牛疱疹病毒Ⅰ型gB基因的原核表达及产物的抗原性分析

采用PCR方法,以牛疱疹病毒Ⅰ型基因组DNA为模板扩增gB基因,克隆至pGEM-T载体。将以克隆质粒pGEM-T-gB为模板扩增的gBⅠ、gBⅡ和gBⅢ基因片段分别连接至原核表达载体pET32a。获得的重组质粒分别转化感受态细胞BL21(DE3),在IPTG诱导下表达。经SDS-PAGE鉴定,gBⅠ、gBⅡ和gBⅢ基因片段在大肠埃希氏菌BL21(DE3)中以融合蛋白形式获得了表达。以磁化组氨酸蛋白纯化系统对融合蛋白纯化后,Western-blotting和ELISA分析结果表明,这些融合蛋白均与BHV-1标准阳性血清反应,可作为抗原用于牛传染性鼻气管炎ELISA检测方法的建立。     

口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因的原核表达及其产物的活性检测

利用分别带有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的引物扩增出FMDV 3ABC基因,将其克隆到pMD18-T载体。经BamHⅠ和SalⅠ酶消化后,克隆到表达载体pGEX-6p-1上,构建重组质粒pGEX-3ABC。将该重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)pLysS,经终浓度1 mmol/L的IPTG诱导,获得约70 ku的融合蛋白GST-3ABC。Western-blotting结果显示,表达的融合蛋白GST-3ABC可以与感染FMDV的牛血清发生免疫反应。以纯化的GST-3ABC蛋白为抗原的间接ELISA检测结果与以VP2蛋白为抗原的间接ELISA检测结果相比较,表明,融合蛋白GST-3ABC可以用于鉴别感染FMDV和疫苗免疫的牛血清。     

Media Freedom and Political Debate in the Digital Era

This article examines the impact of online expression on theories of media freedom. While media freedom has generally been justified instrumentally, the opportunities for expression via the Internet may require greater emphasis on the interests of the individual speaker. Despite this development, this article shows how a small number of speakers will still command a much wider audience and have greater influence over political debate. For such speakers the approach to media freedom devised in the mass media era will remain applicable.     

尤凯帕病毒HN基因的克隆与原核表达

通过提取尤凯帕病毒 (Yucaipavirus ,PMV 2 )的RNA ,进行RT PCR ,获得了HN基因。序列分析结果表明 ,HN基因的ORF全长为 174 3nt,编码一由 5 80个氨基酸组成的蛋白。HN基因经双酶切后连接入 pTYB 2原核表达载体。酶切鉴定筛选阳性克隆 ,用IPTG诱导表达 ,经SDS PAGE电泳和Western blotting检测均可见一约 110ku的目的条带 ,说明大肠埃希氏菌表达的HN蛋白能与抗PMV 2阳性血清特异性结合。     

中国有权刑法司法解释模式评判

依据中国相关法律的规定 ,中国有权刑法司法解释采取“二元一级抽象式”的解释模式。此模式将检察机关设定为刑法司法解释主体具有不合理性 ;解释级别与人员的设定具有不合理性 ;解释的抽象方式不具有合理性。作为改变中国有权刑法解释的方案 ,建立一元 (法院 )个体 (法官 )判决 (判决理由的形式 )式的有权刑法解释模式是合理的。这种改变又需要相应的制度支撑。因此 ,中国有权刑法司法解释模式的改变 ,依赖于中国司法体制的改革 ,它是中国司法体制改革的一环。     

民间组织“双重管理”体制的运行效用及问题分析

通常,民间组织的双重管理体制被认为是阻碍民间组织发展的制度障碍;但是,在当时社会背景之下,双重管理或许是政策制定者最有效率的制度选择。本文从政策制定者角度出发,分析双重体制在运行中的效用及问题。笔者认为,双重体制已经不能满足当前民间组织的制度需求,并从确定改革目标、健全监管机制等方面提出改革双重体制的对策建议。     

《红楼梦》隐喻的功能及表现形式

隐喻作为一种表现手法,传统的修辞学把它看成一种能使语言形象生动、栩栩如生的修辞手法。然而隐喻不仅具有语言简洁、形象生动的功能,还具有各种特殊功能。束定芳在《隐喻学研究中》把隐喻的功能分为修辞功能、语言学功能、诗歌功能、认知功能、社会功能和文字游戏功能。通过对《红楼梦》作品中隐喻表现的分析,归纳了《红楼梦》的隐喻功能并对其表现形式进行分类。     

语篇衔接之于诗歌主题的表达——对乔治·赫伯特诗作《美德》的文体学分析(英文)

George Herbert’s poem,Virtue,conveys to us a theme that all material things in this world,however shiny they are on the outside,are flashy on the inside;only the spiritual sublime virtues that human beings possess remain fresh forever.Linguistically speaking,the discourse cohesion of this poem contributes to the expression of the theme of it.Based on the stylistic analysis,this paper argues that the expression of the poetic theme is realized through the overall layout of cohesion of this poem,manifested in rhyme scheme,lexicon,structure and logic.     

农民工社会保障滞后分析以及法律对策

当前,我国的农民工社会保障制度的建设严重滞后。造成这种现状的原因是多方面的,正视问题的存在并积极探索化解之道势在必行。建立健全农民工社会保障制度必须标本兼治,既要从根本上革新现有的城乡二元化的社会保障体系,又要采取具体的针对性举措。     

法经济学视阈下的“小产权房”成因分析及解决进路

“小产权房”目前已成为社会的热点问题,其折射的社会矛盾和利益冲突是制度性的和深层次的,其作为一种新生事物,有它合理存在的原因.二元土地所有制是产生“小产权房”问题的制度根源,法律活动要以资源的有效配置和合理利用为目的,大量“小产权房”的出现表明外部利润的存在.通过完善集体土地所有权制度、明确定位集体建设用地制度功能、健...