增加PCR循环次数提高降解DNA样本STR分型的检出率

本文结合典型案例,尝试采用增加PCR循环次数的方法,提高严重降解DNA样本STR分型的检出率,并就其优点及注意事项等进行讨论。1案例资料2004年3月28日,广州市某河涌中发现一个高度腐败的头颅,要求与2004年3月15日该区某小学侧路边草丛中发现的一具无头女尸相比对。作者通过增加循环次数得到理想结果。2方法与结果采用酚/氯仿抽提法提取该头颅右耳廓软骨DNA后,用Promega公司DNA IQTM系统分离纯化,采用AB I公司IdentifilerTMPCR Amplification K it常规扩增28个循环,效果不佳(图1)。增加至38个循环扩增后,扩增产物用AB I3100型遗…     

建立法医DNA数据库的初步探讨

<正> 本研究在国外成功建库的基础上,经几年的摸索,逐渐形成了一套建立DNA数据库的思路,并初步建立了北京地区法医DNA数据库,与同仁探讨。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 样本 取自本中心1998年至今受理的未破案件现场遗留物中与被害人STR分型结果不同的样本     

天津汉族6个STR基因座的基因频率调查

<正> 采用PowerPlex~(TM)16 System荧光标记复合扩增试剂盒,ABI-310型DNA序列分析仪,对219名天津汉族无关个体血样进行TH01、PENT E、     

头盔上附着微量DNA的检验1例

1材料与方法1·1案例某地发生的系列抢劫案中,提取到现场遗留的摩托车头盔1顶,其上未见明显斑迹。1·2方法(1)采用棉签二步法[1]擦拭头盔上与口鼻相对应的内侧部位。(2)剪取擦拭后棉签放入0·5ml Eppendorf管中,加400μl纯水清洗,离心,去上清,保留约20μl液体和沉淀物。(3)加5%Chelex-100 200μl、PK(5mg/ml)10μl,56℃温育1hr。(4)振荡,100℃8min,振荡,13000r/min离心3min。(5)取上清液150μl,采用DNA IQTM系统(Promega Cat.#DC6700)浓缩纯化。(6)在Applied Biosystems公司的9700型Ge-neAmp PCR System上进行10μl体系的Identifi…     

对指甲进行STR检测的可行性

STR(短串联重复序列)是人类基因组中具有高度多态性的遗传标记,它以3～7个bp为基本单元,在同一位点上因重复数的不同而形成不同的等位基因,STR位点因其序列短,扩增成功率高,对降解及微量检材具有特殊价值,因而在法医检验上得到了广泛应用。目前,大部分人体生物样品可通过消化的方式裂解细胞以获取足够量的模板DNA进行STR分型,指甲等硬组织核DNA提取相对困难,没有现成的方法或试剂盒。作者参照Kane等人报道的方法[1,2],通过高浓度的DTT打开角化蛋白中的二硫键使PK得以对指甲进行消化,从而获得核DNA,得到了令人满意的STR分型结果。…     

江苏地区汉族人群15个STR基因座频率调查

采用五色荧光标记引物复合扩增技术 ,对江苏地区 12 0名汉族无关个体进行了 15个STR基因座的基因分型 ,旨在为法医学应用提供基础资料。1　材料和方法12 0例无关汉族个体的血样均系本实验室日常检案积累 ;所有样本的DNA均用硅珠法[2 ] 或Chelex[1]法提取后 ,参照AmpF1STRIdentifiler试剂盒 (PE公司 )及ABI310型遗传分析仪的使用说明书进行扩增和检测 ,并分别计算 15个基因座的基因频率、杂合度(H)、个体识别率 (Dp)及多态信息量 (PIC)。2　结果和讨论12 0例无关个体的 15个STR基因座的等位基因频率见表 1。对每个基因座进行 χ2 …     

Y—STR系统挽救了一家亲情

今年6月,司法部司鉴所接受一例亲子鉴定,运用Y-ST系统,拨开重重疑云,挽救了一个和睦家庭的亲情。司法部司鉴所物证学实验室近年来对Y-STR系统用于亲缘鉴定进行了实验探索,他们认为,Y-STR呈父系遗传特征,孩子与生父具有相同的Y-STR单倍型。在法医物证学上,Y-STR应用价值比较大,可在父-子血缘关系、兄弟同胞关系、叔侄关系和祖孙关系鉴定中发挥重要作用。在亲子鉴定和个体识别案件鉴定中,目前国内外一般依据常染色体STR的检测结果作出鉴定结论。但是,由于STR突变率较高,检验中若只发现1-2个基因座不符合遗传规律,有时很难作出正确的…     

利用DNA检验技术侦破无尸案1例

2001年某日,本市某区分局刑警大队接一对夫妇报案,称其女儿张某(女,29岁,三陪小姐)已失踪近一个月。办案人员经过调查,张某近期与鹌鹑养殖户金某(男,59岁)有过密切接触,并怀疑已被金某杀害,遂对金某采取强制措施,并对可疑现场进褐色血迹,但由于金某养殖并经常宰杀鹌鹑,这些血迹是否为本案的物证需要进一步检验。在现场通过种属试验确定其中5份检材为人血,并提取被害人父母及犯罪嫌疑人金某血样,以酚氯仿方法抽提DNA并纯化浓缩,用美国promega公司CTT、SilverⅢ、FFV银染试剂盒扩增检测9个STR基因座,结果见表1。表1中5号检材为门旁一废…     

争议父(母)与真父(母)有血缘关系的亲权纠纷案鉴定2例

亲子鉴定主要是通过对遗传基因的检测 ,根据遗传规律判定被检者之间是否存在生物学亲生关系。一般的亲子鉴定案均可按孟德尔遗传规律通过DNA分型来判断。但当争议父 (母 )与真父 (母 )有血缘关系时 ,争议父 (母 )与孩子之间 (如祖孙、叔侄、姨甥等 )就会有同源基因 ,而且血缘越近 ,有同源基因的STR基因座就会越多。这种情况达到一定程度就会给亲子鉴定尤其是单亲案件的分析鉴定带来困难。现就近年来本室受理的典型案例作一浅析并提出注意事项。1　资料和方法1 1　资料案例 1:李某 (女 ,35岁 )自述曾抱养一小孩 ,现群众举报其涉嫌超生 ,因…     

法医DNA检验的现状及发展

DNA检验自被作为证据引入法庭诉讼以来 ,随着科技的发展 ,其检验手段和方法不断更新和完善 ,经历了一个从小到大、从复杂到简单、从手工操作到仪器自动化的发展过程。本文综述了利用DNA推断年龄及DNA提取、检测等方面的新进展。