A型塞内卡病毒的分离与鉴定

为了确定2020年河南某猪场水疱性疾病的病因,通过提取发病猪的水疱皮样品的RNA,用RT-PCR方法初步检测,经BHK-21细胞分离培养病毒,进一步用间接免疫荧光试验(IFA)鉴定;利用蚀斑形成试验及病毒一步生长曲线,分析病毒分离株的增殖特性;RT-PCR方法扩增全基因组序列,进而构建基于P1基因的系统进化树。RT-PCR鉴定结果表明,猪场水疱性疾病的样品中只有A型塞内卡病毒(SVA)核酸呈阳性;细胞分离和IFA鉴定结果表明,成功分离到的1株病原为SVA,并命名为SVA/HN/2020,该分离株能够与SVA免疫家兔多抗发生特异性反应;蚀斑试验和病毒一步生长曲线结果表明,该毒株能够在BHK-21细胞层上形成蚀斑,并在感染后的第16小时病毒滴度达到最高为1×10^9.5TCID₅₀/100μL;全基因组测序结果表明,该毒株基因组全长7 279 bp(不含Poly A),开放阅读框为6 546 bp,可编码含2 181个氨基酸残基的多聚蛋白;其中P1基因大小为2 574 bp,其核苷酸序列分析显示,该分离株与在我国分离的SVAHB/CH/2016和S...     

不同日龄鸡的原代肝细胞分离与鉴定

选取不同日龄肉鸡,通过剪碎法和半原位灌流法分别分离1、15、30日龄肉鸡和成年肉鸡原代肝细胞并进行培养。采用油红O染色检测脂滴存在情况,PAS染色检测糖原分泌情况,免疫组织化学法和间接免疫荧光染色法检测肝细胞特异标记物CK18。结果显示,1日龄的鸡原代肝细胞内脂滴过多,15日龄的鸡原代肝细胞状态欠佳,30日龄和成年的鸡原代肝细胞生长状态和形态良好;原代肝细胞内存在大量的脂滴和糖原,免疫组织化学法和间接免疫荧光染色显示分离的细胞为CK18阳性细胞,即为肝细胞。结果表明,30日龄和成年肉鸡采用半原位灌流法分离得到的细胞纯度高、数量多且状态良好,且分离的肝细胞具备分泌糖原和储存脂质的功能,适合进行体外试验研究。     

云南省PALV的分离鉴定及序列特征分析

为掌握云南地区帕利亚姆血清群病毒（PALV）的分布情况和遗传特性,本研究分别在云南省师宗、江城及芒市设立监控点,通过定期采集哨兵动物抗凝血以“C6/36细胞-BHK细胞”的接种方式分离病毒,通过提取病毒RNA进行RT-PCR以鉴定病毒血清型,通过设计特异性引物对分离株Seg-2、Seg-3、Seg-7进行克隆及测序比对以分析其遗传特性。结果显示,从2017年云南省师宗县样品中获得5株阳性分离物,其中Chuzan virus(CHUV)2株,D’Aguilar virus(DAV)1株,Bluetongue virus(BTV)2株,经病毒序列结果比对和进化分析,2株CHUV的Seg-2和Seg-3与中国分离株独立成一簇,体现出明显的地域性,而2株CHUV的Seg-7相似度>99%,与云南、广西、台湾PALV具有相近的亲缘关系。分离株DAV的Seg-2独立成为一支,与非洲毒株亲缘关系最近,其Seg-3和Seg-7则相对保守,3株PALV分离株的Seg-3在系统发生树上划分为“东方型”地域型。研究结果为进一步开展PALV的感染特性、流行病学与疫苗研究奠定基础。     

试析车臣分离势力恐怖化的暴力文化因素

车臣分离势力的恐怖化有广义的暴力文化方面的深层原因:车臣民族的尚武传统有助于恐怖化的心理自然;伊斯兰极端思想是克服恐怖化的"道德自抑"障碍的精神武器;暴力化社会环境为恐怖化提供了组织便利.综之,暴力文化因素是车臣分离势力恐怖化的诱因和条件,而非其根源.     

重罪案件适用企业合规的困境与纾解

当前,重罪案件涉案企业更具合规的必要性,尤其是中大型涉案企业。但现有法律框架内的重罪案件企业合规激励在合法性、有效性和协同性上均存在一定问题,如单一乏力的激励机制弱化企业合规内在动力,诉后合规激励缺乏有效的司法协同、刑行衔接等等。对此,可以建立企业与企业家责任分离的归责路径,企业以合规无效作为归责基础,直接责任人则以行为过错作为追责依据;构建合规效力体系,实现对企业合规的多层次激励,立法上明确企业事前合规的阻却犯罪效力,事后合规对企业、直接责任人法定减免刑罚的效力;依托联动机制,确立法院诉后合规量刑裁量的主导地位,注重“后刑事阶段”的行政激励,统一合规激励行刑间的效力。     

亳芍内生真菌的分离与鉴定

目的 对亳芍内生真菌进行分离鉴定,旨在丰富其内生真菌资源种类。方法 利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基进行亳芍内生真菌的分离、尖端菌丝挑取法进行纯化,利用分子生物学方法对其进行鉴定。结果 从亳芍中分离出24株内生真菌,初步鉴定为9属13种,分别为Fusarium,Talaromyces,Dactylonectria,Myxocephala,Llyonectria,Penicillium,Alternaria,Rhexocercosporidium,Lopadostoma。主要为镰刀属（占33%）。结论 本研究首次从亳芍中分离出内生真菌,呈多样性分布,丰富了芍药内生真菌的种质资源。     

瓜蒌皮的化学成分研究

目的 研究瓜蒌Trichosanthes kirilowii Maxim.干燥成熟果皮的化学成分。方法 应用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS反相色谱柱以及半制备HPLC 等方法对瓜蒌皮水提物进行分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR和HRMS等波谱学方法对所得化合物进行结构鉴定。结果 从瓜蒌皮水提物的乙酸乙酯萃取部位共分离得到12个化合物,其结构鉴定为葫芦素D（1）、葫芦素B（2）、异葫芦素D（3）、fabacein（4）、23,24-二氢葫芦素D（5）、柯伊利素7-O-β-D吡喃葡萄糖苷（6）、blumenol A（7）、对羟基苯甲酸（8）、5-oxymaltol（9）、香草酸（10）、烟酸（11）和3-maleimide-5-oxime（12）。结论 化合物4为首次从天然植物中分离得到,化合物3、8、9、11、12为首次从瓜蒌皮中分离得到。     

农业转移人口市民化:空间实践及其性别差异

空间实践与空间适应是农业转移人口市民化的重要维度。农业转移人口的空间实践不仅反映其生活状态、行为方式,同时也反映其所处空间内的社会关系。从居住空间实践来看,农业转移人口自乡村向城市的流动,完成了水平分散居住向集中居住的转变。城市社区商品房住宅空间结构的开放与闭合之间的张力,导致农业转移人口空间适应存在困境,对其社会交往也产生了限制。职住分离以及农业转移人口相对较忙碌的工作特征,造成农业转移人口生活路径与居住路径的截然分割,导致其社会交往的离散性。而性别角色分工的不同,则使农业转移人口的城市空间实践与市民化存在明显的性别差异。女性的社区居住空间适应较男性更容易,且周期更短,并可能带动农业转移人口整个家庭的社区空间融入。男性农业转移人口的职业空间融入则更加迅速,且相对稳定。职业空间与居住空间的实践与适应,共同作用于农业转移人口的城市空间融入和市民化。     

裁执分离模式下检察监督的实证分析

行政非诉执行检察监督是检察机关全面履行法律监督职能、做实行政检察工作的新方向。通过对适用裁执分离模式裁定由国土资源部门组织实施和乡镇政府组织实施案件的实证分析,得出行政非诉执行牵涉面广、执行难度大,法律不健全、执行主体相互推诿,及检察监督线索难获取、开展监督的法律规范不完善等原因导致执行难长期存在,进而提出以完善裁执分离模式的法律支撑、健全裁执分离模式配套制度建设、多元化拓宽案件线索来源渠道、强化行政非诉执行检察监督类案办理效果,来推动国土资源领域行政非诉执行制度的高效运转。     

茯苓多糖的分离纯化、组成及其抗氧化活性研究

目的 分离纯化得到带电性不同的茯苓多糖组分,分析其化学组成性质,比较多糖粗提物和其不同组分的抗氧化活性.方法 采用水提醇沉法提取茯苓多糖粗提物(Poria cocos Polysaccha-ride,PCP),利用二乙氨基乙基(diehlaminowthy,DEAE)-纤维素阴离子交换色谱柱法对多糖粗提物进行分离纯化,...