牛浮舰蛋白-2在真核细胞中的表达与鉴定

采用基因重组法将牛浮舰蛋白-2(Flotillin-2)基因的整个开放阅读框(ORF)克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His(B),通过脂质体法将重组质粒转入中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,利用Western-blot分析目的基因的表达情况。为确定35ku的小蛋白来源,采用融合PCR法构建突变体,分别利用标签抗体和针对浮舰蛋白-2的抗体鉴定突变体表达蛋白的特性。测序结果表明,成功构建了Flotillin-2基因的全长ORF及其突变体mFlotillin-2的重组质粒。Western-blot结果显示,Flotillin-2基因的全长ORF在CHO细胞中表达时除出现与预期大小相一致的48ku目的蛋白带外,还有1个35ku的条带。基因序列分析发现,在第430~438位核苷酸存在1个似Kozak序列(CGCATGGGC)。将ATG突变成GCT(丙氨酸)后,Western-blot结果显示,突变前后35ku的小蛋白始终存在。本研究以pcDNA3.1(-)/Myc-His(B)为载体,实现了牛Flotillin-2基因的全长ORF的真核表达,证明了35ku小蛋白并不是由于重新起始翻译导致的,而可能是浮舰蛋白-2在翻译过程中的裂解产物。     

磷对成骨细胞超微结构及其GJIC和Ⅰ型胶原含量的影响

在体外培养成骨细胞(OB)的基础上,添加0、1、2、4mmol/L磷,作用2d后,采用电子显微镜观察OB的超微结构,采用划痕标记染料示踪技术观察细胞间隙连接通讯(GJIC);作用2、5、8d后,用BCA法蛋白定量试剂盒、Goat Anti-rat Collagen TypeⅠ试剂盒分别检测OB内总蛋白及Ⅰ型胶原的含量,并用DⅠ型胶原/D总蛋白表示Ⅰ型胶原的含量。结果显示,作用2d,4mmol/L磷组OB内线粒体减少、肿胀。4mmol/L磷组GJIC的荧光扩散距离减弱,1、2mmol/L磷组基本不变;就Ⅰ型胶原含量而言,除1mmol/L磷组在作用2d抑制其分泌外(P<0.05),在磷作用2、5、8d均促进其分泌(P<0.05)。结果表明,添加1、2、4mmol/L磷能促进OB的分泌Ⅰ型胶原;4mmol/L磷能抑制OB的代谢活性,且能抑制OB间通讯。     

论主体间世界

主体间世界是指行为体进行观念互动所构成的共有知识的体系,聚合着人们的理解、解释、意愿和认同,其中不乏有友善与敌意,还有规范与违抗.由于行为体的内在观念不能直接观察,但作为行为的指导会以某种外在形式表达出来,并以可以感知的形式进行互动,因此要解释主体间世界,就需要说明观念的内在属性与外在属性.主体间世界作为行为体身处其中的文化环境,对行为体有着全方位的社会化影响.在国际环境中,国家实施对外政策始终要把对自身利益的考虑同对体系的观念影响的评估结合起来.     

在复杂的形势中寻求战略平衡

2014年世界上的重大事变都可归结于深刻的渊源和广阔的背景,并显现出世界历史的重要转折。国际体系已进入深度变迁的关键阶段。这种重大发展和变化,可为中国的和平崛起提供新的有利条件,因为变化构成机会。自鸦片战争以来的170多年间,中国终于看到了重回世界舞台中心的可能前景,在实力不断增强的过程中,中国作为国际体系转型的重要参与者乃至塑造者,作出何种战略选择,不仅     

论国际人权条约实施的国际监督制度

国际监督制度对于人权条约的实施在实体和程序方面都具有重要的意义.国际人权条约实施的国际监督制度主要由条约机构的缔约国报告程序、缔约国间指控来文程序以及个人申诉来文程序三种国际监督程序所组成.在实践中,条约机构主要依据缔约国报告程序和个人申诉来文程序对缔约国实施人权条约进行经常性和具体的监督.国际监督制度在促进缔约国实施人权条约方面发挥了一定的作用,但仍有待进一步完善.     

《美墨加协定》的目标、原则和治理机制分析

《美墨加协定》被国际社会广泛关注,因为它很可能将深刻改变全球贸易规则。本文以世界贸易组织、《跨太平洋伙伴关系协定》作为分析参照,基于文本和历史分析《美墨加协定》试图构建的国际贸易体系的目标、原则和治理机制。《美墨加协定》属于自由政府间主义一体化,很大程度上是对世界贸易组织倡导的功能主义一体化规则的根本性颠覆。目标方面,《美墨加协定》一视同仁对待所有缔约方的利益诉求,受缔约方影响而特别重视环境与劳工保护,强调市场经济规则的一体化。而世界贸易组织由于以发展中国家的利益诉求为关注中心,导致上述两个目标在实践中被虚置。原则方面,《美墨加协定》框架下,对等原则成为缔约方遵循的基本谈判原则,最惠国待遇原则和国民待遇原则的基石地位由此得到进一步强化,公平竞争原则也得到更大的重视。而世界贸易组织框架下发展中国家特殊和差别待遇原则使得这些原则被相对弱化和边缘化。治理机制方面,《美墨加协定》不像世界贸易组织那样涉及主权让渡,不建立超主权国家机构来行使行政权、立法权和司法权,坚持契约自治,不寻求第三方提供争端解决方案。     

氯化锰对鸡支持-生精细胞凋亡及Bak和Bcl-x基因表达的影响

为探讨氯化锰(MnCl2)对鸡支持-生精细胞凋亡及Bak、Bcl-X基因mRNA表达的影响,取对数生长期鸡支持-生精细胞,用含0、2、3、4 mmol/L MnCl2的培养液培养24 h,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)检测鸡支持-生精细胞凋亡,采用实时定量PCR检测Bak、Bcl-x基因mRNA的表达量.结果显示,MnCl2处理组细胞与对照组相比,鸡支持-生精细胞凋亡指数逐渐升高(P<0.01);Bak基因的表达量上调(P<0.01),Bcl-X基因的表达量下降(P<0.01).说明MnCl2可通过改变Bak、Bcl-X基因mRNA表达量导致鸡支持-生精细胞发生凋亡.     

EZ-TAPE分段提取绳索上脱落细胞1例

<正>1案例资料1.1简要案情2014年某日黄某报案称其母亲在家去世,有财物丢失。技术人员经勘查发现死者颈部有勒痕,死因可疑。怀疑为照看死者的护工何某所为,并在何某文胸内搜出一对耳环、绳子等物品。尸体检验显示:尸体的颈部左、右侧和项部可见有明显索沟,索沟宽度为0.5cm,与嫌疑人何某身上搜出的白色尼龙编织绳的宽度相符,但绳子是否为作案工具有待进一步DNA检验。1.2 DNA检验     

当政治遇上历史:比较历史分析方法(CHA)介绍

当代西方比较政治研究由于过分迷信大样本计量统计和形式模型而忽视了许多人类社会生活中的实质性重要问题。作为一种有着深厚学术传统的研究范式,比较历史分析是部分西方学者对这一方法论危机的重要回应。相对而言,比较历史分析的研究特别致力于为大规模社会结果提供有历史深度的社会科学因果解释。它们不仅关注宏大的历史问题,而且试图为这些问题提供因果性解释;不仅运用案例间的比较确定历史问题的因果效应,同时重视案例内的分析探寻背后的因果机制;不仅热衷于追寻经济社会结果的长历史原因,同时强调历史时序的重要性。尽管国内政治学界一向擅长历史的研究,但由于缺乏规范的方法意识而鲜有比较历史分析的佳作。借助比较历史分析方法,中国学者不仅可以对本土政治问题开展跨国性的比较,同时可以整合不同研究方法的长处,繁荣中国的比较政治研究。