ARMS-PCR分型法能够准确鉴定出绵羊PRNP密码子136、154和171的等位基因型,且具有简便、快速、廉价的优点,适合于绵羊PRNP等位基因型的普查。     

小脑原发性泡状棘球蚴病猝死1例

棘球蚴病也称包虫病,以细粒棘球蚴病为多见。泡状棘球蚴病较为少见,主要侵犯肝、肺组织,小脑原发性泡状棘球蚴病更为少见,引起猝死者罕见,现报道 1例。 1病例 　　某女, 46岁,汉族,生前为某建筑公司工人。青少年时生活在农场,有猫狗接触史,死亡前一天晚 10时许头晕、头痛、乏力并呕吐,前往医院门诊诊疗,在急诊科及眼科进行一般性检查,对症处理后,病人回家休息,第二天凌晨 7时死于家中（就诊后 9小时）,家属要求尸检,查明死亡原因。 2尸检 　　死后 9小时对尸体进行系统剖验。发育正常,营养良好,身长 150cm,体表及胸、…     

道路交通伤患者的智力和记忆研究

目的　研究道路交通伤对患者的智力和记忆的影响。　方法　采用韦氏成人智力量表中国版(WAIS -RC)和韦氏记忆测验量表 (WMS)对 178例患者进行研究。　结果　发现 178例患者的平均智商为71.8± 17.8。言语智商 78.3大于操作智商 67.9(t=13 ,p <0 .0 0 1)。 3 4 .8%的患者智商低于正常 ,4 5 .5 %处于边缘状态。患者的平均记忆商为 5 7.9± 11.7。 5 9.6%的记忆商低于 5 1,84 .3 %的患者记忆商低于正常。　结论　伴有颅脑损伤的道路交通伤患者多有程度不同的智力和记忆损害。