禽多杀性巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因真核表达载体的构建

应用限制性内切酶BamHⅠ将片段ompH从重组质粒pMDT-omp H切下,非定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定,证实成功构建了禽多杀性巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因的重组真核表达质粒pcDNA3-ompH。将重组表达质粒转染至 COS7 细胞,经RT-PCR、SDS-PAGE及Western-blotting检测,证明了外膜蛋白H基因获得了瞬时表达。     

混合凝胶电泳法同步检测血液和血斑EsD、PGM_1及 GLOⅠ型的研究

本文采用1mm 厚的琼脂糖、水解淀粉混合凝胶电泳法同时分析血液及血斑 EsD、PGM_1及 GLOI 三种酶型。对室温下(20℃左右)保存的血痕其三种酶的活性进行了测定比较。并调查了北京地区222名健康献血员这三种酶的表型分布及基因频率。本文对实验中电泳的各个环节,条件及酶谱带显色的药量、时间,温度等条件的掌握控制也进行了实验比较。     

大鼠脑、骨髓细胞核DNA降解推断死后间隔时间的研究

目的检测大鼠死后不同温度下脑、骨髓细胞核DNA降解规律，寻找推断早期死亡间隔时间（PMI）的新参数。方法10℃和20℃下，大鼠死后0～40h内，每隔4h取材脑组织和骨髓，单细胞凝胶电泳（SCGE）检测DNA降解程度，线性回归分析比较彗星参数HeadDNA％、尾长（TL）、Olive尾矩（TM）与PMI的关系。结果大鼠死后早期脑细胞、骨髓细胞核Head DNA％随着PMI逐渐下降的程度不同，20℃脑细胞核Head DNA％降解速率较快。与骨髓细胞相比，脑细胞核Head DNA％与PMI线性关系较好。与TL、TM相比，Head DNA％与PMI的线性关系较好。结论脑组织是利用SCGE检测DNA降解推断PMI的合适检材。Head DNA％较TL、TM推断PMI的价值更高。     

小鼠心肌细胞核DNA变化与死亡时间的关系

目的监测小鼠死后细胞核DNA降解的情况,探讨死后细胞核DNA降解的一般规律。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定111只小鼠在死后72h内不同时间点小鼠心肌组织细胞头半径、尾长度、头DNA含量比例、尾DNA含量比例、尾矩、Olive矩、头面积、尾面积八项参数的变化值。结果在个体死亡72h内,测定的八项参数指标均显示细胞核DNA降解速率和程度与死亡时间具有高度的相关性,并获得了更能体现DNA降解趋势的二项式回归方程和多元回归方程,均具有高度的统计学意义。结论应用72h内心肌组织DNA变化与死亡时间之间呈线性关系的各组回归方程,可为法医学推断死后经过时间提供一种新的、客观的、精确的方法和参考依据。     

人类血清转铁蛋白的遗传多态性

人类血清转铁蛋白(Transferrin,简称 Tf)是1945年发现的一种血清糖蛋白,由于它能与铁特异性结合并将铁运输到身体各组织器官,故又称为嗜铁蛋白、铁糖蛋白或运铁蛋白。现在已知 Tf 是血浆中 B_1~-球蛋白的成分,每100 ml 血浆中 Tf 的含量为200～300mg,占血浆总蛋白量的3%,占     

用小电泳进行DNA指纹图分析探讨

用小凝胶板电泳进行DNA指纹图分析,电泳时间缩短1/2,所需试剂及器材节省1/3～1/2,DNA最小检出量为0.8μg,使本方法重复性和实用性更为突出,值得推广应用。     

精斑中磷酸葡萄糖变位酶(PGM_1)及其亚型的电泳分型

本文用淀粉凝胶电泳法和 PAGIEF 对精斑 PGM_1普通型及亚型进行了检测。169份精液斑的 PGM_1分型结果是:PGM_1 1—1 87例;PGM_1 2—1 66例;PGM_1 2—2 16例,其中31例同一个体红细胞及精液 PGM_1分型的结果完全一致。研究了138例不同精子数精斑的 PGM_1型,发现精子数的多少对分型无影响。亚型检测结果与红细胞一样可分10型。     

单根毛发角蛋白的分离与分析

本文用单根毛发(1～5cm)进行微量化角蛋白 SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,并对人与5种不同种属的动物毛发角蛋白进行了比较研究。结果表明,人与动物毛发角蛋白组分有明显差异,主要区别在于低分子量区域;用 N-(3-芘)马来酰胺标记毛发角蛋白巯基,进一步确定了毛发角蛋白中低硫蛋白位于45,000～52,000分子量范围,高硫蛋白位于<18,500分子量范围。人与动物毛发角蛋白的主要差异是高硫蛋白。作者认为,本实验方法对法医学毛发鉴别有一定的实用意义。     

死后小鼠脑组织细胞核DNA变化规律的研究

目的研究DNA降解变化与死亡时间的关系,为法医学推断死亡时间提供一种比较准确可靠的新方法。方法应用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定了111只小鼠在死后72h内不同时间点小鼠脑组织细胞核头半径（HeadRadius,HR）、尾长度（Tail Length,TL）、头DNA（HeadDNA）含量比例、尾DNA（Tail DNA）含量比例、尾矩（Tail Moment,TM）、Olive矩（Olive Moment,OM）、头面积（Head Area,HA）、尾面积（Tail Area,TA）8项参数的变化值。结果在个体死亡72h内,测定的8项参数指标中尾DNA含量比例、彗星尾长、尾矩、Olive矩、尾面积都呈增加趋势,头半径,头DNA含量比例,头面积均呈下降趋势。上述参数均与死亡时间具有高度的相关性。并将每个参数的测量值进行了多项式运算,获得了更能体现DNA降解趋势的二项式回归方程（P〈0．001）和多元回归方程（P〈0．001）,均具有高度的统计学意义。结论应用本研究提供的72h内脑组织DNA变化与死亡时间之间呈线性关系的各组回归方程,为法医学推断死后经过时间提供了一种新的、客观的、精确的方法和参考依据。     

DGGE技术检测小核核糖核蛋白多肽N基因rs220030位点的多态性

目的 分析小核核糖核蛋白多肽N(small nuclear ribonucleoprotein polypeptide N,SNRPN)基因SNP位点rs220030在中国汉族人群中的基因结构特征及多态性,获得群体遗传学资料.方法 应用变性梯度凝胶电泳(denatu^ng gradient gel electropho...