胶纸粘面汗潜手印荧光显现

通过实验研究，系统阐述了JX-2微晶乳浊液显现胶带粘面上汗潜指纹的原理、溶剂性质、显现液浓度及显现方法。该方法显出的纹线荧光强度高，清晰、明亮，不受客体颜色、性质及手印遗留时间和胶带存在条件限制，附有典型胶带粘面上汗潜指纹显现的效果照片。同时也介绍了处理胶带粘面上纸张剥离及胶带自粘剥离的技术方法。     

鉴定溺死的实验研究——荧光分光光度计检测肺组织浮游生物叶绿素(a)

本实验应用荧光分光光度计检测肺组织浮游生物叶绿素(a),以期通过准确的定性、定量研究来诊断溺死。实验性研究表明本法准确可靠,选择性强、灵敏度高,不受腐败及污染等因素影响,亦不存在含叶绿素(a)浮游生物生前进入并存在于人体器官的问题。同法对2例水中尸体进行了检测,结果与实验性研究相符、提示本法可应用于实际检案。     

新血清型流行性出血病病毒荧光定量qRT-PCR与RT-PCR检测方法的建立及应用

流行性出血病病毒(EHDV)是一种严重危害反刍动物的虫媒病毒.目前世界范围已发现9种血清型的EHDV,2018年笔者在云南芒市新分离到1株新血清型EHDV毒株(YNDH/V079/2018),但尚缺乏该血清型的特异性检测方法.本研究建立了新血清型EHDV核酸检测的实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和RT-PCR...     

猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用

为了建立猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis）快速荧光PCR检测方法,本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒,根据该基因设计荧光PCR引物和探针,并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别猪鼻支原体基因组外,对猪的基因组和猪常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性试验中,该方法对猪鼻支原体的检测限为1 000copies/m L,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测临床样本,阳性检出率为76%(38/50),远高于普通PCR的阳性检出率（40%,20/50）。上述结果表明,本研究建立的荧光PCR方法在特异性、敏感性和稳定性方面均满足猪鼻支原体的临床检测要求,可以用于猪鼻支原体临床样品的检测。     

中蜂囊状幼虫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立与应用

通过RT-PCR方法在云南中华蜜蜂体内检测中蜂囊状幼虫病毒(CSBV),该病毒主要以AmSBV-YN(GenBank ID:KX819276.1)病毒株的形式存在。为了精确鉴定、快速检测中蜂囊状幼虫病毒,根据AmSBV-YN的CDS保守区域,设计合成特异性引物并建立相对应的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法。结果显示,该方法的标准曲线循环域值(C_t)与标准品模板浓度在2.34×10²～2.34×10⁹copies/μL间的线性关系良好,相关系数R²为0.994,斜率为-3.118。该方法与蜜蜂残翅病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂以色列急性麻痹病毒不发生交叉反应,表明该方法特异性强;重复性评价结果显示,批内与批间的变异系数均小于3%。所建立的荧光定量PCR方法对中华蜜蜂样品的检测结果显示,阳性率达90.0%,高于常规PCR方法的检测阳性率73.3%,说明该方法具有良好的适用性。结果表明,该方法可应用于对中蜂囊状幼虫病毒的快速检测,为中蜂囊状幼虫病的及时防控提供了有力的技术支持。     

ASFV和PRRSV多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

为了建立一种可同时精准、快捷鉴别检测非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法,本研究选择猪源β-actin为内参基因,根据ASFV的P72基因及PRRSV的ORF6基因设计特异性引物及TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了ASFV和PRRSV多重TaqMan荧光定量PCR检测方法,对该方法的特异性、敏感性、重复性进行验证,并初步应用于临床样品的检测。结果显示,该方法可在45 min内完成对ASFV、PRRSV及猪源β-actin基因的特异性扩增;对ASFV、PRRSV及猪源β-actin标准品模板的最低检测拷贝数分别为7.87×10¹ copies/μL、1.19×10² copies/μL和5.99×103copies/μL,同一模板的3次重复试验的组内及组间变异系数均小于2%;用该方法检测92份临床样品,未检出ASFV,检出19份PRRSV阳性样品。结果表明,本研究建立了一种可快速鉴别检测ASFV及PRRSV的多重荧光定量PCR方法,较普通PCR敏感性高10³倍,可应用于ASFV和PR...     

开拓汗潜手印显现的新领域

系统论述了JHF-系列荧光粉末和JHC-系列荧光磁性粉显现汗液指纹的理论基础和主要特点,比较了与金属粉末显现手印的不同效果,列举了在不同客体和不同留痕条件下显现的汗潜手印的方法.     

自动红外荧光扫描技术检验非漏型激光打印文字朱墨时序的研究

在文件检验中,激光打印文字朱墨时序检验一直是文检界的难题之一,研究利用自动红外荧光扫描技术研究非漏型激光打印文字与印文交叉部位色料的荧光特性变化规律来判定激光打印文字朱墨时序。实验使用VSC8000文件检验工作站的自动红外荧光扫描功能,自动确定激光打印文字与交叉部位红外荧光反差最大的激发和截止滤光片组合,观察、分析、比较和归纳两种时序下的荧光现象。实验结果是先朱后墨,印文笔画荧光不完整,交叉部位笔画出现点状弱荧光;先墨后朱,印文笔画荧光连续,交叉部位笔画易出现片状强荧光。结论为利用自动红外荧光扫描技术可以快速准确判定非漏型激光打印文字与荧光特性强的印文时序,为快速准确鉴别此类可疑文件朱墨时序找到新路径。     

结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立

根据结核分枝杆菌23SrRNA基因序列和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了2对针对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重实时荧光定量PCR检测方法,并对建立的方法进行敏感性、特异性测定和临床样品检验。结果显示,该方法特异性好,能区分不同模板浓度组合的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;可检测到10copies模板的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;对保存的50份PPD检测阳性牛的鼻黏液、牛乳和淋巴结进行检测,结果6份结核分枝杆菌阳性,1份牛分枝杆菌阳性,其余均为阴性,与PCR的检测结果一致。由此可见,建立的二重实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、可定量检测等优点,适合用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测。