肺炎克雷伯菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立肺炎克雷伯菌TaqMan荧光定量PCR检测方法,根据肺炎克雷伯菌16SrRNA基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,通过反应条件优化和特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品的检测,建立了肺炎克雷伯菌TaqMan荧光定量PCR。结果显示,该方法与猪肺炎支原体、猪鼻支原体、臭鼻克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌、多杀性巴氏杆菌、链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、沙门菌、肠球菌、乳杆菌、解淀粉芽胞杆菌、猪丹毒杆菌、奇异变形杆菌和化脓隐秘杆菌共15种细菌无交叉反应;标准品浓度在2.29×109~2.29×104 copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低可检测到2.29×102 copies/μL的标准品阳性质粒;批内和批间变异系数均小于3%。临床样品的检测结果表明,该方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强和检测快速的优点,可用于肺炎克雷伯菌感染的早期诊断、样品的快速检测以及肺炎克雷伯菌的定量分析。     

从复合相互依赖理论看中国与欧盟的关系

复合相互依赖理论被公认为20世纪90年代以来主流的国际关系理论。对中欧关系进行复合相互依赖分析可以解释中欧关系目前存在的问题,并对中欧关系的未来作出预测,进而提出促进中欧关系健康发展的对策。     

我国公平竞争审查主体制度探析

在全面深化改革和全面推进依法治国的过程中,我国政府日益意识到竞争政策在经济政策中的基础性地位。公平竞争审查制度作为推行竞争政策和约束政府权力的重要举措,在我国尚处于初建阶段。审查主体制度的设计是公平竞争审查制度建构的基础和关键。公平竞争审查主体可分为法律和政策制定机构、竞争执法机构和独立的专责审查机构。结合我国实际情况并借鉴域外先进经验,我国公平竞争审查制度的建立应遵循渐进式原则,由现阶段的政策制定机构自查和备案制模式逐步过渡到最终的一元化审查主体模式。     

“国庆大阅兵”战车揭秘

阅兵是展示武器装备水平的一个重要手段,各种战车自然是国庆阅兵式上的名角。近年,解放军列装的新型坦克,多采用堡垒状外观的多边形大型炮塔,以便提供足够的空间安装性能更好的陶瓷复合装甲、电子设备和炮弹自动装填机等。     

用随意扩增的DNA多态性鉴定中国分离的部分旋毛虫虫株

以旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ）国际标准虫种作对照，利用随意扩增的ＤＮＡ多态性技术对国内的部分旋毛虫分离株进行了鉴定与分析。经５条引物的单扩增及复合扩增结果显示，中国的旋毛虫猪株为Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ，犬株为Ｔ．ｎａ－ｔｉｖａ，猫株为Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ。     

数码照相在物证鉴定中的应用初探

数码显微照相、数码红外线反射照相、数码荧光照相、数码彩色分光照相、数码影像的处理技术在文书鉴定、痕迹物证鉴定中均可得到有效应用。随着数码照相研究的不断深入,数码照相在司法鉴定中的应用会越来越广泛。     

6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建

目的为在310基因分析仪上进行6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件。方法以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500~80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的M atrix标准物,用4种M atrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的M atrix文件。结果扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰。混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系。结论建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析M atrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础。     

DYS19、DYS391、DYS439三个Y-STR荧光标记复合扩增的法医学应用研究

自Casanova(1985)和Nago(1986)分离出能识别Y-DNA的特异性探针,学术界相继开始对Y-DNA为遗传标记的群体研究[1、2].Y-DNA具有独特的特异性:(1)Y-DNA属父系遗传,父亲的Y染色体能完整传递给儿子;(2)Y-DNA遗传标记为连锁遗传,属单倍型.因此,对Y染色体的研究,是对常染色体DNA和mt DNA遗传标记必要的补充.     

用人才的复合培养复合型教育学科人才

基于对什么是复合型人才的理解,进而分析为什么要培养复合型人才以及如何培养复合型人才.通过探析我们得出这样的结论:复合型人才的培养要以人才的复合的标准来培养.     

快速PCR扩增检验体系的建立及技术指标验证

目的建立PCR快速扩增程序和体系,并对其技术指标进行验证。方法运用快速扩增酶Fast Start与DNA TyperTM15 plus primer mix组合并优化建立快速扩增体系,对50份静脉血卡和35份案例检材提取的DNA进行扩增,并对体系检测结果的准确性、稳定性和检材适应性进行验证;采用不同稀释浓度的标准品9947,采用快速扩增方法进行检测,验证体系的灵敏度。结果模板DNA浓度达到0.50ng/μL,采用快速扩增体系可能获得准确分型;扩增耗时仅为69min,比常规扩增方法明显缩短;不同种类检材,经检测均获得良好分型图谱,同一份样本重复实验结果一致、稳定。结论本文建立的快速扩增体系可显著提升检测速率,其灵敏度、准确性、稳定性、检材适用性等技术性能,可满足实际检验的需求。