用酶标抗人精液单克隆抗体A_(10)C_6建立ELISA斑点法快速鉴定人精(液)斑

作者用过氧化物酶标记自己研制的抗人精液单克隆抗体A10C6建立了简便快速鉴定人精斑的ELISA斑点法，直接通过酶标抗体上的酶催化底物显示颜色变化，来判断结果，阳性呈灰色斑点，阴性为无色。其结果只对人精斑浸出液显示阳性斑点，对人的其他组织器官及体液均呈阴性，对动物精斑也无交叉反应，精斑浸出液稀释到1：3200倍仍呈阳性结果。     

直接法单克隆抗体酶联免疫吸附试验和常规酶联免疫吸附试验诊断耕牛日本血吸虫病的比较

比较了直接法单克隆抗体酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和常规酶联免疫吸附试验诊断耕牛日本血吸虫病方面的差异，实验结果表明，直接法ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对实验感染耕牛的阳性检出率为１００％（３２／３２），对安徽省自然感染耕牛（粪孵阳性）的阳性检出率为９３．９０％（４１８／４４５），对健康耕牛的阴性符合率为９８．５０％（６６／６７）；而常规ＥＬＩＳＡ对实验感染耕牛的阳性检出率为９５．３５％（４１／４３），对安徽省同一地区的自然感染耕牛的阳性检出率为９０．８２％（１８８／２０７），对健康耕牛的阴性符合率为８６．２７％（８８／１０２）。提示，直接法ＭｏＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ不仅具有操作简便、反应快速、成本低廉等优点，而且在阳性检出率和阴性符合率方面均优于常规ＥＬＩＳＡ。     

多种微量元素缺乏症防治制剂对肉仔鸡血液谷胱甘肽过氧化物酶活力的影响

用自制的多种微量元素防治制剂的 2种剂型 (多微控释制剂和多微散剂 )对肉仔鸡进行微量元素缺乏症防治试验 ,分别于试验第 15、30和 4 5d采集静脉血液进行谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)活力分析。结果表明 ,2种制剂均可以显著提高 (P <0 .0 5 )肉仔鸡血液中GSH Px活力 ,增强肉仔鸡的抗氧化能力 ;多微定量控释制剂的效果优于散剂     

迟发性外伤性脑内血肿脑组织GFAP、S-100和NSE的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ABC法和S－P法，对6例伤后1．5天至2年发生的迟发性外伤性脑内血肿（DTICH）脑组织标本进行神经胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、S－100蛋白（S－100）和神经元细胞内特异性烯醇化酶（NSE）变化和应用价值的研究。尸检和组织学检查发现有脑挫伤等病变。6例DTICH脑组织挫伤及周围区均有明显的GFAP、S－100阳性的细胞变化，细胞数目增多，胞体肥大、增生，免疫组化反应产物增多、深染；神经元细胞NSE免疫组化染色均呈阴性改变。结果表明：6例DTICH脑组织中GFAP、S－100的NSE的免疫组织化学变化是有一定时间间隔的外伤性陈旧性改变，在DTICH的病理诊断上具有重要价值，可作为DTICH法医学鉴定的一个辅助手段。     

确定毒品种类需检测的毒品簇

确定嫌疑人是否吸毒及吸食毒品的种类是打击毒品违法犯罪必不可少的程序。毒品检验是打击毒品犯罪的一个有力工具。可用于毒品检验的方法很多,检测的物质也不尽相同。本文着重介绍用酶联放大免疫分析法所能检测的毒品簇及具体检测物质。     

鸭东方次睾吸虫病间接ELISA诊断方法的建立

为评价候选蛋白烯醇化酶(Enolase)作为东方次睾吸虫ELISA诊断抗原的潜力,重组表达东方次睾吸虫烯醇化酶基因,以纯化好的重组蛋白为抗原,优化各检测条件,建立了鸭东方次睾吸虫病间接ELISA诊断方法并用该方法检测临床样品.结果 显示,通过棋盘滴定法,确定了抗原的最佳包被质量浓度为2μg/mL和血清最佳稀释度为1∶1...     

大熊猫IgG Fc HRP酶标二抗的制备

为获得辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗大熊猫IgG抗体,本研究利用重组大肠杆菌表达技术对大熊猫IgG Fc片段进行了表达,获得重组蛋白后进行了小鼠免疫,抗体特异性检测,并进行了多克隆抗体的HRP标记.结果显示,在37℃、IPTG浓度为0.5mmol/L、诱导5h的条件下,可获得分子质量约为88 ku的目的蛋白;将重组蛋...     

重组酶聚合酶扩增技术结合胶体金试纸条检测新城疫病毒方法的建立及应用

本研究旨在根据鸡新城疫病毒（Newcastle disease virus）F基因序列,利用Oligo 7设计RPA引物以及nfo探针,建立快速检测新城疫病毒的结合胶体金试纸条的RPA检测方法。在试验中,对探针浓度、引物浓度、反应温度、反应时间进行了优化;并将检测结果与荧光RT-PCR商品化试剂盒的检测结果进行了比较。结果显示,本方法采用50μL体系,37℃20 min即可对新城疫病毒F基因进行快速检测。该方法灵敏度高,特异性强,重复性好,检测结果与荧光RT-PCR商品化检测试剂盒检测结果一致,为养殖场检测新城疫病毒提供了一种简便可靠的检测方法。     

病毒性出血败血症病毒实时荧光RT-RPA恒温检测方法的建立

为建立一种简单、快速的病毒性出血败血症病毒(VHSV)检测方法,本研究通过比较分析VHSV N基因的保守序列,设计了多对引物和一条探针。经过筛选优化,建立了实时荧光RT-RPA检测方法。该方法在39℃恒温反应20 min即可快速、特异性地检测出VHSV,与其他水生动物病毒不发生交叉反应,该方法检测限为1.83×10^3PFU/mL,利用本研究方法对30份鲑鳟鱼临床样品以及9份鱼类疫病病原样品进行检测,检测结果与荧光定量PCR方法结果一致。上述结果表明,本研究建立的检测方法操作简单,反应灵敏,结果可靠,仪器依赖性低,适用于现场对VHSV快速检测。     

DNase-Ⅰ纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA

目的研究脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA的方法在法医学中的应用。方法收集79份性犯罪案件混合斑检材,分别用DNase-I纯化结合碱性裂解法和差异裂解法提取精子DNA,采用STR荧光标记复合扩增体系进行16个STR基因座分型,并比较检验结果。结果应用DNase-I纯化结合碱性裂解法提取精子DNA,64例检材分型成功;应用差异裂解法提取精子DNA,57例检材分型成功;两种方法比较结果存在显著性差异(P=0.039),DNase-1纯化结合碱性裂解法提取精子DNA的STR分型成功率更高,成本低廉。结论DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA可提高检验成功率,操作简便,快速,易于自动化,适于法医学个体识别鉴定。