疑难解答

问：“如果电子束不截至对屏幕荧光涂层轰击，情况会怎样?”答：会有多种情况。     

死亡人体组织中rRNA亚基的稳定性及影响因素评价

目的探讨人尸体组织中rRNA亚基表达水平的稳定性及影响因素。方法选取3例成人、3例婴幼儿大脑皮质和脾组织,在尸检即刻、48、72、96、120、144、168、192、216、240h,采用实时荧光定量RT-PCR法检测5s、5.8s、18s、28s rRNA的表达水平。结果两个年龄组两种组织中4种rRNA亚基表达量相比较均显示有差异(P0.05)。同种组织比较:脑组织中两个年龄组最后一个时间点与第一时间点4种rRNA亚基的表达量均有差异(P0.05),其他各时间点与第一时间点无显著性差异(P0.05);脾组织中婴幼儿5s rRNA在最后一个时间点,其余3种rRNA亚基最后两个时间点与第一时间点比较有差异(P0.05);成人5s rRNA最后一个时间点,5.8s rRNA亚基最后两个时间与第一时间点比较差异(P0.05),其余两种亚基各时间点与第一时间点相比较均无差异(P0.05)。结论尸体组织中rRNA亚基表达稳定性好,适于作为晚期死亡时间推断的内参基因使用,但需注意指标、组织和年龄段差异性。     

XPG基因表达用于法医学年龄推断

目的探讨着色性干皮病G组(xeroderma pigmentosum group G,XPG)基因在不同年龄段健康汉族人群中的表达情况,分析XPG mRNA和蛋白表达量与年龄之间的相关性,以期为法医学年龄推断提供新的分子生物学指标。方法收集150名不同年龄段健康汉族人的外周血样,采用TRIzol法提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,通过实时荧光定量PCR检测XPG mRNA在PBMC的相对表达量,酶联免疫吸附试验检测XPG蛋白在血浆中的表达量。结果 XPG mRNA及其蛋白表达量在≤18岁组与19~45岁组之间、≤18岁组与≥46岁组之间的差异均有统计学意义(P0.05),但19~45岁组与≥46岁组之间的差异无统计学意义(P0.05)。XPG mRNA和蛋白表达量均无性别差异(P0.05)。结论 XPG mRNA在PBMC的相对表达量在低龄段内随年龄增加而下降,其血浆中蛋白随年龄增加而升高;XPG基因有望成为法医学年龄推断的新型指标之一。     

502胶熏显手印的Ardrox荧光染色技术研究

目的 探究在常见塑料材质、玻璃等非渗透性客体上,502胶熏显后用Ardrox荧光液染色显现潜在手印方法。方法 收集12种常见塑料材质、玻璃等非渗透性客体,用Ardrox荧光液染色与罗丹明6G、BBD、龙胆紫进行显现潜在手印对比实验。同时测试Ardrox荧光液染色最佳遗留时间,采取控制变量,改变单一变量,选取显现效果最好的锡箔纸作为实验检材,分别在遗留1、3、5、7、15 d后进行显现。结果 在大多数常见塑料材质、玻璃等非渗透客体上,502胶-Ardrox荧光液显现效果优于罗丹明6G、BBD和龙胆紫,在锡箔纸、黑塑料袋、易拉罐上效果最好;在浅色客体或深色客体上,Ardrox荧光液均能取得很好的显现效果,光盘上的显现效果不佳。最佳遗留时间测试结果表明,Ardrox荧光液显现指纹,遗留15 d以内的样本都可以很清晰的显现出来,超过15 d,显现效果明显减弱。结论 502胶-Ardrox荧光液显现法显现率高、荧光强。     

猪博卡病毒5型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据猪博卡病毒5型NS1基因序列设计引物,建立了基于SYBR GreenⅠ的用以检测猪博卡病毒5型的实时荧光定量PCR。用该方法检测猪博卡病毒5型NS1基因,在3.64×102~3.64×107 copies/μL范围内有很好的线性关系。扩增产物的熔解曲线仅出现单一特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.12±0.12)℃,对猪圆环病毒(PCV1和PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪输血传播病毒(TTV1和TTV2)的核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.35%~1.24%,组间变异系数为0.43%~1.46%。此方法的建立为定量分析猪博卡病毒5型感染猪的感染程度和靶器官提供了精确检测手段。     

LHR在牦牛肾和卵巢中表达情况的研究

为了探讨牦牛肾中黄体生成素受体(LHR)的表达情况,分析肾中LHR与卵巢中LHR表达的相似性,选取青海省健康的3头2岁龄雌性牦牛,根据黄牛LHR基因序列5′端和3′端的保守性设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测牦牛肾和卵巢组织中LHR基因的表达量,并运用免疫组织化学法对LHR蛋白在牦牛肾和卵巢组织中表达情况进行定位研究。RT-qPCR结果显示,牦牛肾组织中LHR mRNA的相对表达量是卵巢的79.75倍。免疫组织化学结果显示,LHR在牦牛肾组织的近曲小管和远曲小管呈阳性反应,在卵巢组织中卵泡颗粒层呈明显的阳性反应;LHR在牦牛肾和卵巢中的表达量之间差异极显著(P0.01)。结果表明,牦牛的肾组织与卵巢组织一样,均具有表达LHR的特性,提示肾可通过调节LHR参与牦牛的繁殖性能。     

干扰素压力下传代的猪繁殖与呼吸综合征病毒对ISG56转录的影响

为探究猪干扰素-β(swIFN-β)加速猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异是否对病毒致病机制存在影响,将PRRSV GD07在干扰素压力下传代至第70代,同时构建SYBR Green实时荧光定量PCR方法,研究干扰素压力下传代毒株(PRRSV GDβfn)、自然条件下传代毒株(PRRSV GDfn)和原代毒株(PRRSV GDf1)等对干扰素诱导基因56(IFN-stimulated gene-56,ISG-56)转录的影响。结果显示,PRRSV能够抑制由干扰素诱导产生的ISG56的转录,其抑制能力大小依次为PRRSV GDβf20PRRSV GDf20、PRRSV GDβf50PRRSV GDf50、PRRSV GDβf70PRRSV GDf70;不同代次之间PRRSV GDf1PRRSV GDf20/PRRSV GDβf20PRRSV GDf50/PRRSV GDβf50PRRSV GDf70/PRRSV GDβf70。结果说明,构建的荧光定量方法能够检测出不同PRRSV毒株在抑制ISG56转录上的差异;随着在细胞上传代次数的增加,PRRSV GDβfn和PRRSV GDfn对ISG-56转录的抑制能力均逐渐减弱;在同一代次中,PRRSV GDβfn对ISG-56转录的抑制能力要强于PRRSV GDfn。     

荧光试剂对502胶熏显过的汗潜指纹的染色效果比较

如何准确地发现、提取犯罪现场的潜在手印已成为我们利用指纹技术破获案件的关键。本文将阐述应用荧光试剂染色经"502胶"熏显后的各种客体表面的汗潜指纹的原理、方法、效果比较以及利用荧光磁性粉末显现不同客体上的汗潜指纹的操作方法、基本原理、效果比较及拍照固定的方法。实践证明荧光试剂和荧光磁性粉末在对各种客体上汗潜指纹进行染色和显现时方法简单、可靠、效果比对明显。不受手印遗留时间和遗留条件的限制,且性价比高,具有很好的推广前景。     

利用反射荧光显微镜判定文件上的朱墨先后顺序

本文根据实验结果,得出使用反射荧光显微镜（用BV激光法）,可以正确判定书写材料上朱墨先后顺序,而且对检材没有任何损坏的结论。     

猪瘟病毒胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

为建立一种猪瘟病毒的快速检测方法,采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金,选择15 nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体,对胶体金标记抗体采用低温超速离心法进行纯化,组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测,同时用直接荧光抗体试验和RT-PCR做平行试验。结果显示,用试纸条检测猪瘟病毒,10 min左右即可显示结果,试纸条、直接猪瘟荧光抗体试验和RT-PCR的阳性检出率依次为36.36%(4/11)、45.45%(5/11)和72.72%(8/11)。表明,用胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟病毒操作简便,需时短,可以用于猪瘟的流行病学调查。