结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备

以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。     

H5亚型猪流感病毒HAl重组蛋白的制备及间接ELISA检测方法的建立

利用化学合成技术合成H5亚型猪流感病毒(SIV)的HA1基因,克隆到原核表达载体Pet-28a( ),构建了重组表达质粒pET28a-HA1/H5,用重组质粒转化表达菌株E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,以镍螯合层析纯化表达蛋白;通过优化反应条件,建立了基于HA1重组蛋白的H5亚型SIV抗体间接ELISA(iHAI-ELISA)检测方法.SDS-PAGE分析结果显示,在大肠杆菌中成功表达了分子质量为45ku的His-HA1融合蛋白,表达蛋白以包涵体形式存在;Western-blot分析结果显示,表达蛋白能被抗His单克隆抗体和抗H5亚型SIV阳性血清特异识别.优化iHAI-ELISA中HA1/H5重组蛋白的包被浓度为0.31 μg/mL,待检血清的最佳稀释度为1:100.特异性测定结果显示,iHAI-ELISA方法不与H1、H3、H9亚型猪流感病毒抗体以及猪圆环病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒阳性血清发生交叉反应;iHAI-ELISA方法与血凝抑制试验的符合率达93.5%.表明利用重组HA1蛋白建立的检测H5亚型SIV抗体的ELISA方法具有良好的特异性和敏感性.     

社会建设与新时期党的自身建设论述——基于社会主义和谐社会建设的视角

构建和谐社会一直是马克思主义的目标追求,也是我们党几代领导集体一直十分关注并致力于建设的课题.随着市场经济发展和社会转型加速,社会阶层发生了急剧分化,新旧体制和制度发生了碰撞,社会利益分配出现了不平衡,党的自身建设呈现了严重的缺陷,在构建和谐社会中加强党的建设显得尤为重要.     

中国石油测井重组改制后的发展与思考

自2002年中国石油测井行业实施专业化重组以来，中国石油测井有限公司一手抓新装备、新技术的研发、制造，一手抓测井工程技术服务，在经营业绩、市场、生产组织、仪器研发制造等方面取得了较大的成绩，但随着国际国内形势的不断变化、集团公司政策的调整，作为中国石油唯一专业化的测井公司，由于重组的不彻底，逐步暴露出许多影响持续发展的问题，体制和模式还有待进一步完善和探索。     

真龙腾飞 志甲天下——发展中的广西中烟工业公司

<正>广西中烟工业公司成立于2003年12月28日,下辖南宁、柳州两卷烟厂和甲天下辅料有限责任公司。2004年9月24日,广西中烟工业公司将南宁、柳州两卷烟厂联合重组成广西卷烟总厂,与广西中烟工业公司实行"一套机构,两块牌子"的一体化运作。     

禽呼肠孤病毒99G株σB编码基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

采用RT-PCR方法扩增禽呼肠孤病毒(ARV)99G株σB编码基因,序列分析表明,99G株σB编码基因与其他禽呼肠孤病毒的同源性为90%～99 9%,而与我国番鸭呼肠孤病毒S12株的同源性仅有60%;用BarnH Ⅰ和Xho Ⅰ酶将σB编码基因切下并克隆到表达载体pGEX-6p-1中,构建了重组表达质粒pGEX-σB;鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,σB基因在大肠杆菌中得到了高效表达,表达的融合蛋白占总蛋白的41.46%,融合蛋白的分子质量为66 ku,主要以包涵体形式存在;Western-blot结果显示,该融合蛋白能与抗ARV阳性血清发生特异性反应,表明重组蛋白具有良好的反应原性,可用于禽呼肠孤病毒病诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制.     

侧脑室注射IL-6对大鼠脑电活动的影响及柴胡皂苷a的干预作用

目的:研究IL-6对大鼠脑电活动的影响,以及柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)的干预作用。方法:采用侧脑室注射IL-6观察24 h内对大鼠脑电活动的影响,通过对脑电图描记,计算尖波个数以及高频(100 Hz)脑电的功率和波幅的变化,并研究SSa的干预作用。结果:IL-6可诱发大鼠脑电痫性活动,使大鼠高频(100 Hz)脑电波的功率和波幅的增大(P<0.05);SSa高剂量组2,4,8,12 h时能显著抑制大鼠脑电中尖波个数(P<0.05),抑制脑电的功率(4,8,12 h时)和波幅(1,4,8,12 h时)的增大(P<0.05)。结论:SSa高剂量可以抑制IL-6诱发大鼠脑电的痫性放电。     

我们可以逆转年龄吗

身份证上的年龄无法改变,那我们身体的实际年龄呢,有可能逆转吗？什么叫做衰老？看看那些老年人就知道了。同样70岁的人,有些老年人步履轻快,精神饱满;有些老年人则步履蹒跚,弯腰困难;有的已经陷于轮椅,有些甚至卧床不起。仅仅靠年龄,实在不能定义身体的状态。媒体曾经报导,年逾90的英国老先生库帕瞒着妻子多次去跑半程马拉松,而且每次都能坚持下来。美国的健身教父拉兰内年过90,仍然肌肉充实,体能充沛。     

戊戌变法新论

政治改革涉及权力关系的重组,最为艰难,初试未捷无须深责.植入性改革须进行内生性转换才能取得成功,历史的深刻教训,值得认真汲取.戊戌变法的失败不等于改良路线的失败,从社会成本看,和平改革是最经济的变革方式.     

H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性

根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)核蛋白(NP)基因序列设计引物,通过PCR扩增出A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)毒株的NP基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,将筛选的阳性重组转座载体pFastBacGP67B-NP转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,构建了杆状病毒表达载体,获得了重组转座子(rBacmid-NP),在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBv-NP).SDS-PAGE分析、Westernblotting检测、免疫组化分析和ELISA试验结果表明,分子质量约为54 ku的重组核蛋白得到了高效表达,该表达蛋白具有良好的生物学活性.