新城疫病毒V4株L基因的克隆与序列分析

设计了 2对引物V4L1、V4L2和V4L3、V4L4 ,用RT PCR法对新城疫病毒 (NDV )V4克隆株的L基因进行了分段克隆。用V4L1、V4L2扩增出约 4 .1kb的V 4LA片段 ,用V4L3、V4L4扩增出约 3.5kb的V 4LB片段 ,分别对克隆出的 2个片段进行序列测定 ,并用DNAsis软件比较分析后进行拼接 ,得到长约 7.2kb、包含有NDVV4克隆株L基因全长的核苷酸序列。NDVV4克隆株L基因mRNA全长为 6 70 4bp ,拥有 1个 6 6 15bp的开放阅读框 ,推测其编码的氨基酸数为 22 0 4个。氨基酸同源性分析表明 :V4克隆株与HB92V4株L基因的同源性为 99.0 % ,与LaSota、B1、B1T(美国Takaaki分离株 )、BeaudetteC、Clone30、F4 8E9、SF0 2和ZJ1株的同源性为 94 .1%～96 .5 %。     

口蹄疫病毒多基因片段的克隆及其杆状病毒表达载体的构建

根据定点突变原理获得了包含口蹄疫病毒P1、2A、3C、3D及部分 2B编码区的目的基因片段 ,经SpeⅠ和HindⅢ双酶切后 ,与经相同方法处理的杆状病毒转移载体 pFastBacHT连接 ,得到了重组质粒 pFB P12X3C3D。经酶切和测序鉴定后 ,将其转化入含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac ,经抗性及蓝白斑筛选 ,得到了含P12X3C3D多基因的重组穿梭载体 ,将其命名为Bacmid P12X3C3D ;提取其DNA并转染Sf9昆虫细胞 ,最后获得含口蹄疫病毒P12X3C3D多基因的重组杆状病毒。     

伪狂犬病病毒闽A株糖蛋白gD基因去信号肽片段在大肠埃希氏菌中的表达

应用PCR方法从包含伪狂犬病病毒(PRV)Fa株糖蛋白gD基因的重组质粒pB13中扩增出糖蛋白gD基因去信号肽片段,将其克隆到大肠埃希氏菌表达载体pThiohisA中。测序结果表明,糖蛋白gD基因去信号肽片段长1 155 bp,与PRV Fa株糖蛋白gD基因完全一致。经1mmol/L IPTG诱导后,重组质粒pThiohisA-gD在大肠埃希氏菌XL1-blue、Top10、DE3和DH5α中均得到表达,其中在宿主菌XL1-blue中表达量最高。Western-blotting结果显示,大肠埃希氏菌XL1-blue表达的糖蛋白gD具有免疫原性。     

专利产品平行进口的法律思考

一、专利产品平行进口概述平行进口(pamllel importation),又称灰色市场进口,是相对于完全合法的白色和完全违法的黑色的中间状态①。专利产品的平行进口,根据美国乔治华盛顿大学知识产权研究中心Wegner教授的说法,是指一国未经授权的进口商,在某项专利已获进口国法律保护的情况下,仍从国外购得专利权人或其专利被许可人生产制造或销售的此项专利产品输     

基因专利及其法律问题初探

基因技术是一把“双刃剑”,一方面它向医药、工业等领域注入新的血液,另一方面它对原有的知识产权体系产生了巨大冲击.本文在探讨国内外基因专利权现状及发展的同时,涉及基因隐私权和基因所有权等相关法律问题,最终将结合国情为上述问题提出法律保护建议.     

问道红色基因 践行“三严三实”——桂东红色基因对践行“三严三实”的启示

一、坚持"党"字姓是践行"三严三实"的必然要求中国共产党作为执政党,作为中国特色社会主义事业的领导核心,领导和带领全国各族人民,进行政治、经济、文化、社会以及生态文明建设,在历史与现实中发挥着不可替代的作用。党的执政地位的确立,是党的宗旨所决定的,更是人民的选择和历史的必然。坚持党的领导是我们四项基本原则的要求,也是我们开展好一切工作的根本保障。党领导一切,无论是在革命战争年代还是和平建设时期,事实证明。