国产24通道法医遗传分析仪的研制

采用单波长固态长寿光纤分束激光器作为激发光源,基于激光诱导荧光检测和STR复合扩增技术,研制了首台国产24通道法医遗传分析仪,型号GA118-24B。该仪器满足24通道毛细管阵列空间校正功能需求,成功创建了DS-33和DS-36光谱校正文件,对Allelic Ladder、内标等标准品以及阳性对照9947A的复合扩增产物进行电泳检测,检测结果准确无误,分辨力达到1bp,可用于法庭科学的案件检测和数据库建设。     

毛发中痕量毒品快速检测技术解析

目前针对吸毒人员快速排查的生物检测样本主要有尿液、唾液和毛发。与尿液和唾液相比,毛发检材具有性质稳定、取材方便、易于保存、检出时限长、适用范围广、污染机会少等优势。毒品在毛发中的代谢较慢,检测窗口期长可达到半年,对取样过程便于监督,可防止检材被掺假或调换。目前毛发中痕量毒品快速检测技术主要有酶联免疫(ELISA)、胶体金、时间分辨荧光免疫层析和量子点免疫层析技术。从技术和实际应用的角度对上述技术特点进行了分析比较。     

体液法医学鉴定miRNA检测方法的建立与应用

目的建立针对体液特异性miRNA的SYBR Green检测方法,用于体液鉴定,探究法医实践中体液鉴定新方法。方法根据文献选出6条miRNAs为靶点,以合成的标准miRNA作为模板进行体系构建,再对实际样本进行验证,检测6条miRNAs在外周血、月经血、唾液、精液中的相对表达量。结果 miRNAs205在不同体液间表达差异不明显;miRNAs451、miRNAs144可明显的区分血与非血;miRNAs214可鉴定月经血;miRNAs888、miRNAs891在精液中高表达。结论建立的针对miRNAs的SYBR Green检测方法合理有效,可用于法医实践中体液鉴定。     

实时荧光定量PCR检测硅藻UPA基因在溺死诊断中的研究

目的建立硅藻UPA条形码基因的实时荧光定量PCR检测方法,探讨其在溺死诊断中的应用价值。方法对Gene Bank中登录的硅藻UPA基因序列进行比对获得同源序列,据其设计硅藻门通用引物。对2种人体常见共生菌(大肠杆菌、双歧杆菌)、3种浮游细菌、15种浮游藻类、32具尸体(其中生前溺水死亡28例,死后抛尸1例,陆地死亡3例)的组织样本(肺、肝、肾)及尸体发现地水样提取DNA,采用设计的引物进行特异性、灵敏度、重复性试验,分析检材中硅藻检出情况,统计硅藻阳性率,以上述组织样本的微波消解-真空抽滤-自动扫描电镜法检测结果对建立的q PCR检测方法进行比较评估,比较该方法与PCR-毛细管电泳检测法的灵敏度。结果引物UPA99仅对硅藻标准株(针杆藻、舟形藻、直链藻、小环藻、菱形藻)DNA具有扩增,扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温度为(87±1)℃。以p MD18-T重组质粒为标准品,检测区间为1.56×10~2-1.56×10^-5ng/μL,建立实时q PCR方法的灵敏度为1.56×10^-5ng/μL,而PCR-CE方法的灵敏度为1.56×10-3ng/μL。批间及批内变异系数均低于2%,具有较高的重复性和稳定性。对于生前溺水尸体肺、肝、肾的检出率依次为89.3%,71.4%,64.3%。结论基于硅藻UPA基因设计通用引物,建立的q PCR硅藻检验法特异性高、灵敏度高、重复性好,应用于溺死诊断具有较好的应用前景。     

H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及其应用

采用活病毒免疫,常规杂交瘤融合的方法,获得了4株针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/duck/Shandong/093/2004(A/D/SD/04)株血凝素(HA)的单克隆抗体A8E8、D2F8、A8C8和C3G4。其中A8E8可以与11株不同来源的H5N1AIV发生交叉免疫抑制性反应(HI),具有广谱性。采用间接免疫荧光试验(IFA),用A8E8单克隆抗体测定A/D/SD/04株对COS1和MDCK2种细胞的半数感染量(TCID50),结果显示,A/D/SD/04株在COS1上的TCID50为10-5.33/0.1mL,在MDCK上的为10-7.33/0.1mL。将编码A/D/SD/04株的HA基因质粒与PR8质粒共转染COS1细胞后,用A8E8进行IFA,能观察到特异性绿色荧光,这与鸡胚接种结果相符。表明,用此单克隆抗体能准确地检测到H5重组病毒。     

烧骨DNA检验技术的研究

目的解决陈旧性骨骼和烧骨DNA检验难题。方法研究建立了CTAB法裂解提取DNA,再用磁珠纯化得到的DNA提取液进行STR复合扩增检验。结果实验结果及实际检案显示研究所建立的骨DNA提取方法能较好地去除DNA扩增抑制物,得到高质量的DNA模板。结论本研究所建立的烧骨DNA检验方法其识别率为10×10-12,达到个人同一认定的目的,在解决实际工作中杀人焚尸案、火灾、爆炸等恶性案件和事故中有重要的作用。     

被墨汁等涂抹掩盖字迹的荧光显现法

荧光物质溶液中杂质的含量多少，对其产生的荧光强弱有较大影响。据此，本文阐述了如何显现被墨汁、碳素墨水、绘图墨水掩盖的同种书写材料所写字迹。     

多波段光源在指印照相中的应用

多波段光源是近几年才研制出来的一种新型的警用光源,它的出现使刑事检验照相提高到了 一个新的水平。了解多波段光源的性能、在指印照相中的应用、利用多波段光源拍照指印的关键以及使用过程中应该注意的问题,可以更广泛地运用推广这一新技术。     

无色荧光素血潜印痕显现技术

无色荧光素,可以作为血潜印痕显现试剂,能够与血潜印痕反应产生荧光,其敏感程度接近鲁米诺,且产生荧光持续时间长于鲁米诺。该法不但适用于实验室检材处理,而且适用于室外现场大面积血潜印痕检测,有利于命案现场的重现与分析。该试剂已应用到临床医学30年,未见致病迹象,能够作为血潜印痕的检测试剂,有着极大推广和实用价值。     

荧光光谱法鉴别原子印油

本文应用荧光光谱法，对不同厂家生产的原子印油进行分析，选择了较佳的实验条件，讨论了各种外界因素对测定的影响，达到了区分不同厂家产品的目的。