耐环丙沙星沙门菌marA、soxS和ramA基因以及外排泵基因acrA和acrB的表达水平分析

应用实时荧光定量PCR法对11株鸡源环丙沙星诱导耐药沙门菌和11株人源临床环丙沙星耐药沙门菌的调控基因marA、soxS、ramA和外排泵基因acrA、acrB的mRNA表达水平进行了检测和分析.结果表明,11株诱导株与诱导母株相比,marA、soxS、acrA和acrB的mRNA表达量均显著增加(P＜0.05),ramA表达量未增加;11株人源临床耐药株与标准菌株相比,marA、acrA和acrB的表达量显著增加(P＜0.05),soxS和ramA的表达量未增加.提示,鸡源诱导株AcrAB过表达与marA和soxS过表达相关;人源临床株AcrAB过表达与marA过表达相关,而与soxS和ramA表达不相关.     

重庆地区部分牛和猪外周血博尔纳病病毒自然感染的调查

采用荧光定量巢式实时逆转录聚合酶链反应检测了重庆地区牛和猪各50例外周血单核细胞中博尔纳痛病毒(Borna disease virus,BDV)p24基因片段,并对其进行BDV p40基因片段的检测以确保结果的可靠性.检出的阳性序列与GenBank中5个国家4个动物种属25例BDV p24基因序列进行比对,分析其核苷酸和氨基酸序列的同源性,重建基因系统发生树.结果显示,3例牛和2例猪血标本BDV p24检测呈阳性,阳性率分别为6.00%和4.00%;5例标本BDV p40片段检测均为阳性,其余标本均为阴性;BDVp24扩增产物序列与BDV标准病毒株He/80的同源性为100%,与H1766和Strain V相比,变异程度小,所编码的氨基酸序列亦无变化;从发生树可以看出,5例BDV p24片段序列汇聚德国-瑞士-奥地利-日本-重庆混合支系.提示,重庆地区牛和猪中可能存在BDV的自然感染,其流行株可能源于外来疫病病原的传入.     

牛传染性鼻气管炎病毒和牛副流感病毒3型的双重荧光PCR方法的建立及应用

为建立同时检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）和牛副流感病毒3型（BPIV3）的方法,通过对引物和探针筛选、反应体系和条件优化,成功建立了检测IBRV和BPIV3的双重荧光定量PCR方法。该方法只能特异性地检出IBRV和BPIV3,而对其他无关病原均不能检出;批内和批间变异系数均小于3%;对IBRV和BPIV3质粒标准品的检测下限分别为15.2 copies/μL和18.3 copies/μL。用建立的方法对采自四川、重庆、河北、安徽和吉林这5个地区的143份肉牛呼吸道疾病综合征(BRDC)样本以及四川省和青海省的59份牦牛BRDC样本进行检测,结果显示,肉牛样本中IBRV和BPIV3的阳性率分别为42.66%和39.86%,混感率为22.38%;牦牛样本中IBRV和BPIV3的阳性率分别为44.07%和30.51%,混感率为18.64%。上述结果表明,本研究建立的双重荧光定量PCR方法具有特异性和稳定性好、灵敏度高的特点,适用于临床上对IBRV和BPIV3的快速检测,临床样本的检测结果丰富了国内IBRV和BPIV3的流行病学资料。     

多波段光源在纸张上指纹检验中的应用

纸张上的指纹的提取在很多经济案件、敲诈勒索案件当中是非常重要的破案手段,但是由于指纹本身的成分、纸张材料等因素的影响,往往很难清晰、有效的提取。纸张上指纹难提取从某种意义上说,就难在一个“光”上。包括光源、光特性、光照角度、光强度等。通过实验,我们运用分光光度计测量纸张、荧光粉末、油类和血液的荧光激发和发射光谱图,通过其中的比较来     

猪乳头瘤病毒荧光定量PCR检测方法的建立

为建立可以快速检测猪乳头瘤病毒(SsPV)的方法,根据SsPV E2基因的保守序列设计引物,利用普通PCR方法扩增SsPV E2保守基因片段,将其克隆到pMD18-T载体,构建重组质粒pMD18-T-SsPV作为标准品质粒,经实时荧光定量PCR(qPCR)条件优化后,进行特异性、灵敏性和重复性试验。结果显示,所建立的qPCR方法在7.2×10¹～7.2×10⁸ copies/μL模板浓度区间内与Ct值呈现良好的线性关系,检测下限为7.2×10⁰copies/μL,灵敏度比普通PCR高100倍;与猪德尔塔冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪捷申病病毒、猪圆环病毒2型、猪圆环病毒4型无交叉反应;该方法组内变异系数和组间变异系数均小于2.0%;对44份猪皮肤组织样品进行检测,检测阳性率为2.27%,普通PCR检测阳性率为0%。综上所述,本试验成功建立了SsPV qPCR检测方法,为SsPV的快速检测提供了可靠方法。     

血潜手印荧光显现新方法

本文从显现原理、操作方法、显现效果及试剂特点等方面对JX—X系列荧光试剂显现血潜手印新方法做了详细论述,旨在改进血手印显现方法,提高现场血手印的显现率。     

转换发光材料显现指纹技术的现状及展望

上转换发光是指长波长的光辐射转换为短波长的光辐射的过程。对非渗透性客体上背景有荧光或图案花纹干扰的手印显现,是实际案件中经常遇到的难题,常规荧光显现方法效果较差,而上转换发光对此有巨大的潜力。对上转换发光材料在疑难背景上手印显现的原理、条件、现状以及未来发展方向进行了系统的阐述。     

Lumicyano试剂一步式荧光有效熏显潜在手印新技术的研究

介绍一种最新Lumicyano试剂显现潜在手印方法,可一步完成荧光着色熏显,显著优化传统"502"手印显现应用,通过系列比对实验验证了其有效性。该方法首次实现"502"黏胶与荧光染料的无缝结合,溶质沸点、蒸腾时间协调一致,有效解决背景干扰、纹线浅淡、对比度低等问题,无需后染色,避免了染显冲刷、浸泡及粘附对印痕特征破坏的风险,切实提升现场关键痕迹物证提取率,为公安基层实践提供新思路。目前,国内尚无引进及使用该方法的报道。     

猪附红细胞体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立一种能定性与定量检测猪附红细胞体的方法,根据GenBank中猪附红细胞体的16SrRNA基因高度保守区设计了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了一种快速检测猪附红细胞体核酸载量的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该检测方法在107～101 copies/μL具有良好的线性关系(RSq=0.999)。能检测到模板的下限为30copies,灵敏度是普通PCR检测方法的100倍。该检测方法与其他猪常见病病原体无交叉反应,具有良好的重复性。对临诊疑似猪附红细胞体感染猪血液进行了检测,其检出率比常规PCR方法高10%。表明该方法可用于临床上猪附红细胞体的检测及定量分析。     

荧光分光光度法测定缴获冰毒的纯度

应用荧光分光光度法测定缴获冰毒中甲基苯丙胺的含量的方法,是以甲基苯丙胺的最大激发波长257nm,最大发射波长282nm为检测条件进行测定.验证结果表明,该方法线性关系良好,甲基苯丙胺浓度的检测范围是1.1～ 55.0 μ g/mL,线性方程为F=27.1031·C +5.8188,相关系数为0.9992,检出限为0.825μg/mL.方法精密度、回收率均符合含量测定要求.