不同条件下Percoll密度梯度离心分离组织细胞浮游生物的比较

目的实验评估不同条件下Percoll密度梯度离心分离组织中浮游生物的效果。方法大白兔肝组织匀浆后与3种藻类混合物混匀,分为混匀高速分离组、混匀低速分离组、叠加高速分离组、叠加低速分离组和未分离组(对照组)进行Percoll密度梯度离心分离浮游生物,镜检并提取其DNA,用PCR技术分别检测浮游生物16S rDNA和叶绿素基因特异性片段。结果混匀高速分离组有较多浮游生物呈分层条纹状分布于离心管中部,叠加高速分离组浮游生物紧邻组织细胞层下,低速分离组见较少浮游生物紧邻于组织细胞层之下,未分离组见浮游生物和组织细胞混杂沉于管底;经DNA检测,各分离组组织细胞层下液体均可检出浮游生物的1条447bp 16S rDNA片段及1条194bp叶绿体/叶绿素脱辅基蛋白基因片段,未分离组均未检出扩增产物且背景较深。结论混匀加样方式进行高速Percoll密度梯度离心,合并收集组织细胞层下所有液体,是分离浮游生物的最有效方法。     

闪光灯在拍摄现场足迹中的应用

在现场勘查实践中,经常会遇到遗留在现场各种客体上的灰尘足迹,为了提取到原始的反差好的足迹,我们通常会采取架三脚架打光拍摄、胶带纸粘贴后架空打光拍照、吸附拍照法提取。用这些方法对一般客体虽能取到效果较好的足迹,但对于一些特殊客体就不实用了。笔者尝试用闪光灯对各种客体上遗留的足迹进行直接拍摄提取,在一些案件当中取得了较满意的效果。1拍摄过程1.1器材135单反相机、标准镜头、闪光灯、比例尺。1.2操作方法将留有灰尘足迹的客体用普通现场勘查光源进行观察,直至灰尘足迹轮廓反映清晰,反差最佳,放置比例尺。将照相机的快门速度…     

Chelex-100法提取滤纸血痕DNA影响因素的比较

目的改进滤纸血痕DNA提取方法,建立更简便、廉价,适合当前DNA建库需要的提取方法。方法将752份滤纸血痕分成四组,分别按照四种不同的Chelex-100法进行DNA提取并进行比较研究;63份新鲜血痕分别按照两种方法提取并进行对比研究。结果对于陈旧滤纸血痕,四种提取方法的检测成功率无显著差异(P>0.05);对于新鲜血痕,两种提取方法的检测成功率有显著差异(P<0.05)。结论对于建库陈旧滤纸血痕样本的DNA提取可采用不加纯水处理,直接加入Chelex-100的方法进行。     

一种提取人体皮肤血手印的方法

沾附于人体皮肤的手印血液,由于极易渗于皮肤皱纹中,并与皮肤上表层血迹分离成上下两层;用联苯胺液显现就会使上下两层血液同时着色,从而造成皮肤表面纹线混杂的情况。实践中,我们用指纹胶带提取后再进行显现,取得了满意效果。其方法是:(1)剪除皮肤血手印上及边缘的汗毛;(2)将指纹胶带固定于血手印外皮肤一端,向另一端轻轻均匀按压(不得产生气泡)二分钟,使之紧贴在皮肤血手印上;(3)将指纹胶从一端向另一端慢慢揭起后,使两端固定于物体上;(4)在粘贴血手印的胶带处涂上无水乙醇,待彻底挥发后,再用联苯胺液或孔雀绿液涂显血手印,使之呈翠蓝色;(…     

网络犯罪电子证据若干问题的探讨

当今世界已走进了网络时代,网络在给人们的生活提供便利的同时也显示出它在被作为犯罪手段时所具有的巨大破坏作用。本文就网络犯罪电子证据的若干问题,如网络犯罪电子证据的特征;电子证据的提取;电子证据的认定、采信以及网络犯罪电子证据立法等问题作一粗浅的探讨。     

焚烧骨骼DNA检验1例

1 案例资料1.1简要案情2011年6月19日,某河边垃圾堆旁发现1具被焚烧过的尸骨.经法医现场检验,尸体皮肤、软组织等完全碳化消失,除部分颅骨、骶、髂骨外,其余大部分骨骼碳化、碎裂,残存骨骼碳化不彻底部分,可见明显高温过火痕迹.1.2 DNA检验骨骼预处理 选取残留股骨1块,清洗后用刀片刮掉表面皮质,用水冲洗干净,纸巾蘸无水乙醇擦拭并紫外线照射1h,将其敲成0.5cm ×0.5cm左右的小碎片后取2g用冷冻研磨机研碎置10mL离心管中.     

Chelex法和两种磁珠法提取接触DNA效果的比较

目的比较Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对接触DNA的提取效果。方法将稀释为10ng、100ng的标准品DNA,分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法处理;对30例烟蒂和30例牙刷分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法和EQ国产磁珠法提取DNA,然后进行PCR定量和STR检测。结果Chelex法对DNA的提取无损失,DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对DNA的提取均有不同程度的损失;烟蒂、牙刷等检材采用Chelex法提取的接触DNA量和IPC CT值显著高于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法,但STR检验成功率却低于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法。2种磁珠法提取的DNA量、IPC CT值和STR检验成功率无显著性差异。结论污染轻、杂质少的接触DNA检材,用Chelex法提取最为方便快捷;IQ磁珠法、EQ国产磁珠法更适合污染接触DNA检材的提取及自动化操作。     

绑架案件现场胶带纸上指纹提取1例

1案件简介某年1月15日凌晨,某住宅小区停车场内发生一起绑架案,案发后抓获5名犯罪嫌疑人,并成功解救人质郑某。解救时,在郑某的口部、两手脚绑有大量的黄色胶带纸,按照无损原则,既不损胶带纸,又不能对胶带纸上遗留的手印造成损坏（见图1）。将现场的胶带纸带回实验室后,采用化学试剂剥离法,     

指甲为证

在不少影视剧里出现过的凶杀案中,我们常常会发现弱势的受害者会不由自主地挣扎,用手拼命抓向一切可能抓到的东西,包括现场的物体、凶手的衣物和肉体。这些被指甲抠下来的微量物质会残留在受害者的指尖,有时是在指甲盖上,更多的是在指甲缝中。法医们提取这些物质,可以为破案寻找到一些有用的线索,比如可能初步推断出原始的案发现场,也可能查找到凶杀嫌疑人。当然,死者的指甲本身也是很好的线索,可以用于判断死者的遗传特征、健康状况、年龄、性别、职业等情况。目前,指甲在法医学中已经成为一类非常重要的生物检材。随着法医学检验技术的不断进步,指甲在法医实践中的作用也显得越来越重要。     

GC/MS法联合分析生物检材中的尼美舒利、二氧丙嗪

目的建立生物检材中尼美舒利、二氧丙嗪的GC/MS检验方法。方法采用浸取法提取,GC/MS定性检验,内标法选择离子检测（SIM）模式定量检验。结果最低回收率为69%,尼美舒利的线性相关系数为0.998,克咳敏的线性相关系数为0.9973。结论该方法操作简便快速,提取率高,可用于实际案件中尼美舒利、二氧丙嗪的检验。