实时DNA定量技术的应用研究

通过应用TaqMan探针法和SYBR Green荧光染料法对常见的法医生物学检材进行DNA定量,对实时荧光定量PCR技术用于法庭科学样品定量检测的适用性进行研究。实验结果表明,该技术在DNA定量及抑制因素评估等方面具有重要的法医学应用价值。     

复合扩增18个基因座的初步研究

目的建立五色荧光18个基因座的复合扩增检验体系。方法设计、合成引物,通过调整引物浓度和复合扩增条件,建立起五色荧光复合扩增体系,包含Amelogen、D6S1043、D21S11、D7S820、CSF1PO、D2S1338、D3S1358、D13S317、D8S1179、D16S539、PentaE、TH01、TPOX、PentaD共计18个基因座。结果该复合扩增系统检验结果稳定,分型准确。结论五色荧光18个基因座复合扩增系统构建成功。     

猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建

采用PCR方法克隆了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,将构建的重组质粒pMD-ORF2作为PCV2实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标准阳性模板,并对该模板进行了酶切及测序鉴定。结果显示,此模板特异性强,稳定性好,-20℃保存20 d无显著变化;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的pMD-ORF2标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104,其变异系数分别为2.527%、2.067%和2.092%。表明,以此模板进行FQ-PCR具有良好的准确性和重现性。该模板的检测线性范围宽,当稀释度为1.0×109~1.0×105拷贝/μL时,相关系数r=-0.989。     

Identifiler体系在单亲血缘关系鉴定中应用价值的研究

目的研究16基因位点Identifiler体系在单亲血缘关系法医鉴定中的应用价值. 方法对无关个体中随机抽样组成的假设父-子二联体100例、正常人群中已知真父-子二联体100例及已知非父-子二联体100例、实际单亲血缘关系亲子鉴定案228例、特意省去母亲的二联体鉴定案136例,应用Identifiler体系的16基因位点进行检测,得出每案例的RCP值,将检测结果同应用其他体系检测的结果比对,同三联体检测结果比对,同真实情况比对,计算出单独使用Identifiler体系在单亲血缘关系法医鉴定中的正确率. 结果对228例单亲鉴定案应用Identifiler体系检测的结果,同应用Profiler Plus和Cofiler两个体系再加用24个其他位点银染检测(共37个位点)的结果完全相同;对无关个体100例及真父-子二联体100例及非父-子二联体100例,用Identifil er体系检测的结果同调查核实的真实情况完全相符;对136例特意省去母亲的二联体案,用I dentifiler体系检测的结果同原实际检案中三联体检测的结果完全相同. 结论 单独使用Identifiler体系完全可以解决法医亲子鉴定中的单亲血缘关系鉴定问题.     

用多波段光源配合荧光溶液拍摄被碳素墨水掩盖的文字

碳素墨水掩盖字迹的显现是刑事技术工作中的一个常见难题。由于碳素墨水中含有的碳黑对可见光和红外线有很强的吸收,通常的利用书写物质本身光致荧光的照相显现法效果不佳,适用范围也有限。有人提出用激光和荧光溶液配合显现墨汁涂改文字,取得良好效果,但激光器在基层公安技术部门尚未普及,推广应用有一定难度。本文提出用荧光溶液结合多波段光源和CCD摄像机进行拍摄显现的方法,经实验证明该方法操作简便,效果好、效率高,具有较高的实用价值。     

木地板上的手印及其发现与提取

木地板表面一般比较光滑、干净,为手印的遗留及其发现与提取提供了有利条件。在一些特定情况下,作案人常在木地板上留下各类手印,现场勘查时要根据木地板的种类、表面特性、遗留手印的类型及特点的不同,采用相应的方法对木地板上手印进行发现与提取,提高木地板上手印的利用率。     

血手印显现新技术研究

血手印是杀人案件现场较为常见的一种痕迹,痕检技术人员经过多年的实践和研究,已总结出了很多行之有效的方法,但普遍存在适用范围不够广泛,手印纹线易扩散破坏,深色客体显出手印受背景干扰反差弱等问题。血手印显现新技术除了能解决上述问题外,还具有灵敏度高,抗干扰性强,手印显现失败后能够及时补救等优点,因而具有广阔的应用前景。     

荧光染料掺入PCR检测STR基因座多态性的研究

目的研究荧光染料掺入PCR检测STR基因座多态性。方法 利用荧光染料掺人PCR扩增技术,测定FABP、CYP19、FOLP23、MBP、DYS19五个基因座的梯阶片段长度,将带有荧光标记物的dCTP通过PCR反应加入到目的片段PCR产物中,通过PE 377 DNA测序仪分离和基因扫描软件分析。结果 获得了清晰、准确的图谱,计算出各基因座中核心序列的重复次数,并按照ISFH标准对各基因座命名。结论 该方法具有灵敏度高、结果客观准确、操作简便、产物定量等优点,在新基因座开发和法医鉴定实践中具有较理想的应用价值和发展前景。     

用双色荧光原位杂交技术鉴定血痕性别

目的 探讨荧光原位杂交技术在血痕性别鉴定中应用及其价值。方法对20例新鲜人血及20例1-2年人血痕的X、Y染色体采用双色荧光探针进行原位杂交分析。结果 人新鲜血,男性X、Y信号检出的完整率为98.8％,其中Y信号的检出率为100％,女性X、X信号检出的完整率为96.5％;1-2年人血痕,男性X、Y信号检出的完整率为88％,其中Y信号的检出率为90％,女性X、X信号检出的完整率为80％;40例血液(痕)性别检测的符合率为100％。结论双色荧光原位杂交技术可以鉴定血痕性别。