磷酸钙介导马立克氏病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞

提取马立克氏病病毒（ＭＤＶ）Ｒｉｓｐｅｎｓｅ株感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）总ＤＮＡ，运用磷酸钙－ＤＮＡ沉淀转染ＣＥＦ，可以成功地得到ＭＤＶ的病变空斑。用每份沉淀含２０μｇ的ＭＤＶ和细胞总ＤＮＡ转染次代ＣＥＦ，其转染形成空斑的数量为４～２２１个，转染频率约为１０－６～１０－５；将磷酸钙－ＤＮＡ沉淀加入到ＣＥＦ中，于３７℃５％ＣＯ２培养箱中培养４ｈ后，室温下用１５％甘油休克２ｍｉｎ，由此可以提高转染频率约２０倍；转染后形成的ＭＤＶ空斑与原始感染病毒的空斑形态、生长速度一致。ＭＤＶＤＮＡ通过磷酸钙沉淀法以较高的频率转染ＣＥＦ，为研究ＭＤＶ基因组的调控、重组ＤＮＡ的表达及构建高效基因工程疫苗提供了可靠的技术手段     

介绍一种家畜子宫冲洗液

我们在治疗家畜子宫内膜炎中,试用生 减效。理盐水、青霉素、碘甄冲洗液冲洗子官,取(三)碘配加至6毫升以上时,个别马得了满意的效果。冲洗液的成分一般是;生 有气喘、发抖、慢草等现象。理盐水1000毫升、青霉素160万单位、2%碘(四)本冲洗液隔 2～3天用一次为攻3～5毫升。体会。     

马年说马简

癸巳蛇年将尽,甲午马年莅临。此时此刻,不禁又唤起国人对骏马骐骥的眷恋之情。众所周知,马是人类挚友。它自远古走来,与我们生死相依。殷商时期的甲骨I、辞中即有“马”字;《诗经·周南·汉广》篇有云：“之子于归,言秣其马”,     

打造代表联系选民通道——访光泽县人大常委会主任熊庆

"人大代表联系服务选民,听取选民意见建议,反映选民的呼声诉求,既是履行应尽的义务,也是践行群众路线的具体行动。"光泽县人大常委会主任熊庆如是说。近年来,光泽县人大常委会积极探索,相继制定了《代表联系选民规定》、《关于开展我与选民拉家常、我和代表集民意活动方案》、《代表在闭会期间开展活动的暂行规定》等操作性较强的规章制度,着力打造代表与选民联系的通道,全县8个乡镇按代表小组设立了10个代表联系选民     

路桥养护管理中的问题及处理办法

通过对公路桥梁的养护和管理方面现存的主要问题进行的分析与探究,提出了切实可行的建议,希望对公路桥梁的养护与管理能有所借鉴。     

止马镇:联出一片新面貌

"我们再也不用担心山体滑坡了。"光泽县止马镇白门楼新村村民们看到新修建好的山体挡墙纷纷赞不绝口。止马镇白门楼新村位于镇政府所在地1公里处,依山而建,主要安置本镇严洋水库移民。每当雨季,山上泥沙流下,造成道路泥泞,更让人提心吊胆的是山体滑坡可能危及村民生命财产安全。镇政府和镇人大很快行动起来,镇政府帮助白门楼新村争取到库区移民项目补助资金19万元,又从人大代表建议办理专项资金里拿出2万元补助,     

宋代“川广马”收买行为的演进:市场化与民族文化的视角

"川广马"是指从四川西部和广西南部购买的马。宋代"川广马"的收买,经历了从北宋以政治诉求为主导向南宋以经济诉求为主导的转化,其主要原因是南宋军马短缺严重,需扩展"川广马"市场来补充马源。为了扩大"川广马"的交易,南宋政府不仅重视"川广马"市马场的设置和运作,采取高价定价等经济策略,还任用通判等地方官员作为买马官员,在招买马过程中充分利用地方性知识来发展与少数民族的贸易关系,从而最大限度地拓展了南宋马匹市场。     

坦桑尼亚乌贾马社会主义兴起问题探研

坦桑尼亚乌贾马社会主义作为一种社会经济发展模式的选择。是坦桑尼亚历史长期演变的结果,是殖民主义野蛮统治的蛄果,是二战后国际国内形势等诸多因素交互作用的结果。     

2021—2022年我国鸡马立克病的流行病学调查

为了解我国规模化养殖场中马立克病病毒（Marek’s disease virus,MDV）的感染和免疫状态,采用四重TaqMan探针荧光定量PCR对采自我国11个省（自治区、直辖市）的19个养殖企业的94个鸡群的羽毛囊和环境样本进行MDV疫苗毒和野毒检测。结果显示,大部分养殖场存在野毒感染,其中山东地区样本平均阳性率较高为13.6%。不同省市白羽肉鸡、黄羽肉鸡和蛋鸡样本的野毒平均阳性率分别为8.3%、3.9%和7.2%。在不同日龄蛋鸡样本中,1～7、8～14和50～80日龄野毒阳性率较高,分别为12.6%、13.8%和14.3%。此外,单独免疫CVI988疫苗或以火鸡疱疹病毒（HVT）为载体的基因工程重组疫苗（rHVT）以及同时免疫这两种疫苗,均能降低MDV野毒的阳性率,且同时免疫两种疫苗鸡群的野毒阳性率最低。对不同免疫方式下疫苗在羽毛囊中复制情况的检测结果显示,在3～4周龄时,单独免疫CVI988疫苗的平均阳性率为91.4%,单独免疫rHVT疫苗的平均阳性率为58.2%,同时免疫两种疫苗时,CVI988疫苗和rHVT疫苗的平均阳性率分别为51.8%和36.9%,提示鸡场应切实做好马立...     

非洲马瘟病毒NS1蛋白在昆虫细胞中的表达及抗原性分析

非洲马瘟（African horse sickness,AHS）是一种由媒介昆虫传播感染马属动物的病毒性疾病,为了在杆状病毒表达系统中表达AHSVNS1蛋白并评估其作为亚单位疫苗组分的抗原性,本研究参考GenBank上公布的AHSV基因序列,人工合成NS1全长基因序列,利用PCR方法扩增完整的开放阅读框后将其克隆到转座载体pFastBacTMHTb上,将成功构建的重组质粒pFastBac-AHSVNS1转化到DH10Bac感受态细胞中,获得了含有AHSVNS1基因的重组杆粒Bacmid-AHSVNS1,将其转染到Sf9昆虫细胞内获得了表达AHSVNS1蛋白的重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,表达的重组AHSV NS1蛋白大小为65 ku,且获得了纯化的重组AHSV NS1蛋白。将其免疫BALB/c小鼠,细胞免疫荧光和Western-blot试验显示获得了特异性的抗AHSV NS1蛋白多克隆抗体,其效价达1∶51 200。流式细胞分析显示,AHSV NS1蛋白免疫小鼠能够刺激CD4+和CD8+T淋巴细胞的增加。上述研究结果表明,AHSV NS1蛋白作为AH...