检测猪繁殖与呼吸综合征病毒及鉴别类NADC30毒株的双重荧光定量PCR方法

为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）保守区和类NADC30毒株的双重TaqMan探针荧光定量PCR方法,分别针对保守的N蛋白基因和Nsp2基因设计特异性引物和探针,通过优化反应体系及反应条件对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行评估。结果显示,双重标准曲线的相关系数（R2）均大于0.990,具有良好的线性关系;最低检测限分别为5.27 copies/μL和3.00 copies/μL,具有较高的灵敏度;不与其他常见猪病病原发生非特异反应,且重复性良好,批内批间变异系数均小于3%。对168份临床样本的检测结果显示,PRRSV总阳性检出率为68.45%(115/168),其中类NADC30检出率为32.14%,混合感染率为20.24%,与临床诊断结果相一致。结果表明,本方法可用于检测PRRSV和鉴别类NADC30毒株以及猪繁殖与呼吸系统综合征的流行病学调查。     

猴痘病毒荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种快速诊断猴痘病毒（MPXV）的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F3L(462 bp,GenBank登录号ON563414)保守区域,设计了1对特异性的引物和1条探针,建立了猴痘病毒荧光定量PCR检测方法。结果显示,本方法仅能有效检测MPXV,与天花病毒、牛痘病毒、痘苗病毒及鼠痘病毒均无交叉反应;对重组质粒标准品的最低检测限为36.5 copies/μL;组内与组间的重复试验变异系数均小于2%;该方法与中国计量科学研究院使用的绝对定量数字PCR方法检测F3L假病毒颗粒的结果一致性达100%。由此表明,本研究中建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性和实用性好,可以用于猴痘病毒的快速鉴别诊断,为口岸进境动物和入境人员的筛查提供了有效的技术手段。     

驼源性核酸多重快速荧光定量PCR检测方法的建立及检测试剂盒的研制

为准确鉴定骆驼肉乳制品,减少市场中用低价肉乳制品冒充高价肉乳制品的欺诈违法行为,保障食品安全,维护公平合法贸易,建立多重实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）快速高通量检测骆驼核酸的方法。利用多重实时荧光定量PCR法构建肉乳制品中骆驼成分检测方法,设计了哺乳动物18S rRNA基因与骆驼cytB基因的引物探针,对市面上常见肉乳制品进行检测。结果显示,本研究中针对肉乳制品的核酸提取方法不受食品添加剂影响,提取过程简便快捷高效,可于20 min之内完成提取;建立的多重实时荧光定量PCR法具有良好的特异性和灵敏度,在牛奶粉、羊奶粉、驼奶粉、骆驼肉制品、鲜猪肉和鲜骆驼肉6种样本中,成功特异地检测出骆驼成分,且在驼奶粉质量分数为30%、20%、10%、8%、5%、3%、1%和0.5%的条件下进行检测,全部成功检测出,准确度达100%。结果表明,建立的骆驼源性成分多重快速实时荧光定量PCR法可有效鉴别肉乳制品中的骆驼源性基因。     

猫传染性腹膜炎病毒实时荧光定量PCR方法的建立与应用

为建立一种高效准确检测猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的实时荧光定量PCR方法,以FIPV N基因为靶基因设计特异性探针和引物,构建质粒标准品。通过优化反应条件,建立real-time PCR方法,并进行临床检测。经方法优化,所建立方法的标准曲线为y=-3.137x+42.243,R²值为0.999,扩增效率E为108.0%。该方法与猫瘟病毒(FPV)、猫疱疹病毒(FHV)和猫杯状病毒(FCV)无交叉反应,特异性良好;检测最低拷贝数为9.250 copies/μL,比常规PCR方法高出100倍;组内、组间变异系数均小于5.0%,重复性好。采用建立的方法和EvaGreen real-time PCR方法对39份临床样品进行检测,结果,检出阳性样品数分别为24和22,经Kappa检验,两者高度一致。上述结果表明,本研究成功建立了高效、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,可用于FIPV的临床病例检测。     

荧光钙血迹蓝钠试剂增强潜在多介质混合鞋印的应用

目的研究荧光钙血迹蓝钠试剂增强潜在灰尘水渍混合鞋印、灰尘尿渍混合鞋印、灰尘血渍混合鞋印的普适性。方法采用高压微雾雾化法,雾化增强常见的8种地板上的20%w/w灰尘含量的灰尘水渍、灰尘尿渍和灰尘血渍混合鞋印,并与平面扫描提取技术相比较。结果增强后的鞋印花纹清晰,呈亮蓝色,提取效果明显优于自然光下拍照提取,略优于平面扫描提取技术。结论荧光钙血迹蓝钠试剂能够有效增强潜在多介质混合鞋印,是一种便捷高效的潜在混合鞋印增强提取方法。     

黑旋风与浪里白条

这些交警日复一日、默默无闻地站岗、执勤,没有人注意他们的存在。突然接到任务,让我带一支30来人的优秀公务员队伍去浙江疗养几天,整天忙于文字工作,有点儿憋闷,便欣然前往。第二天上午去湿地参观,坐船来到小岛上,见大雨如注,便躲到茶馆里喝茶,两位交警坐在边上,于是便聊了起来。见一位年轻一点的交警黑不溜秋,面如锅底;另一位年龄稍大的交警白皮细肉,有     

饮酒后吸食“K”粉中毒死亡1例

1案件简介某女,16岁,某年11月某日晚上在某KTV喝了少量啤酒后,第二天下午被发现死于其租住处的卫生间内。尸长161cm,发育正常,营养中等。尸斑暗红色,现于尸体颈、胸、腹未受压处,指压可褪色,尸斑固定。尸僵存在于全身各关节,中等强度。角膜轻度混浊,双侧瞳孔散大,直经0.6cm。左侧球睑结膜充血,右侧球睑结膜苍白。鼻梁中段见一0.5cm×0.5cm表皮剥脱。     

纸产品的那点事儿

近日，央视曝光了广西南宁市部分餐巾纸厂家所用原料并非原浆纸，而是回收纸，生产过程中还添加了会致癌的荧光增白剂和滑石粉。纸产品不合格，增加了病从口入和感染的概率。那么，我们怎样才能选到合格的卫生纸呢？     

浙江富阳描绘“富裕阳光的富春山居图”

位于浙江杭州西郊的富阳,是660多年前元代大画家黄公望画《富春山居图》的地方。今天,富阳全市上下正精心勾画一幅"富裕阳光的富春山居图",共同筑造"物质富裕,精神富有"的"富阳梦"。力抓项目推进促工业兴市     

红外上转换粉末显现手印研究

常用的指纹显现荧光粉末在某些客体表面应用时会面临背景荧光干扰的问题。红外上转换材料的反Stokes性质不同于一般物质的发光机制,可以有效地避免背景荧光的产生。用一种基于镧系元素合成的红外上转换粉末进行的指纹显现实验表明,该材料可以像普通荧光粉末一样有效地显现光滑非渗透性客体表面的潜在手印,同时还具有优异的消除客体背景荧光干扰的能力。此研究表明,对其附着能力做必要的改进后,红外上转换粉末有望在指纹显现方面获得广泛应用。