小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达

参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRV H基因,将其克隆至pUC18-T质粒中,转化E.coliJM109感受态细胞,构建并选择PPRV H基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正确,将其克隆至pBAD/Thio-TOPO载体中,转化E.coliTOP10感受态细胞,核苷酸序列分析证实,成功构建了PPRV H基因重组表达载体。经不同浓度L-阿拉伯糖诱导,可稳定、高效地表达PPRV H抗原。SDS-PAGE分析结果表明,用终浓度为0.2 g/L的L-阿拉伯糖诱导5 h的表达量最高,表达蛋白为分子质量约83 ku的融合蛋白;经薄层扫描分析,其表达产量约占菌体总蛋白的10%。Western-blotting检测表明,诱导的蛋白能与PPRV H蛋白单抗发生特异性反应,说明表达的融合蛋白中含有PPRV H糖蛋白抗原。     

从信息不对称角度分析基因工程对健康险市场的冲击

人类基因组计划的完成使基因检测技术的应用成为可能与现实。本文从收益成本角度来衡量不同情况下的保险人、投保人采用昂贵的基因检测技术获取个人的基因信息的行为选择,并利用博弈分析双方的利益分配。得出信息优势一方都可能利用其信息优势获利或采取不利于对方的行动,侵占对方利益的结论。因此,基因检测技术的应用会打破保险市场的原有均衡,在基因技术成熟应用以前,各国有必要对保险公司的行为予以约束,采取相应的立法措施对基因检测技术的使用和应用加以限制,保护相关人的合法利益,维护保险人存在的基础。     

血斑酸性磷酸酶、腺苷激酶、腺苷脱氨酶和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶同时电泳分型

本文作者介绍了利用薄层淀粉凝胶电泳对血斑酸性磷酸酶(EAP)、腺苷激酶(AK)、腺苷脱氨酶(ADA)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGD)同时电泳分型的方法,同时报道了这四种酶在北京地区汉族人中的表型分布和基因频率.     

生物遗传资源保护与事先知情同意制度

随着生物技术的进步,生物遗传资源已成为一国重要的战略资源,如何加强对它的保护是当前争论的焦点问题,它直接涉及到WTO下一轮谈判中TRIPs协议的修订。笔者试从国际环境法的角度出发,解析《生物多样性公约》的“事先知情同意”制度,并通一定的制度设计与TRIPs协议的专利制度相联系,希望借助于TRIPs协议对基因专利的申请施以更严格的控制,从而保护各个国家对本国的基因资源所拥有的主权权力。     

我国新城疫强毒株F糖蛋白基因的体外合成及其抗原性研究

将我国新城疫强毒株Ｆ４８Ｅ９在ＳＰＦ鸡胚增殖后提取ＲＮＡ，用自行设计的一对寡聚核苷酸引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，合成了Ｆ糖蛋白基因片段。将此片段与ｐＵＣ１９质粒重组，转化大肠杆菌ＪＭ１０９，从阳性克隆中提取重组质粒，再用ＰＣＲ法扩增，获得了同样大小的ＤＮＡ片段。经用特异性抗体探针检测，证明该片段在大肠杆菌中的表达产物具有良好的抗原性     

实验性急性心肌梗死心肌K~+/Na~+、Mg~(2+)/Ca/~(2+)Zn~(2+)/Cu~(2+)比值变化的研究

用结扎家免左冠状动脉建立急性心肌梗死区的模型,探讨梗死区心肌中K~+/Na~+、Mg~(2+)/Ca/~(2+)、Zn~(2+)/Cu~(2+)比值的变化与急性心肌梗死发生时间的规律。结果提示:(1)K~+/Na~+、Mg~(2+)/Ca/~(2+)比值随心肌缺血时间延长呈进行性下降。K~+/Na~+比值在60min、120min实验组与对照组比较有显著性差异(P<0.01);(2)Zn~(2+)/Cu~(2+)比值各实验组与对照组比较无显著性差异(P>0.05),但实验组随缺血时间延长,Zn~(2+)/Cu~(2+)比值呈下降趋势,120min组比15min、30min、60min组降低约1/2(PC<0.01)。测定心肌梗死区K~+/Na~+、Mg~(2+)/Ca/~(2+)比值可以作为显示和判定急性心肌梗死的重要指标。     

基因科技的法律问题研究(2)

第三章人类基因的法律地位凡是与生命现象有关的事物都可能被纳入基因科技影响的范围.除了目前一般人熟知的基因 复制与基因医疗、制药以外,农林渔牧生产、生态保育、公共卫生、人类生理信息的识别判 断等等,都与基因科技息息相关.亲子身份关系、医患关系、就业的基因歧视、基因证据、 DNA数据库、基因样本采集、强制基因筛检、基因研究免责、基因隐私、基因信息所有权、 基因物质支配权、智能财产权、基因科技商品化带来的商品责任等等问题,日后势必一一浮 现为社会论争的议题.笔者在此仅就人类基因的法律地位、基因的知识产权法律保护等几个法律问题作初步探讨.     

中国第二代互联网--CERNET2

10年前,中国教育和科研计算机网(CERNET)建成了我国第一个全国主干网,拉开了中国互联网发展的序幕.10年后,CERNET2试验网作为我国第一个下一代互联网主干网,2004年3月19日在北京正式开通并提供服务,再次吹响了中国下一代互联网建设的号角.本文从CERNET2的概念、特点、发展计划、应用领域等方面全方位进行了阐述.     

过氧化氢诱导PC12细胞损伤的模型的建立

目的建立不同浓度的H2O2诱导PC12细胞凋亡的模型,研究组织缺血、自由基损伤的机制。方法分别以不同浓度的H2O2处理PC12细胞12h,用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术检测处理后细胞的生长活力和凋亡情况。结果以0浓度组作为对照,100、300nmol/L的H2O2处理的PC12细胞生存率分别为(76±7.69)%、(39±7.08)%(P<0.01);0、100、300nmol/L的H2O2处理的PC12细胞后凋亡率分别为2.47%、6.00%和55.54%。结论建立了以0、100、300nmol/L的H2O2诱导PC12细胞凋亡的模型。     

一种畸生的哲学——剖析“基因决定论”产生的根源

随着科学技术的迅猛发展,基因的重要作用日益呈现在人们面前。可是这种作用却被有的人人为地夸大了,形成了所谓的“基因决定论”。其实,这种观点在人类漫长的历史中就已经存在了,它的产生有其复杂的根源。