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52.
53.
根据GenBank中登录的犬白介素-18(IL-18)基因序列,设计了1对特异性引物.将北极狐外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导,用TRIzol裂解,提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增狐狸IL-18基因,连接pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞,获得阳性重组质粒.核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长590 bp,含582 bp的开放阅读框,编码193个氨基酸,与已知犬IL-18序列的同源性高达98.7%,氨基酸同源性为96.4%. 相似文献
54.
体外实验方法是揭示药物作用实质的重要方法之一,但对于中药来说,由于其理化因素的复杂性及特异性,体外实验一直是难以解决的问题。20世纪80年代中期,日本学者IwamaH等[1]在对汉方的研究体系进行探讨的过程中,用动物血清进行汉方制剂的药理实验,提出了“血清药理学方法”。它是指将中药或复方经口给动物灌服一定时间后采集动物血液,分离血清,用此含药物成分的血清进行体外实验的一种实验方法。这一方法实现了体外与体内实验的结合,其实验结果与体内实验结果有较好的一致性,它不仅反映药物中可吸收部位的直接作用,且能反映药物成分在机体作用下形成的代谢产物和药物诱生的机体内源性物质的间接效应。该方法是目前中药药理研究中热点,研究层面可借用现代医学手段,从器官深入到细胞、亚细胞、基因、基因产物、受体和酶活性等水平揭示药理作用机制,使现代科学技术与传统医学有一个切实可行的结合点,从而大大地推动了中医药现代化进程。但是,由于该方法诞生时间短,在我国仅起步于20世纪90年代,尚处于探索阶段,目前在实际应用中还存在不少问题,困扰着实验设计和研究,故笔者就有关几个问题思考如下,以供商榷。 相似文献
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为探讨硝基苯对小鼠肾的毒性作用,采用灌胃法对试验小鼠用硝基苯进行染毒,染毒剂量分别为26、52、105 mg/kg,每天染毒1次,共30 d.于末次染毒后第2 d将小鼠脱颈处死,立即取出肾通过相应处理用于抗氧化指标检测及显微和超微结构的观察.结果,染毒小鼠主要表现为近曲小管上皮细胞不同程度水样变性,线粒体肿胀,脊断裂;内质网脱核糖颗粒;细胞核发生形变;肾小球血管内皮细胞肿胀,血管扩张;随着染毒剂量的加大,肾和血清中MDA含量逐渐升高,SOD和GSH-Px酶活性不断降低,与对照组比较,均差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01).结果表明,硝基苯能够诱发小鼠肾细胞发生氧化胁迫,并诱导细胞凋亡的发生. 相似文献
56.
犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
为快速诊断犬恶丝虫病,建立了犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法,并与阻断试验、交叉反应试验、重复性试验、琼脂扩散试验和平行对照试验进行了比较.结果显示,制备的犬恶丝虫虫体粗制抗原与犬钩虫、犬弓首蛔虫和犬蠕形螨感染犬的阳性血清无交叉反应,检出犬恶丝虫阳性血清的最高抗体效价为11024,重复性好;建立的犬恶丝虫病dot-ELISA诊断方法的灵敏度比琼脂扩散试验和美国IDEXX实验室制备的犬恶丝虫病诊断试剂盒分别高2048倍和48倍. 相似文献
57.
采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a( )中,测序验证后转化入表达宿主茵RosettaTM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50000的重组融合蛋白,在浓度为0.6 mmol/L的IPTG诱导4 h的情况下表达效果最好.表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白.经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV-GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性. 相似文献
58.
<正>随着国家新医改方案的出台,以及医疗卫生改革的进一步深入和医疗服务市场开放程度的进一步加大,医疗机构将面临日益激烈的竞争压力,医疗服务的竞争也不再局限于技术和质量。医院的生存与发展,在很大程度上取决于患者对其所受服务的满意程 相似文献
59.
刑事案件中心理测试出现假阳性错误后果非常严重。本文从被测人、测试人员、测试方法、系统误差等方面分析了假阳性出现的原因,认为进行充分的测前谈话、使用科学的测试方法、进行认真的逻辑分析等策略可以有效减少假阳性。 相似文献
60.
<正>今年50岁的马先生,近半年来开始出现小便不畅、淋漓不尽的感觉。明明尿憋得厉害,但尿起来却很费劲。马先生怀疑是由于自己长期喝酒引起了前列腺肥大,于是到厂医务室开了些药。服药一段时间,症状并无好转,并且体重下降明显。马先生又去了医院的泌尿外科。医生给他做了检查,尿常规为尿糖阳性,血糖监测,被确诊为糖尿病。他的排尿问题,在医学上叫做"糖尿病神经源性膀胱病"。"糖尿病神经源性膀胱病"是由于长期高血糖损害了支配膀胱和尿道的植物神经,致使膀胱逼尿肌或尿道括约肌发生功能障碍,从而引起排尿困难。它是糖尿病常见的神经并发症之一,由于其临床表现与前列腺肥大颇为相似,很容易被误诊。一提到糖尿病,人们脑子里马上就会想到"三多一少"(多饮、 相似文献