潜血印迹显现方法研究进展

潜血印迹一般出现在恶性刑事案件当中,能够反映与案件有关的多方面信息,对于同一认定和分析判断案情具有十分重要的作用,这就使得其显现成为现场勘查的一项必不可少的工作。然而,这也正是公安实践工作当中的难点所在。经过多年的实验研究,目前国内外针对于潜血印迹的显现方法主要包括光学显现法和化学显现法。综述了这些常用显现方法的研究进展,并且讨论了每种显现方法在实践工作当中的优势和不足。     

绵羊CD46基因的克隆及真核表达

为了研究绵羊CD46蛋白的功能,根据从GenBank数据库获得的绵羊CD46基因的部分cDNA序列设计引物,以绵羊外周血淋巴细胞总RNA为模板,应用RACE方法扩增了绵羊CD46基因的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对CD46cDNA及CD46蛋白结构进行了预测分析。结果显示,绵羊CD46cDNA序列开放阅读框长1 083bp,编码由360个氨基酸残基组成的多肽,该多肽的理论分子质量为39ku,理论等电点为6.5。对该蛋白结构分析时发现,绵羊CD46第1~42位氨基酸残基为信号肽序列,共有5处N糖基化位点,4处蛋白激酶C磷酸化位点,5处Ⅱ-酪蛋白激酶磷酸化位点,7处N-豆蔻酰化位点。二级结构中无α螺旋,β折叠占26.1%,其余73.9%为转角,该蛋白具有4个结构域,与人源CD46的同源性较高。同时将CD46基因克隆到pCMV-Myc载体中,构建了真核表达质粒pCMV-Myc-CD46;将构建的重组质粒转染哺乳动物细胞CHO-K1以进行瞬时表达。Western-blot结果显示,CD46基因在真核细胞中成功获得了表达。上述研究结果为以后开展绵羊CD46的功能研究奠定了基础。     

抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克隆化共获得6株能稳定分泌抗E蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,它们分别被命名为1F3、1G2、1B11、2A5、3B6和4F9。Dot-ELISA及Western-blot分析结果表明,这6株单克隆抗体均能与原核表达的E蛋白特异性结合。经间接免疫荧光(IFA)试验验证,这6株单克隆抗体均能识别鸭坦布苏病毒感染的细胞,且荧光主要位于细胞质中。结果表明,本研究成功制备了6株抗鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体。鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备为今后鸭坦布苏病毒快速的病原学诊断以及E蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础。     

印油与印油印迹比对检验方法的影响因素研究

目的针对印油印迹形成过程中可能存在的影响因素,研究印油与印油印迹比对分析方法中可能存在的风险。方法采用溶剂提取,高速离心,过膜的简单的前处理方法,然后高效液相色谱分析,用色谱峰峰面积的相对含量来判定印油印迹与印油之间的差异。结论印泥印油、印油印迹与印油之间差异很小;而印台印油、渗透印油、翻转印油、印油与印油印迹比对时,存在一定影响。     

小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗的构建及免疫原性

为了寻求一种有效的疫苗用于预防小反刍兽疫(PPR),运用RT-PCR方法扩增PPRV的F基因并将其克隆到pCAGGS载体中,构建了真核表达质粒pCAGGS-F。将构建的重组质粒转染哺乳动物细胞上进行瞬时表达,通过Western-blotting、间接免疫荧光检测证实F蛋白得到了高效表达。将重组质粒作为DNA疫苗,通过脚掌皮内注射免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA检测抗体的产生情况。结果显示,pCAGGS-F重组质粒在有无佐剂CpG的情况下均能诱导小鼠产生较高的抗体水平。     

小亚璃眼蜱4D8基因的克隆与原核表达

根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8.测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边缘革蜱4D8基因的核苷酸序列的同源性为89.2%.将此片段定向亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Hyaa4D8,表达并纯化重组蛋白,通过免疫印迹试验鉴定该重组蛋白的生物学活性.结果显示,该重组蛋白是分子质量为45ku的融合蛋白,且表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别.     

原子印章光敏印章盖印时间的鉴别

在对印章印文盖印时间鉴别理论依据研究的基础上,通过对原子印章、光敏印章的收集及用其制作的印章印文样本特征的研究,寻找、确定了鉴定文件盖印时间的印章印文的可变性特征,揭示出印章印文可变性特征的变化规律,以便对有争议印文的盖印时间进行检验鉴定,客观地进行综合评断,进而对有争议印文的盖印时间做出鉴定意见。     

基于电化学发光-分子印迹联用技术的盐酸麻黄碱传感器研究

以化学粗糙化的石墨电极为基底,三联吡啶钌(Ru(bpy)32+)为发光试剂制备了盐酸麻黄碱(Eph)的电化学发光-分子印迹传感器。性能评价的结果表明,Eph对于传感器的发光信号产生了特异的,有规律的影响。同时传感器也具有良好的选择性与稳定性,有望成为一种新的Eph分析方法。     

薄层色谱扫描法分析印油印迹成分中印迹浓度的影响

目的针对不同浓度的印油印迹,探讨印迹浓淡不同处,随时间延长其峰面积比率变化。方法运用薄层色谱扫描法对同1枚印章印文浓度不同区域进行比对实验。结果印迹浓度不同处在薄层色谱扫描法实验中的峰面积比率不同。结论在薄层色谱扫描法检验印迹相对时间中,印迹浓度对峰面积存在一定的影响。     

寻找法律的印迹（十二）“离婚之城”：拉斯维加斯趣间

“社会与经济的变迁，也引起法的变迁。改变社会和经济生活基础的同时而不带来法律上的相应变化，是不可能的。”——20世纪奥地利法学家埃利希（（法社会学的基本原理》