猪瘟荧光抗体的制备及应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟血清中提取免疫球蛋白 ,应用搅拌法标记荧光素 ,硫酸铵盐析、SephadexG 2 5层析和肝粉吸收三法结合去除标记物之游离荧光素 ,制备猪瘟荧光抗体。经测定 ,标记的荧光抗体工作稀释度为 1∶16～ 1∶32。用标记的荧光抗体诊断猪瘟 ,从 39份可疑病料中检出阳性病例 12份。     

沙门菌和副溶血性弧菌双重荧光PCR快速检测方法的建立

根据沙门菌invA基因和副溶血性弧菌toxR基因的保守序列设计引物和探针,通过优化反应条件与参数,建立了可同时检测沙门菌和副溶血性弧菌的双重荧光PCR方法.结果显示,该方法敏感度高,特异性强,重复性好.对沙门菌和副溶血性弧菌的检测低限均低于每反应体系10CFU,经对29株非目标菌进行检测均呈阴性,而定量检测批内和批间的变异系数均小于2%;应用该方法检测人工染菌样品和实际样品,结果与SN标准方法的检测结果一致;应用该法可在8h内完成对样品中沙门菌和副溶血性弧菌的同步检验.     

鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的建立及其应用

应用鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）作免疫原建立了８株分泌抗ＩＬＴＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株。这８株ＭｃＡｂ均具有荧光抗体的特性，没有中和病毒的能力，分１４属于ＩｇＧ２，ＩｇＧ３和ＩｇＭ。应用异硫氰酸荧光素标记ＭｃＡｂ，建立了直接荧光抗体试验，用其检测ＩＬＴＶ抗原与分离病毒的符合率为９２．８％。     

腺病毒载体与慢病毒载体介导EGFP基因转染犬骨髓间充质干细胞效果的比较

为了比较携带增强型绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体与慢病毒载体转染犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)的效率及其对细胞增殖能力的影响,采用全骨髓贴壁法分离培养犬BMSCs。用两种病毒载体分别按不同的感染复数(MOI)转染BMSCs,72h后荧光显微镜下观察,计算转染效率,并用MTT法检测两种病毒载体对BMSCs增殖能力的影响。结果显示,两种病毒载体随着感染复数的增加,对BMSCs的转染效率逐渐增大,对细胞增殖能力的影响也逐渐增加。MOI分别为25、50、100、200、400时,腺病毒载体的转染效率分别为11%、17%、32%、51%、65%,慢病毒载体的转染效率分别为48%、70%、91%、98%、99%。与空白对照组相比,腺病毒载体在MOI=200、慢病毒载体在MOI=400时对BMSCs增殖有显著影响(P0.05)。结果表明,慢病毒载体在不影响细胞增殖能力的感染复数范围内,对犬BMSCs的转染效率明显高于腺病毒载体。     

新版记者证介绍

2014年,新版新闻记者证全新亮相。新版新闻记者证,长107毫米,宽77毫米。外观设计,充分体现国家证件的严谨庄重;材质用料,完全符合采访工作的特殊需求;防伪技术,严格执行最高规格的印刷装订标准。方寸之间,7大创新设计让造假者无机可乘。创新设计1——个性化水印防伪纸张。记者证用纸采用暗藏有SAAARFT标识的水印专用纸,暗含有色荧光纤维,并埋有红色荧光安全线。创新设计2——紫外红色荧光防伪。整本记者证有三处红色标识,一是地图上首都位置的红色五角星,二是国家新闻出版广电总局印章,三是记者证核发专用章。用紫外光照射时。     

荧光检验法在朱墨时序鉴定中的应用研究

朱墨时序鉴定一直是文书司法鉴定实践中常见的鉴定项目,也是研究的热点和疑难问题.通过实验研究并结合检案实践,较系统地阐述了视频荧光光谱检验法和显微荧光检验法在朱墨时序鉴定的具体应用,探讨了荧光检验的技术要点.研究表明,荧光检验法（特别是显微荧光检验法）具有普通显微检验法的优点,同时对普通显微检验法中难以观察到的印文或文字色料荧光特性及色料的微观分布状态,具有明显的检验效果,是普通显微检验法有效的补充检验手段.     

塞内卡病毒A SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

为深入研究塞内卡病毒A的病原学及流行病学,本研究分离获得了 1株塞内卡病毒A的重庆地区毒株并将其命名为SVA-XN2021.针对VP1基因,设计了 1对特异性引物,将SVA-XN2021株编码区克隆入载体pcDNA3.1(+),构建了以重组标准阳性质粒pcDNA3.1(+)-SVA为模板的SVA的SYBR Green ...     

《法医学杂志》常用主题词（四）

正~~     

猪流行性腹泻病毒SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

参考GenBank上登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)株的ORF3基因序列保守型片段设计特异性引物,建立了检测PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。在4.32×102～4.22×107copies范围内,它有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增效率为99%,扩增产物的熔解曲线只出现1个特异峰,无引物二聚体,熔解温度为82.23℃±0.19℃。它对传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒均检测不到荧光信号,表明其特异性强。该方法的组内变异系数为0.05%～0.87%,组间变异系数为0.32%～1.24%,重复性好。结果表明,建立的SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR为PEDV早期感染的诊断及定量分析提供了新的方法。