口蹄疫病毒O型和A型交互反应性单克隆抗体的筛选与鉴定

不同血清型口蹄疫病毒(FMDV)之间不能产生交叉免疫保护,但是血清学的交叉反应确实存在。本研究旨在建立一种筛选型间交互反应性抗体的方法,以期为解析FMDV血清型间保守的抗原结构奠定基础。本方法主要依据单个B细胞抗体技术,首先采用两种不同的荧光染料FluoProbes 647H和Pacific Blue分别标记O型与A型FMDV 146S灭活抗原,然后利用流式细胞分选技术,从免疫牛外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出结合两种抗原的特异性B细胞,通过单个B细胞抗体基因测定,获得Ig G抗体重链与轻链可变区编码序列,并将可变区基因插入含有牛IgG抗体恒定区的pcDNA3.4载体中,构建IgG抗体的重链与轻链表达质粒。将重链与轻链表达质粒共转染中国仓鼠卵巢悬浮细胞(CHO-S)进行完整抗体表达。结果显示,通过该方法获得了5株FMDV特异性单克隆抗体,其中4株(H64、R82、I16、R29)经间接免疫荧光(IFA)检测都可特异性识别O和A型FMDV;ELISA结果显示,H64、R82、I16与O、A型抗原均具有较好的亲合力;Western-blot结果显示,I16可特异性结合O、A型FMDV结构蛋白VP2中的线性表位,说明在衣壳蛋白VP2上存在血清型间保守的抗原表位,通过本研究进一步加深了对FMDV抗原结构的认识。     

猫CD3单克隆抗体的筛选与鉴定

为研究猫CD3的生物学功能、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法,通过克隆构建含猫CD3胞外区基因的重组质粒,将ExpiCHO-S细胞和Expi293细胞表达的猫CD3蛋白分别作为免疫原和筛选抗原,利用杂交瘤技术制备抗猫CD3单克隆抗体（m Ab）,对其抗体亚型和杂交瘤细胞株稳定性进行鉴定和分析,IFA、Western-blot、免疫组化（IHC）和流式细胞术（FCM）分析其生物学特性。结果显示,成功制备了2株可持续稳定分泌抗猫CD3 m Ab杂交瘤细胞株,命名为2C9和3E1;亚型鉴定结果显示均为Ig G1型,轻链类型均为κappa型。IFA和Western-blot结果显示,2株抗猫CD3 m Ab均可与体外表达的猫CD3蛋白发生特异性结合。IHC和FCM结果显示只有2C9 m Ab可特异性识别猫脾、肠道淋巴组织及猫外周血单核淋巴细胞（PBMCs）中的T淋巴细胞。结果表明,本研究制备的猫CD3 m Ab为后续猫CD3分子的功能研究、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法的建立奠定了基础。     

AQP9基因在不同闭锁进程水牛卵泡颗粒细胞中的表达及其与细胞凋亡关系的研究

为了解AQP9基因表达及其与水牛颗粒细胞凋亡的关系,初步阐明它在水牛卵泡闭锁中的作用,首先分析了不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞中AQP9基因和凋亡相关基因的表达情况.通过构建颗粒细胞凋亡模型、过表达AQP9基因的方法分析了它对细胞凋亡相关基因表达的影响.为进一步了解PKC通路与AQP9基因表达的相关性,添加PKC抑制剂处...     

马动脉炎病毒的血凝性研究

在RK-13细胞上培养的马动脉炎病毒(Equine viral arteritis,EAV)在4℃、室温和37℃条件下,用多种动物的红细胞进行血凝试验,病毒在不同温度下均可凝集小鼠和鸡的红细胞,但不能凝集牛、绵羊、山羊、马、猪、豚鼠、仓鼠、兔及鹅的红细胞.将病毒用吐温-80和乙醚处理后,血凝活力会显著增强,其HA效价比未经处理的病毒高4-8倍,且血凝像更加清晰.处理病毒的最适条件是在冰浴状态下用终浓度0.6-1.25 mL/L吐温-80振荡处理15-60 min,再加1/2体积的乙醚振荡作用5-15 min.     

环丙沙星和恩诺沙星联合肝毒性及其机制研究

研究动物性食品中常见抗菌药环丙沙星(Ciprofloxacin,CFX)和恩诺沙星(Enrofloxacin,ENR)残留联合肝毒性及其分子机制.以小鼠肝实质细胞AML12细胞为模型,通过结晶紫染色法与联合指数计算确定CFX、ENR引起协同毒性的浓度比,并使用蛋白免疫印迹法、Annexin V-FITC/PI双染法等方...     

打疫苗岂止是私事?

“你打疫苗了吗?”这句话已经成为时下一些人的问候语。4月2日,在浙江省新冠疫情防控工作新闻发布会上,要求“机关单位带头、党员干部带头”接种新冠疫苗。此举有利于人们建立对疫苗有效性和安全性的信心,从而产生“要打”“早打”的动力。     

霰弹枪支上微量脱落细胞STR分型检验初探

随着DNA检验技术的不断发展,检验手段更灵敏,脱落细胞等微量物证检验成功率逐渐提高。本文实验通过对霰弹枪上残留的人体脱落细胞进行STR分型检验,探索其在实际检案中应用的可行性。     

葛根和黄芩乙醇提取物体外抗乳腺癌实验研究

目的:考察葛根和黄芩乙醇提取物体外抗乳腺癌细胞增殖活性。方法:葛根及黄芩200,400,700,950 m l/L乙醇提取物作用于人乳腺癌MCF-7(ER )和MDA-MB-231(ER-)细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果:葛根950 m l/L乙醇提取物在100~800μg/m l剂量均能显著抑制人乳腺癌细胞增殖,700 m l/L乙醇提取物也显示了一定的抗肿瘤细胞生长活性,200,400 m l/L乙醇提取物未见明显的抑制乳腺癌细胞增殖作用;黄芩950,700 m l/L乙醇提取物在50~400μg/m l剂量均能显著抑制人乳腺癌细胞增殖,400 m l/L乙醇提取物也显示了一定的抗肿瘤细胞生长活性,而200 m l/L乙醇提取物未见明显的抑制肿瘤细胞增殖作用。结论:葛根和黄芩乙醇提取物有一定的抑制乳腺癌细胞增殖作用。     

21世纪上半叶科技预测

2001年一种安装在墙上。长度为1米的大型平面荧光屏面世。这种荧光屏不仅能播放电视节目和录像，还能展出艺术品。     

空肠弯杆菌肠毒素的组分及其分子质量测定

经ＳＤＳＰＡＧＥ分析发现,８０％饱和硫酸铵盐析的空肠弯杆菌细胞紧张性肠毒素（ｃｙｔｏｔｏｎｉｃｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ,ＣＥ）粗提物除有６８ｋｕ的１条带外,还有部分未分开的小分子物质,而经神经节苷脂ＧＭ１亲和层析后仅有６８ｋｕ的１条带,表明ＣＥ为６８ｋｕ的蛋白质。