用反转录-聚合酶链反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲型标准毒株（ＡＴＣＣＶＲ－２３３２）的ＯＲＦ６及部分ＯＲＦ７的序列,设计合成了一对引物２６３７４ＰＳ／２６３７５ＰＲ,用反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术对６株ＰＲＲＳＶ北京分离株进行了检测。结果该引物对６株病毒均能扩增出与预期大小相符的ＲＴＰＣＲ产物,并与ＡＴＣＣＶＲ２３３２株扩增产物的大小相当,而欧洲型标准毒株（ＬＶ株）未获扩增片段。进一步用限制性内切酶进行酶切分析,发现这６株病毒及ＡＴＣＣＶＲ－２３３２的ＰＣＲ产物皆出现相同的限制性酶切图谱,证实６株病毒均为ＰＲＲＳＶ。     

堆型艾美耳球虫早熟系与母株11种抗原基因表达水平的比较分析

应用荧光定量qRT-PCR技术比较堆型艾美耳球虫早熟系及其母株孢子化卵囊的11种抗原基因的表达情况。提取堆型艾美耳球虫早熟系及其母株孢子化卵囊的总RNA,反转录成cDNA,在GenBank中查找堆型艾美耳球虫11种抗原基因并设计相应引物,进行荧光定量qRT-PCR扩增,用熔解曲线、扩增曲线和循环阈值(Ct值)的变化等比较分析堆型艾美耳球虫早熟系及其母株的不同基因的扩增特异性和相对表达量。结果显示,11种抗原基因得到表达;与疫苗母株相比,早熟致弱的疫苗株大部分抗原基因的表达量下降,其中HSP70基因表达量下降明显。结果表明,早熟系毒力的减弱可能与某些抗原基因表达量下降有关。     

甲基苯丙胺稀土荧光试纸条的研制

目的建立一种检测尿液中甲基苯丙胺物质的高灵敏度检测方法。方法以稀土荧光纳米颗粒为标记物,采用反应杯+试纸条的反应模式,建立了免疫层析法,用于尿液中甲基苯丙胺的定性检测。结果用所制备的试纸条检测尿液中的甲基苯丙胺,肉眼和仪器判读的敏性均为100ppb,与吗啡、亚甲二氧基苯丙胺、氯胺酮、苯丙酮、可卡因等无交叉反应;将制备的反应杯和试纸条置于37℃7d,试纸条的性能没有明显降低。结论本研究建立的甲基苯丙胺免疫层析法用于定性检测尿液中的甲基苯丙胺,具有较高的灵敏性和较高的应用价值。     

数码相机在紫外荧光照相中的应用

紫外荧光照相是利用紫外线作为激发光源 ,激发物体在可见光区发射荧光 (有时也在长波紫外区和红外区发射荧光 ) ,再用照相的方法记录物体在紫外光激发下发射的可见荧光。实际工作中 ,有些在普通光线下看不清或看不见的痕迹物证 ,运用紫外荧光照相方法可以把它们拍照下来 ,此外 ,不同质的物质 ,在一定强度和波长的光源的激发下 ,会产生不同强度或不同色彩的荧光 ,根据荧光特征就可以检验物质的真伪或异同。紫外荧光照相是刑事照相中重要的技术手段 ,数码照相机在刑事照相中的大量使用 ,使原本较复杂的紫外荧光照相的操作变得简单了 ,运用数码…     

图说宝岛

3D艺术造街彩绘效果真 台南市海安路艺术造街出现第一个3D地面创作，艺术家陈彦旭利用各种不同颜色的荧光胶带和视觉错差的手法，在街头创造出各式立体场景。     

致羔羊脑炎粪肠球菌PCR检测方法的建立和应用

根据肠球菌的保守tuf基因设计引物,以致羔羊脑炎粪肠球菌基因组DNA为模板,扩增出了与设计大小相一致的112 bp的基因片段,成功地建立了检测致羔羊脑炎肠球菌的PCR方法.确立的PCR反应最佳条件为:复性温度55℃,Mg2+浓度2.5 μmol/L,最佳反应模式为95℃5 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃30 S,35个循环;最后72℃延伸10 min,于4℃结束反应.该方法能检测DNA的最小量为10 fg.应用该方法对分离的致羔羊脑炎粪肠球茵、由肠球菌导致发病或死亡羔羊脏器以及人工感染死亡小鼠的主要脏器进行扩增,均能得到特异性的DNA条带;对其他7种病原菌,马腺疫链球菌C群、G群链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、羊源李氏杆菌、绵羊布氏杆菌、绵羊肺炎支原体不能扩增出特异的DNA条带.     

PRRSV和PCV-2以及PRV多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白基因、猪圆环病毒2型(PCV-2)rep蛋白基因和猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的核苷酸序列分别设计了3对特异性引物,成功建立了同时检测PRRSV、PCV-2、PRV的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR方法.敏感性试验结果显示,PRRSV、PCV-2的敏感性可达250拷贝/μL,PRV的敏感性可达500拷贝/μL.表明,该方法具有较好的特异性、重复性和敏感性,可以用于PRRSV、PCV-2和PRV的快速检测.     

乳酸杆菌活的非可培养状态诱导条件的筛选与荧光观察

依据逆向调整原则,设计了4套诱导乳酸杆菌进入活的非可培养(VBNC)状态的方案,同时应用LIVE/DEAD细胞染色试剂,对进入该状态的细菌进行了荧光观察,并尝试用Tween-80对VBNC状态细菌进行了复苏.结果显示,MRS液体培养基,pH 2.0～3.0,4℃,兼性厌氧培养和不含半胱氨酸的MRS液体培养基,PH 2.0～3.0,4℃,兼性厌氧培养均可使3株试验菌体在短期内进入VBNC状态,并且能较长时间维持这一状态;3株细菌菌体均发生萎缩、弯曲,且彼此相连,原本单在的杆菌变成了链杆菌;随着诱导时间的延长,菌体的交联程度明显增加,出现众多红绿交替的长链杆菌;Tween-80可使VBNC状态细菌恢复为可培养状态并实现复苏,而复苏后的细菌重新具备原菌的形态和生化特征.表明,乳酸杆菌具有VBNC状态,并且在此状态下呈现与正常菌体不同的形态特征.     

多波段光源及其应用

在刑事照相工作中，多波段光源在拍摄现场痕迹物证及潜在指纹等方面效果颇佳。     

荧光STR复合扩增试剂盒的评估过程探索

STR复合扩增检验技术是目前法医DNA检验技术中最重要也是最常用的技术种类之一，随着荧光检测技术和毛细管电泳技术的发展，特别是DNA数据库建设中丰要采用STR复合扩增技术进行基因分型，大大拓展了STR复合扩增检验应用范围。与此同时，STR复合扩增检验试剂成为影响检验质量的重要因素，关系到样本检验分型结果，而分型数据是为法庭提供证据的直接依据，