禽呼肠孤病毒感染鸡胚成纤维细胞后三种细胞因子基因mRNA转录水平的动态变化

为了分析禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株感染鸡胚成纤维细胞(CEF)对细胞产生的细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的影响,并探讨禽呼肠孤病毒的感染机制及病毒与宿主之间的作用关系,运用实时荧光定量RT-PCR技术,测定和分析了ARV-S1133感染CEF细胞后ARV结构蛋白σC和IL-1β、IL-6、TNF-α的动态转录水平。结果显示,ARV-S1133感染CEF后第10小时起病毒σC基因mRNA的相对表达量开始迅速上升,在第48小时达到最高峰(13 162.73倍);ARV-S1133感染后引起CEF中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达量发生变化,这3个基因mRNA的表达变化趋势相似。IL-1β、IL-6、TNF-α基因mRNA转录水平在感染早期迅速上升,在感染后第6小时达到第1个峰值,随后下降,在感染中后期再次显著上升,在第48小时达到第2个峰值。IL-1β、IL-6、TNF-α在感染后第6、24、36和48小时的mRNA转录水平与对照组差异极显著(P0.01)。结果表明,ARV感染后可诱导CEF分泌IL-1β、IL-6、TNF-α的水平上调,进而发生炎症反应,说明IL-1β、IL-6、TNF-α可能与禽呼肠孤病毒的复制和致病机制相关。     

miR-275在长角血蜱不同发育阶段及组织中表达的动态变化

根据本实验室建立的高通量测序数据库中长角血蜱miR-275的成熟体序列信息,设计出特异性茎环引物及PCR扩增引物,同时以长角血蜱β-actin基因(GenBank登录号:AY254898)为内参基因,绘制标准曲线,计算长角血蜱miR-275的标准拷贝数,采用GraphPad Prism 5软件分析miR-275在长角血蜱不同发育时期及不同组织中的表达情况。结果显示,长角血蜱miR-275和β-actin标准曲线的回归系数均大于0.99,熔解曲线峰值单一,Ct值的变异率均小于5%,表明引物特异性好,标准曲线重复性和稳定性高。用real-time PCR方法对miR-275在长角血蜱卵的不同发育时期、蜱不同发育阶段及不同组织中的表达情况进行分析。结果显示,miR-275在长角血蜱卵发育到第16天的拷贝数最大,为(13.07±1.63)×106 copies/μL,是表达量最低的第5天的43.57倍;在饱血成蜱中拷贝数最多,为(18.95±1.55)×106 copies/μL,是饥饿成蜱的236.88倍;长角血蜱卵巢中拷贝数是最高的,为(15.29±3.59)×106 copies/μL,是表皮表达量的10.47倍。结果表明,miR-275在长角血蜱卵的发育、细胞增殖、组织分化等过程中可能起到了至关重要的作用。     

新型荧光502粉末显现手印的最佳温湿度探究

目的研究新型粉末状荧光502—PolyCyano UV粉末显现手印的条件,主要从其熏显的温度和相对湿度两个方面进行。方法通过控制变量法分别确定其最佳值。结果实验研究表明,该粉末熏显手印的最佳温度为230℃,最佳相对湿度为60%～80%,具体数值与手印保留时间及客体表面性质有关。结论基于PolyCyano UV粉末的手印显现新技术,具有一步熏显、操作简便、显现时间短、用量少、无需二次染色增强、不破坏生物检材、显现效果明显等特点,适合推广使用。     

新型荧光502粉末显现手印的最佳时间探究

研究新型粉末状荧光502——PolyCyano UV粉末显现手印的熏显时间,通过控制变量的方法来确定其最佳值。实验研究表明,最佳熏显时间为10~20分钟。     

用荧光微粒悬浮液显现潮湿或粘性非渗透性客体潜在手印的研究

广东雨水多,气候较潮湿,刑侦勘查现场提取潜在手印,经常遇到各种潮湿客体,在一些侵犯人身权利的案件中,还常遇到粘性非渗透性客体(主要以胶带居多),需要提取案犯可能留下的手印。但用常规方法提取常常效果都不理想,甚至无法显现和提取,针对这问题我们探索了用荧光微粒悬浮液来显现提取潮湿或粘性物体表面潜在手印,实验表明荧光微粒悬浮液对潮湿客体和各种胶带(黄色或透明普通胶带、各种常见电工胶带、贴纸粘面等)有特别的显现效果,可以弥补粘性客体手印显现的某些不足。     

偶氮荧光桃红血足迹新型显现技术研究

目的探索一种犯罪现场上血足迹新型显现技术;方法利用偶氮荧光桃红、四丁基碘化铵酒精溶液作为血足迹显现液,研究其对渗透表面和非渗透表面血足迹的显现效果,并与四甲基联苯胺显现技术进行比较;结果偶氮荧光桃红显现液对血足迹极其敏感,显现出的足迹清晰连贯、反差明显,无颜色背景,且能够有效增强四甲基联苯胺显现后血足迹;结论偶氮荧光桃红显现液能够有效显现现场血足迹,并可作为四甲基联苯胺的后处理试剂。     

新型荧光502粉末显现手印技术的改进研究

目的 对新型粉末状荧光502显现手印的方法进行进一步探索和完善,确保其高效便捷和科学准确.方法 将PolyCyano UV粉末加热至230℃使其升华,待该粉末在手印纹线上聚合附着后用长波紫外线或蓝光激发拍照,并与初步研究结果相比较.结果 大部分非渗透性光滑客体表面上的汗潜手印均有很好的显现效果.结论 该方法使显现流程更加高效便捷、显现时间短、无需二次染色增强、不破坏生物检材,适合推广使用.     

新型荧光502粉末与502胶+荧光染色显现潜在手印的比较

目的 对新型荧光502粉末显现非渗透性光滑客体表面潜手印的一步荧光502显现新技术和传统502胶水熏显+荧光染料染色显现手印技术进行比较研究.方法 比较实验研究,对荧光502粉末和502胶水使用同一自动熏显柜先后进行熏显,荧光502粉末熏显结束后直接在蓝光灯下激发进行观察和拍照;502胶水在熏显完成和聚合物完全固化后使用罗丹明6G和BBD溶液进行荧光染色,再进行光致荧光照相.结果 一步熏显和二次染色的显现效果基本相同,但两者的显现效果也因检材性质和遗留时间的不同而存在一些差别.结论 新型荧光502粉末可以作为一种显现非渗透性光滑客体表面上潜手印的常用方法,尽管新方法对某些客体的显现效果并不好,但对大多数客体来说,其显现效果并不弱于二次染色的方法,并且使用新型荧光502粉末进行一步熏显不会引入有机溶剂,不会引起502聚合物的溶解或造成破坏,确保了纹线及其细节特征不被损坏,也避免了染色后因漂洗不当使手印纹线被冲掉的可能,还不会破坏脱落细胞等生物检材.     

新型荧光502粉末与502胶＋荧光染色显现潜在手印的比较

目的对新型荧光502粉末显现非渗透性光滑客体表面潜手印的一步荧光502显现新技术和传统502胶水熏显＋荧光染料染色显现手印技术进行比较研究。方法比较实验研究,对荧光502粉末和502胶水使用同一自动熏显柜先后进行熏显,荧光502粉末熏显结束后直接在蓝光灯下激发进行观察和拍照;502胶水在熏显完成和聚合物完全固化后使用罗丹明6G和BBD溶液进行荧光染色,再进行光致荧光照相。结果一步熏显和二次染色的显现效果基本相同,但两者的显现效果也因检材性质和遗留时间的不同而存在一些差别。结论新型荧光502粉末可以作为一种显现非渗透性光滑客体表面上潜手印的常用方法,尽管新方法对某些客体的显现效果并不好,但对大多数客体来说,其显现效果并不弱于二次染色的方法,并且使用新型荧光502粉末进行一步熏显不会引入有机溶剂,不会引起502聚合物的溶解或造成破坏,确保了纹线及其细节特征不被损坏,也避免了染色后因漂洗不当使手印纹线被冲掉的可能,还不会破坏脱落细胞等生物检材。     

FISH联用激光捕获显微分离技术对混合斑进行分离检验

目的建立荧光原位杂交(FISH)联用激光捕获显微分离技术(LCM)精确分离男女混合斑中精子的检验方法。方法收集健康志愿者精子和女性阴道上皮细胞制备模拟混合斑,经过预处理后用Vysis CEPX SpectrumOrangeTMY SpectrumGreenTM试剂盒进行荧光原位杂交,并用PALM激光捕获显微分离系统分离男、女性细胞,使用Identifiler试剂盒结合低体积扩增技术分别对男女成分进行STR扩增。结果荧光原位杂交后,可清晰分辨混合斑中的男女细胞。捕获20个精子细胞可以得到完整的STR分型,检出率为80%。随着精子数目增多,检出率提高而等位基因丢失率降低。30个精子检出率最高,为95%。结论激光捕获显微分离联用FISH技术可用于混合斑中男女细胞DNA的分离检验。